本文關(guān)鍵詞：探針?biāo)幬锓ㄔu價(jià)艾瑞昔布對CYP450酶活性的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分探針?biāo)幬锓ㄔu價(jià)艾瑞昔布對CYP3A酶的影響目的：建立CYP3A探針?biāo)幬镞溥_(dá)唑侖的HPLC測定方法,通過比較合用艾瑞昔布前后大鼠體內(nèi)瞇達(dá)唑侖藥動學(xué)參數(shù)的變化,進(jìn)而探討艾瑞昔布對CYP3A酶是否有誘導(dǎo)或者抑制作用。方法：色譜條件：Diamonsil C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流動相為乙腈-水(56：44,V/V)；檢測波長：225 nm；流速：1.0mL·min-1;柱溫：30℃；內(nèi)標(biāo)：地西泮。將大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對照組,每組20只,實(shí)驗(yàn)組每次灌胃艾瑞昔布灌胃液20 mg·kg-1,2次／天,對照組每天灌胃等量純化水,連續(xù)7天。第8天,每只大鼠尾靜脈注射瞇達(dá)唑侖10mg·kg-1,于給藥后不同時(shí)間點(diǎn)眼內(nèi)眥取血,樣品離心后取上層血漿樣品200μL于5 mL離心管中,加入內(nèi)標(biāo)溶液20μL,加入乙腈1 mL沉淀蛋白,渦旋振蕩3 min,離心(6525×g)2 min,取上清液950μL于1.5 mL離心管中,40℃水浴下氮?dú)饬鞔蹈?殘?jiān)?00μL流動相復(fù)溶,20μL進(jìn)樣分析。血漿藥物濃度采用DAS 2.1.1軟件擬合藥動學(xué)參數(shù),使用SPSS 13.1軟件對兩組的藥動學(xué)參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組與對照組的AUCo-t分別為(3.42±0.91)mg·h·L-1和(3.83±0.84)mg·h·L-1;AUC0-∞分別為(3.34±0.88)mg·h·L-1和(3.77±0.86) mg·h·L-1;t1/2分別為(0.37±0.07)h和(0.35±0.08)h;Cmax分別為(11.85±4.45)mg·L-1和(12.36±3.48)mg·L-1;V分別為(1.62±0.45)L·kg-1和(1.37+0.39)L·kg-1;CL分別為(3.14±0.85)L·h-1·kg-1和(2.74±0.66)L·h-1·kg-1。實(shí)驗(yàn)組與對照組主要藥動學(xué)參數(shù)的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論：本研究建立了大鼠血漿中咪達(dá)唑侖HPLC測定方法,藥動學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,合用艾瑞昔布前后咪達(dá)唑侖藥動學(xué)參數(shù)無顯著性變化,艾瑞昔布對大鼠靜脈注射咪達(dá)唑侖的藥動學(xué)無影響,說明艾瑞昔布不影響CYP3A酶活性。第二部分探針?biāo)幬锓ㄔu價(jià)艾瑞昔布對CYP2C9酶的影響目的：建立CYP2C9探針?biāo)幬锛妆交嵌‰宓腍PLC測定方法,利用探針?biāo)幬锓ㄑ芯堪鹞舨紝Υ笫篌w內(nèi)CYP2C9酶的影響。方法：色譜條件：DiamonsilC18色譜柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流動相為乙腈-水-冰醋酸-三三乙胺(50:50:0.4:0.5,V/V/V/V);檢測波長：230 nm；流速：1.0 mL·min-1;柱溫：30℃；內(nèi)標(biāo)：卡馬西平。將大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對照組,每組18只。實(shí)驗(yàn)組每天灌胃艾瑞昔布灌胃液20mg·kg-1,2次/天；對照組每次灌胃等量純化水,連續(xù)7天。第8天,每只大鼠灌胃甲苯磺丁脲灌胃液50mg·kg4,分別于給藥后不同時(shí)間內(nèi)眼內(nèi)眥取血0.5 mL于肝素鈉抗凝的離心管中,離心(6525×g)2 min,取上層血漿200μL于5 mL離心管中,加入內(nèi)標(biāo)溶液20μL,加入提取劑二氯甲烷1 mL,渦旋振蕩3 min,離心(6525×g)2 min,取下層有機(jī)相950μL于1.5 mL離心管中,40℃水浴下氮?dú)饬鞔蹈?殘?jiān)?00μL流動相復(fù)溶,取20μL進(jìn)樣分析,測定濃度。血漿藥物濃度采用DAS 2.1.1軟件擬合藥動學(xué)參數(shù),使用SPSS 13.1軟件對兩組的藥動學(xué)參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組的AUCo-t分別為(766.25±45.49) mg·h·mL-1和(1015.51±194.80) mg·h·mL-1;AUC0-∞分別為(811.96±172.82) mg·h·mL-1和(1077.64±254.16)mg·h·mL-1; Tmax分別為(0.99±0.68)h和(1.38±0.62)h；V分別為(0.54±0.11)L·kg-1和(0.25±0.09)L·kg-1;CL分別為(0.06±0.01)L·h-1·kg-1和(0.05±0.01)L·h-1·kg-1。實(shí)驗(yàn)組的AUCo-t、AUC0-∞、Tmax、V和CL與對照組相比均有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論：本研究建立了大鼠血漿中的甲苯磺丁脲HPLC測定方法,藥動學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示合用艾瑞昔布后,甲苯磺丁脲的AUC0-t和AUCo-顯著降低,CL明顯增加。說明艾瑞昔布誘導(dǎo)CYP2C9酶的活性,使甲苯磺丁脲的代謝加快。第三部分探針?biāo)幬锓ㄔu價(jià)艾瑞昔布對CYP2D6酶的影響目的：建立CYP2D6探針?biāo)幬餁滗逅嵊颐郎撤业腖C-MS/MS方法,通過合用艾瑞昔布前后探針?biāo)幬锼巹訉W(xué)參數(shù)的變化來探討艾瑞昔布對CYP2D6酶的影響。方法：色譜及質(zhì)譜條件：Symmetry C18色譜柱(2.1 mm×100mm,3.5 μm)；流動相：A為1‰甲酸水溶液,B為乙腈。采用梯度洗脫：0-3 min: 60%→90%B; 3～3.5 min:90%→60%B; 3.5～5 min:60%B;流速：0.4mL·min-1;進(jìn)樣量：10μL；柱溫：40℃。離子化方式：電噴霧離子化源(ESI)；監(jiān)測方式：正離子監(jiān)測；掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)；離子源噴射電壓5500 V；離子源溫度：550℃；氣簾氣(CUR)壓力：10 psi；源內(nèi)氣體1 (GS1, N2)壓力：55 psi；源內(nèi)氣體2 (GS2, N2)壓力：55 psi；碰撞氣(CAD)壓力：4 psi；氫溴酸右美沙芬的DP、CE值分別為95和37,磺胺甲嗯唑的DP、CE值分別為73和22；用于定量分析的離子反應(yīng)分別為m/z 272.3→212.8(氫溴酸右美沙芬)和m/z 254.2→155.8(磺胺甲嗯唑,內(nèi)標(biāo))。30只大鼠分為實(shí)驗(yàn)組和對照組,每組15只,實(shí)驗(yàn)組每天灌胃艾瑞昔布20mg·kg-1,2次/天,對照組每天灌胃等量純化水,連續(xù)7天。第8天,每只大鼠灌胃氫溴酸右美沙芬12mg·kg-1,于給藥后不同時(shí)間點(diǎn)眼內(nèi)眥取血,于肝素鈉抗凝離心管中。離心后取上層血漿樣品200μL于5 mL離心管中,加入內(nèi)標(biāo)溶液20μL,加入乙酸乙酯1 mL,渦旋振蕩3 min,離心2 min(離心力6525×g),取上清液950μL于1.5 mL離心管中,40℃水浴下氮?dú)饬鞔蹈?殘?jiān)?00μL流動相復(fù)溶,10μL進(jìn)樣,記錄峰面積。DAS 2.1.1軟件擬合藥動學(xué)參數(shù),使用SPSS 13.1軟件對兩組的藥動學(xué)參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組與對照組藥動學(xué)參數(shù)：t1/2分別為(7.23+2.16)h和(5.48+2.93)h；實(shí)驗(yàn)組與對照組的t1/2有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)建立了大鼠血漿中氫溴酸右美沙芬的LC-MS/MS含量測定方法。藥動學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,合用艾瑞昔布前后氫溴酸右美沙芬在大鼠體內(nèi)的半衰期明顯延長,說明艾瑞昔布對CYP2D6酶有輕微抑制作用,減慢右美沙芬的代謝。
【關(guān)鍵詞】：艾瑞昔布 探針?biāo)幬?/strong> 藥動學(xué) HPLC LC-MS/MS CYP3A CYP2C9 CYP2D6
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R965
【目錄】：

• 中文摘要5-9
• 英文摘要9-14
• 英文縮寫14-15
• 引言15-17
• 第一部分 探針?biāo)幬锓ㄔu價(jià)艾瑞昔布對CYP3A酶的影響17-44
• 前言17
• 材料與方法17-21
• 結(jié)果21-23
• 附圖23-34
• 附表34-42
• 討論42
• 小結(jié)42-43
• 參考文獻(xiàn)43-44
• 第二部分 探針?biāo)幬锓ㄔu價(jià)艾瑞昔布對CYP2C9酶的影響44-70
• 前言44
• 材料與方法44-48
• 結(jié)果48-50
• 附圖50-59
• 附表59-67
• 討論67
• 小結(jié)67-69
• 參考文獻(xiàn)69-70
• 第三部分 探針?biāo)幬锓ㄔu價(jià)艾瑞昔布對CYP2D6酶的影響70-96
• 前言70
• 材料與方法70-75
• 結(jié)果75-77
• 附圖77-86
• 附表86-94
• 討論94
• 小結(jié)94-95
• 參考文獻(xiàn)95-96
• 結(jié)論96-97
• 綜述 昔布類非甾體抗炎藥藥動學(xué)及藥效學(xué)概述97-103
• 參考文獻(xiàn)101-103
• 致謝103-104
• 個(gè)人簡歷104-105

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張香凝;李想;劉高峰;;RP-HPLC法同時(shí)測定大鼠血漿中4種CYP450探針?biāo)幬锏臐舛萚J];藥物分析雜志;2012年11期

  本文關(guān)鍵詞：探針?biāo)幬锓ㄔu價(jià)艾瑞昔布對CYP450酶活性的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：358778

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