本文關(guān)鍵詞：自組裝透明質(zhì)酸納米粒作為天冬酰胺酶運(yùn)送載體的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：蛋白質(zhì)和多肽藥物是生物大分子,在臨床使用的過(guò)程中非常容易變性導(dǎo)致失活。因此,應(yīng)用藥物載體或運(yùn)輸系統(tǒng)提高其穩(wěn)定性就顯得非常有必要。藥物運(yùn)載體在提高藥物的穩(wěn)定性療效方面有許多優(yōu)點(diǎn),例如,可以提高蛋白質(zhì)／多肽在水溶液中的穩(wěn)定性；控制蛋白質(zhì)／多肽分子的釋放,以持續(xù)的緩釋避免突釋帶來(lái)的副作用。透明質(zhì)酸(HA),是一種高分子(105-107Da)天然粘多糖,廣泛存在于體液和組織中。由于生物可降解性、低的免疫原性,HA是作為藥物緩釋載體的理想材料。天冬酰胺酶是治療急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)和其它造血系統(tǒng)惡性腫瘤的藥物。天冬酰胺酶能夠催化天冬酰胺轉(zhuǎn)化為天冬氨酸和氨。然而作為一種外源蛋白,天冬酰胺酶在臨床使用中會(huì)過(guò)早失活、被快速清除,需要反復(fù)注射來(lái)維持治療水平,導(dǎo)致免疫應(yīng)答反應(yīng)。因此,可以通過(guò)將天冬酰胺酶包埋入載體來(lái)增長(zhǎng)酶在血液循環(huán)中的半衰期。采取活性酯法制備脫氧膽酸酸化透明質(zhì)酸,通過(guò)控制脫氧膽酸的加入量制得不同取代度的HD耦合物。隨著HD耦合物中氨基化脫氧膽酸的增加,取代度增加,耦合物的平均分子量也相應(yīng)的增加。應(yīng)用超聲法制備自組裝納米粒懸液,用動(dòng)態(tài)光散射儀進(jìn)行了粒徑大小和粒度分布檢測(cè),發(fā)現(xiàn)不同取代度HD耦合物超聲得到的納米粒徑數(shù)值也不同。Zeta電位是表征表面電荷的重要指標(biāo),取代度不同的HD納米耦合物Zeta數(shù)值均為負(fù)值,并且相差不大。隨后檢測(cè)稀釋濃度、儲(chǔ)存時(shí)間、外界環(huán)境pH、離子強(qiáng)度和疏水強(qiáng)度等不同條件對(duì)HD耦合物穩(wěn)定性有一定的影響。將天冬酰胺酶包載于納米粒中,測(cè)試了HD納米粒包載藥物天冬酰胺酶的載藥量和包封率,隨著天冬酰胺酶加入量的增加,HD耦合物納米溶液的載藥量增加,包封率降低。通過(guò)對(duì)天冬酰胺酶體外釋放的研究,得出取代度越大,藥物釋放越緩慢,緩釋效果越好。驗(yàn)證了不同離子強(qiáng)度對(duì)HD納米粒載藥量的影響,說(shuō)明納米粒和酶分子之間存在著疏水相互作用。對(duì)所使用材料的血液相容性做了測(cè)試,證明材料生物相容性好。通過(guò)對(duì)比天冬酰胺酶和自組裝納米粒天冬酰胺酶復(fù)合物酶的酶活力性質(zhì)的差別,探究了不同反應(yīng)溫度和不同酸堿度對(duì)復(fù)合酶和天然酶的影響,復(fù)合酶活力回收率為83.10%。測(cè)試了酶的動(dòng)力學(xué)參數(shù),用雙倒數(shù)法得到酶的米氏常數(shù),復(fù)合酶對(duì)底物天冬酰胺的親和能力提高,水解底物天冬酰胺的活力增加。
【關(guān)鍵詞】：自組裝透明質(zhì)酸 納米運(yùn)載體 天冬酰胺酶
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R943
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-13
• 前言13-29
• 1 蛋白質(zhì)藥物的應(yīng)用現(xiàn)狀及存在的問(wèn)題13-14
• 1.1 分類13
• 1.2 應(yīng)用現(xiàn)狀13
• 1.3 存在問(wèn)題13-14
• 2 藥物載體14-19
• 2.1 脂質(zhì)體蛋白質(zhì)藥物載體15-16
• 2.2 微球蛋白質(zhì)藥物載體16-17
• 2.3 納米球蛋白質(zhì)藥物載體17-19
• 3 透明質(zhì)酸(HA)19-24
• 3.1 透明質(zhì)酸做藥物載體的給藥途徑20-23
• 3.2 透明質(zhì)酸納米粒的應(yīng)用及研究現(xiàn)狀23-24
• 4 天冬酰胺酶24-27
• 4.1 天冬酰胺酶簡(jiǎn)介24-25
• 4.2 天冬酰胺酶的臨床應(yīng)用及現(xiàn)狀25-27
• 5 研究依據(jù)及內(nèi)容27-29
• 5.1 研究依據(jù)27
• 5.2 研究?jī)?nèi)容27-28
• 5.3 技術(shù)路線28-29
• 第一章 自組裝透明質(zhì)酸納米粒的制備及影響材料穩(wěn)定性因素的研究29-42
• 引言29-30
• 1 材料30-31
• 1.1 藥品與試劑30
• 1.2 主要儀器、設(shè)備30-31
• 2 方法31-34
• 2.1 疏水化透明質(zhì)酸的制備31-32
• 2.2 取代度的測(cè)定32
• 2.3 粒徑大小及粒徑分布的測(cè)定32
• 2.4 Zeta電位的測(cè)定32
• 2.5 原子力顯微鏡的測(cè)定32
• 2.6 不同的稀釋濃度對(duì)材料穩(wěn)定性的影響32-33
• 2.7 不同的儲(chǔ)存時(shí)間對(duì)材料穩(wěn)定性的影響33
• 2.8 不同的pH對(duì)材料穩(wěn)定性的影響33
• 2.9 不同濃度的NaCl溶液對(duì)材料穩(wěn)定性的影響33
• 2.10 不同濃度的尿素溶液對(duì)材料穩(wěn)定性的影響33-34
• 3 結(jié)果與討論34-41
• 3.1 取代度的測(cè)定結(jié)果34
• 3.2 粒徑大小及Zeta電位測(cè)定結(jié)果34-35
• 3.3 原子力顯微鏡測(cè)定結(jié)果35
• 3.4 不同的稀釋濃度對(duì)材料穩(wěn)定性的影響35-36
• 3.5 不同的儲(chǔ)存時(shí)間對(duì)材料穩(wěn)定性的影響36-37
• 3.6 不同的pH對(duì)材料穩(wěn)定性的影響37-38
• 3.7 不同濃度的NaCl溶液對(duì)材料穩(wěn)定性的影響38-39
• 3.8 不同濃度的尿素溶液對(duì)材料穩(wěn)定性的影響39-41
• 4 小結(jié)41-42
• 第二章 自組裝納米粒作為天冬酰胺酶藥物運(yùn)載體的研究42-51
• 引言42
• 1 材料42-44
• 1.1 主要藥品、試劑42-43
• 1.2 主要儀器設(shè)備43-44
• 2 方法44-46
• 2.1 HD納米粒包載天冬酰胺酶的載藥量與包封率44-45
• 2.2 天冬酰胺酶體外釋放45
• 2.3 不同離子強(qiáng)度對(duì)載藥量的影響45
• 2.4 不同濃度的尿素溶液對(duì)載藥量的影響45
• 2.5 血液相容性檢測(cè)45-46
• 3 結(jié)果與討論46-49
• 3.1 HD納米粒包載天冬酰胺酶的載藥量與包封率46-47
• 3.2 天冬酰胺酶的體外釋放研究47-48
• 3.3 不同離子強(qiáng)度對(duì)載藥量的影響48
• 3.4 不同濃度的尿素溶液對(duì)載藥量的影響48-49
• 3.5 血液相容性檢測(cè)49
• 4 小結(jié)49-51
• 第三章 復(fù)合酶與天然酶酶學(xué)性質(zhì)的研究51-60
• 引言51
• 1 材料51-53
• 1.1 主要藥品、試劑51-52
• 1.2 主要儀器設(shè)備52-53
• 2 方法53-56
• 2.1 天冬酰胺酶的活力測(cè)定53-55
• 2.2 米氏常數(shù)測(cè)定55
• 2.3 酶的活力影響因素研究55-56
• 2.4 血漿中酶的穩(wěn)定性56
• 3 結(jié)果與討論56-59
• 3.1 酶的活力回收率56
• 3.2 米氏常數(shù)測(cè)定56-57
• 3.3 天冬酰胺酶的活力影響因素研究57-59
• 3.4 血漿中天然酶與復(fù)合酶的穩(wěn)定性59
• 4 小結(jié)59-60
• 全文總結(jié)60-61
• 主要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn)61-62
• 參考文獻(xiàn)62-68
• 致謝68-69
• 附錄169-70
• 附錄270

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1 滇川;自組裝材料[J];世界科學(xué);1996年02期

2 王秀梅;喬琳;;促血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的功能化自組裝多肽框架材料的篩選和制備[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2011年38期

3 李恒,石錦霞,何平笙;亞觀尺度的自組裝[J];化學(xué)通報(bào);2005年02期

4 陳昌盛;李仕穎;王俊;張先正;卓仁禧;;小分子硼酸肽的自組裝[J];中國(guó)材料進(jìn)展;2012年06期

5 王金鳳,賈欣茹,李盈,鐘z，

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