本文關(guān)鍵詞：三株海洋放線菌次生代謝產(chǎn)物及其活性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：海洋放線菌是一類革蘭氏陽性菌,經(jīng)過億萬年的進(jìn)化,形成了以自我生物活性次生代謝產(chǎn)物為主體的化學(xué)防御體系,其次生代謝產(chǎn)物中常蘊(yùn)含大量結(jié)構(gòu)新穎、生物活性良好的單體化合物,為海洋來源藥物先導(dǎo)化合物的開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。本課題對(duì)64株海洋放線菌進(jìn)行活性初篩,結(jié)合HPLC-DAD-UV圖譜的導(dǎo)向作用,選擇3株次生代謝產(chǎn)物豐富、生物活性良好的菌株Streptomyces sp.SCSIO 5003、Streptomyces sp.SCSIO 1662、Streptomyces sp.SCSIO ZS0361進(jìn)行放大發(fā)酵培養(yǎng)、萃取分離,并對(duì)得到的單體化合物進(jìn)行細(xì)胞毒活性和抑菌活性測(cè)試。菌株Streptomyces sp.SCSIO 5003(M-AM6培養(yǎng)基)放大發(fā)酵培養(yǎng)后,分別以丙酮(1:1,v/v)和丁酮(1:1.5,v/v)萃取菌絲體及菌液,采用硅膠柱色譜、RP-MPLC及半制備型HPLC多種色譜方法對(duì)萃取浸膏進(jìn)行分離純化,獲得化合物5003-A1、5003-A2、5003-A3、5003-A4、5003-A5、5003-A6、5003-A7、5003-A8、5003-A9和5003-A10。經(jīng)ESI-HRMS,1D NMR及2D NMR鑒定5003-A2為Marihysin A,5003-A3、5003-A4、5003-A5為同分異構(gòu)體,5003-A6、5003-A7為同分異構(gòu)體經(jīng)Sci Finder查詢?yōu)樾禄衔�。菌株Streptomyces sp.SCSIO 1662(M-ISP2培養(yǎng)基)放大發(fā)酵培養(yǎng)后分別用丙酮(1:1,v/v)和丁酮(1:1.5,v/v)萃取菌絲體及菌液,采用硅膠柱色譜、RP-MPLC及制備型RP-HPLC多種色譜方法對(duì)萃取浸膏進(jìn)行分離純化,獲得化合物1662-B、1662-C、1662-D、1662-E、1662-F、1662-G、1662-H及1662-I。經(jīng)ESI-HRMS,1D NMR鑒定1662-B為Dibutylphthalate,1662-D為Indole-3-acetic acid,1662-F為1H-Indole-3-carbaldehyde,1662-G為3-Hydroxyacetylindole,1662-I為1H-Indole-3-carboxylic acid。菌株Streptomyces sp.SCSIO ZS0361(M-ISP2培養(yǎng)基)放大發(fā)酵培養(yǎng)后分別用丙酮(1:1,v/v)和丁酮(1:1.5,v/v)萃取菌絲體及菌液,經(jīng)HPLC檢測(cè)成分基本相同合并,采用硅膠柱色譜、RP-MPLC及制備型RP-HPLC多種色譜方法對(duì)合并后的總浸膏進(jìn)行分離純化,獲得化合物ZS0361-B、ZS0361-C、ZS0361-D、ZS0361-F、ZS0361-G。經(jīng)ESI-HRMS,1D NMR及2D NMR鑒定ZS0361-B為Bafilomycin D,ZS0361-D為1H-Indole-3-carbaldehyde,ZS0361-G為3-Hydroxy-2-methylpyrone(maltol);ZS0361-F經(jīng)Sci Finder查詢?yōu)樾禄衔�。�?duì)23個(gè)單體化合物采用微量肉湯稀釋法和海蝦生物致死法進(jìn)行最小抑菌濃度(MIC)及細(xì)胞毒活性測(cè)試,其中5003-A2、5003-A3、5003-A4、5003-A5、5003-A6、5003-A7、5003-A8、ZS0361-C對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌有抑制作用,MIC值均為128?g/m L;ZS0361-B、ZS0361-C對(duì)耐甲氧西林表皮葡萄球菌有抑制作用,MIC值分別為64?g/m L和16?g/m L;5003-A8、1662-I、ZS0361-C對(duì)蘇云金芽孢桿菌有抑制作用,MIC值分別為16?g/m L,32?g/m L和16?g/m L;ZS0361-C對(duì)糞鏈球菌有抑制作用,MIC值為32?g/m L;ZS0361-B、ZS0361-C對(duì)藤黃微球菌有抑制作用,MIC值分別為64?g/m L和8?g/m L;5003-A2、5003-A3、5003-A4、5003-A5、5003-A6、5003-A7具有較弱海蝦致死活性,ZS0361-F具有中等海蝦致死活性,1662-C具有較強(qiáng)海蝦致死活性,表明上述化合物具有潛在的細(xì)胞毒(抗腫瘤)活性。
【關(guān)鍵詞】：海洋放線菌 Streptomyces sp.SCSIO 5003 Streptomyces sp.SCSIO 1662 Streptomyces sp.SCSIO ZS0361 次生代謝產(chǎn)物 抑菌活性 細(xì)胞毒活性
【學(xué)位授予單位】：大連海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R915
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-10
• 符號(hào)說明10-11
• 1 緒論11-29
• 1.1 立題的目的及意義11-12
• 1.2 放線菌及海洋放線菌資源12
• 1.3 海洋放線菌及其次生代謝產(chǎn)物研究狀況12-28
• 1.3.1 甾醇類13
• 1.3.2 聚醚類13-14
• 1.3.3 聚酮類14-15
• 1.3.4 萜類15-16
• 1.3.5 醌類16-18
• 1.3.6 生物堿類18-22
• 1.3.7 （環(huán)）肽類22-25
• 1.3.8 大環(huán)內(nèi)酯類25-28
• 1.4 本課題開展技術(shù)路線28-29
• 2 64株海洋放線菌篩選29-57
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料29-30
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)菌種29
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑29
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)主要儀器與設(shè)備29-30
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法30-32
• 2.2.1 發(fā)酵培養(yǎng)基30
• 2.2.2 樣品發(fā)酵培養(yǎng)、制備及指示菌、海蝦卵培養(yǎng)30-31
• 2.2.3 篩選31-32
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果32-55
• 2.3.1 64株海洋放線菌發(fā)酵粗提物抑菌活性及細(xì)胞毒活性測(cè)試結(jié)果32-39
• 2.3.2 64株海洋放線菌發(fā)酵粗提物HPLC-DAD圖譜結(jié)果（圖 2-1）39-55
• 2.4 分析與討論55-57
• 3 海洋放線菌Streptomyces sp. SCSIO 5003次生代謝產(chǎn)物的分離鑒定57-65
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料57-58
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)菌種57
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑57
• 3.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備57-58
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法58-61
• 3.2.1 菌株發(fā)酵培養(yǎng)58-59
• 3.2.2 發(fā)酵產(chǎn)物提取與分離59-61
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果61-65
• 3.3.1 化合物純度檢測(cè)61
• 3.3.2 化合物結(jié)構(gòu)鑒定61-65
• 4 海洋放線菌Streptomyces sp. SCSIO 1662次生代謝產(chǎn)物的分離鑒定65-71
• 4.1 實(shí)驗(yàn)材料65-66
• 4.1.1 實(shí)驗(yàn)菌種65
• 4.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑65
• 4.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備65-66
• 4.2 實(shí)驗(yàn)方法66-68
• 4.2.1 菌株發(fā)酵培養(yǎng)66-67
• 4.2.2 發(fā)酵產(chǎn)物提取與分離67-68
• 4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果68-71
• 4.3.1 化合物純度檢測(cè)68
• 4.3.2 化合物結(jié)構(gòu)鑒定68-71
• 5 海洋放線菌Streptomyces sp. SCSIO ZS0361次生代謝產(chǎn)物的分離鑒定71-78
• 5.1 實(shí)驗(yàn)材料71-72
• 5.1.1 實(shí)驗(yàn)菌種71
• 5.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑71
• 5.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備71-72
• 5.2 實(shí)驗(yàn)方法72-74
• 5.2.1 菌株發(fā)酵培養(yǎng)72-73
• 5.2.2 發(fā)酵產(chǎn)物提取與分離73-74
• 5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果74-78
• 5.3.1 化合物純度檢測(cè)74
• 5.3.2 化合物結(jié)構(gòu)鑒定74-78
• 6 生物活性測(cè)試78-83
• 6.1 實(shí)驗(yàn)材料78
• 6.1.1 實(shí)驗(yàn)菌種78
• 6.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑78
• 6.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備78
• 6.2 實(shí)驗(yàn)方法78-80
• 6.2.1 發(fā)酵培養(yǎng)基78-79
• 6.2.2 化合物樣品配制及指示菌、海蝦卵培養(yǎng)79
• 6.2.3 活性測(cè)試79-80
• 6.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果80-82
• 6.3.1 抑菌活性80-82
• 6.3.2 細(xì)胞毒活性82
• 6.4 分析與討論82-83
• 結(jié)論83-84
• 參考文獻(xiàn)84-90
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文目錄90-93
• 致謝93-94
• 附錄I 化合物高分辨質(zhì)譜94-113
• 附錄II化合物核磁共振譜113-145

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 蔡超靖;;海洋放線菌的研究概況[J];國(guó)外醫(yī)藥(抗生素分冊(cè));2011年05期

2 陳曉菲;高向東;顧覺奮;;海洋放線菌及其產(chǎn)物的多樣性[J];國(guó)外醫(yī)藥(抗生素分冊(cè));2013年01期

3 吳少杰;王淑軍;李富超;秦松;侯竹美;崔洪霞;;膠州灣海洋放線菌的分布及其抗微生物活性[J];中國(guó)海洋藥物;2006年05期

4 朱峰;劉曉紅;林永成;;海洋放線菌活性代謝產(chǎn)物研究最新進(jìn)展(英文)[J];中國(guó)抗生素雜志;2007年03期

5 何生美;薛永常;賀寶玲;張秀軍;張玉芬;;海洋放線菌抗腫瘤生物活性物質(zhì)研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年36期

6 傅玉鴻;陳鋼;姚香草;韋U_球;溫露;;四株海洋放線菌抗氧化活性初篩與微囊化包埋研究[J];亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥;2014年04期

7 李春遠(yuǎn);丁唯嘉;佘志剛;林永成;;海洋放線菌Streptomyces sp.(#195-02)的代謝產(chǎn)物研究[J];中藥材;2008年05期

8 王海雁;劉健;趙淑江;;海洋放線菌多樣性及其代謝產(chǎn)物研究進(jìn)展[J];中國(guó)海洋藥物;2010年01期

9 馬毅敏;陸園園;邢瑩瑩;奚濤;;海洋放線菌代謝產(chǎn)物蒽環(huán)類化合物研究進(jìn)展[J];藥物生物技術(shù);2011年06期

10 蔡超靖;丁彥博;單越琦;穆云龍;;海洋放線菌—藥物開發(fā)的新興資源[J];國(guó)外醫(yī)藥(抗生素分冊(cè));2012年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 閆培生;史翠娟;高秀君;侯純純;;海洋放線菌及其發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)產(chǎn)毒鐮刀菌的抑制效果研究[A];2010年中國(guó)菌物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2010年

2 解修超;洪葵;戴好富;;海洋放線菌及活性物質(zhì)的多樣性[A];2005熱帶亞熱帶微生物資源的遺傳多樣性與基因發(fā)掘利用研討會(huì)論文集[C];2005年

3 田新朋;張Pr;李文均;;南海沉積環(huán)境海洋放線菌多樣性及系統(tǒng)學(xué)分類研究[A];2008年中國(guó)微生物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2008年

4 石妞妞;徐慶妍;宋思揚(yáng);沈月毛;;從海洋放線菌中尋找安莎霉素類化合物[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第八屆天然有機(jī)化學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

5 徐俊;;海洋放線菌多樣性及其生物活性物質(zhì)的研究[A];2008年中國(guó)微生物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2008年

6 張飛;陳亮宇;趙心清;鮑曉明;;海洋放線菌纖維素降解酶基因挖掘及功能分析[A];第四屆全國(guó)微生物基因組學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

7 閆培生;曹立新;王春環(huán);王凱;;海洋放線菌的分離及其抑菌活性菌株的篩選[A];2008年中國(guó)微生物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2008年

8 陳雷;林秀坤;;海洋放線菌抗腫瘤活性物質(zhì)研究進(jìn)展[A];2007醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十屆全國(guó)腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2007年

9 陳彩霞;張立新;;海洋放線菌次生代謝產(chǎn)物中抗結(jié)核活性成份的篩選及分離純化[A];2010年中國(guó)科學(xué)院微生物研究所博士后學(xué)術(shù)年會(huì)暨第二屆博誼論壇論文摘要集[C];2011年

10 林海鵬;莊令;洪葵;;海南文昌頭苑紅樹林海洋放線菌抗腫瘤細(xì)胞活性初篩[A];中國(guó)海洋生化學(xué)術(shù)會(huì)議論文薈萃集[C];2005年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 李平;14株海洋放線菌活性產(chǎn)物篩選及菌株MA03抑AFT效能研究[D];哈爾濱工業(yè)大學(xué);2015年

2 侯艷華;四株海洋放線菌遺傳轉(zhuǎn)化體系的研究[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所）;2006年

3 吳少杰;從膠州灣海洋放線菌中發(fā)現(xiàn)的新型星形孢菌素等7種新結(jié)構(gòu)化合物[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所）;2005年

4 常顯波;不同環(huán)境海洋放線菌多樣性研究及2株放線菌新菌的分類鑒定[D];中國(guó)海洋大學(xué);2011年

5 王佩;三株海洋放線菌次生代謝產(chǎn)物研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2014年

6 曾偉;海洋放線菌抗腫瘤活性菌株的篩選及菌株N350抗腫瘤活性物質(zhì)的研究[D];廈門大學(xué);2001年

7 付鵬;四株海洋放線菌產(chǎn)生的抗生活性化合物[D];中國(guó)海洋大學(xué);2013年

8 黃惠琴;海洋放線菌抗MRSA菌株的篩選及菌株AM105活性物質(zhì)的研究[D];華南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 栗方崎;海洋放線菌的分離篩選及其雙組分信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)功能的初步研究[D];山東大學(xué);2015年

2 彭坤;三株海洋放線菌次級(jí)代謝產(chǎn)物研究[D];廣東藥學(xué)院;2015年

3 苑朕昱;兩株海洋放線菌次生代謝產(chǎn)物及其生物活性研究[D];大連海洋大學(xué);2015年

4 趙志娟;海洋放線菌Salinispora arenicola CNS-205 A domain Sare0718的表達(dá)純化及其特異性底物篩選[D];華中師范大學(xué);2015年

5 郭俊夫;海洋放線菌P10-16活性成份分離鑒定及結(jié)構(gòu)解析研究[D];華東理工大學(xué);2016年

6 馬睿霄;三株海洋放線菌次生代謝產(chǎn)物及其活性研究[D];大連海洋大學(xué);2016年

7 邵陽;大連海域可培養(yǎng)海洋放線菌的分離篩選及鑒定[D];黑龍江大學(xué);2011年

8 顧忠旗;一株抗菌海洋放線菌的分離鑒定及其活性成分的初步研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2007年

9 原居林;一株抗菌海洋放線菌的分離鑒定及其活性成分的初步研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2008年

10 唐婧媛;海洋放線菌篩選及其表征研究[D];大連工業(yè)大學(xué);2011年

  本文關(guān)鍵詞：三株海洋放線菌次生代謝產(chǎn)物及其活性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：305737