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三維培養(yǎng)腫瘤組織觀測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞干性及侵襲能力的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-01-10 00:08
  大多數(shù)腫瘤病人在進(jìn)行化療數(shù)月后會(huì)產(chǎn)生耐藥機(jī)制,臨床中主要是通過(guò)不同藥物的聯(lián)合使用,提高病人化療療效并降低藥物不良反應(yīng),以達(dá)到更好的治療效果。其中神經(jīng)膠質(zhì)瘤(GBM)具有侵襲性強(qiáng)易復(fù)發(fā)的特點(diǎn),抑制其侵襲性可能在治療中起到效果。本論文主要對(duì)腫瘤組織進(jìn)行體外三維培養(yǎng)的聯(lián)合用藥并觀察耐藥細(xì)胞是否具有干細(xì)胞標(biāo)志物CD44的表達(dá);發(fā)現(xiàn)體外加藥后腫瘤組織存在CD44的表達(dá),并初步探索了CD44與耐藥細(xì)胞之間的相關(guān)性,觀察發(fā)現(xiàn)在乳腺癌以及胰腺癌中少部分耐藥細(xì)胞具有CD44的表達(dá)。本論文以體外培養(yǎng)的小鼠腦切片觀察了ITE對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲的影響;發(fā)現(xiàn)ITE(2-(1’H-indole-3’-carbonyl)-thiazole-4-carboxylic acid methyl ester)可以抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的侵襲。以小鼠原位膠質(zhì)瘤模型研究了小分子化合物ITE與5-氟尿嘧啶、紫杉醇聯(lián)合用藥的藥效,發(fā)現(xiàn)聯(lián)合用藥并沒(méi)有提高小鼠的生存率,具體原因值得進(jìn)一步研究。免疫熒光檢測(cè)ITE治療后的小鼠膠質(zhì)瘤,發(fā)現(xiàn)加藥組中也有少量CD44的表達(dá)。結(jié)論:在人胰腺癌組織、乳腺癌組織治療后有少量耐藥細(xì)胞表達(dá)CD44;ITE... 

【文章來(lái)源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】:49 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

三維培養(yǎng)腫瘤組織觀測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞干性及侵襲能力的影響


培養(yǎng)技術(shù)示意圖

腦片,模具,化療藥,組織培養(yǎng)


:DMEM-F12+0.2mM 谷氨酰胺+4.5mg/化療藥溶于無(wú)菌水得到濃度的化療藥養(yǎng)織是來(lái)源于內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院瘤組織培養(yǎng)具體操作:在生物安全柜胞培養(yǎng)皿中,加含 3%雙抗的 PBS 浸泡 2 所示。選取無(wú)菌一次性刮胡刀片,位的 5-6 片,放置于 transwell 板的PBS 清洗 1-2 次,棄掉。下室加入含 1%的底部,CO2培養(yǎng)箱中過(guò)夜培養(yǎng),每天

示意圖,標(biāo)準(zhǔn)品,示意圖,冰箱


抗體包被板條 8x12封板膠紙 4 張需要使用的試劑與儀器作臺(tái);37℃溫箱;雙蒸水或去離子水;微量移液器及配套槍0.5mL、1.5mLEP 管;酶標(biāo)儀(450nm)織上清液:1000rpm 離心 15min,去除沉淀。min 從 4 度冰箱中取出 ELISA 試劑盒,平衡至室溫。液:濃洗滌縮液用超純水按 1:20 的比例稀釋?zhuān)?℃保存。 標(biāo)準(zhǔn)品按照一次用量分裝與 EP 管中,放于-20 度冰箱長(zhǎng)融。使用時(shí)取 1.0mL 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液加入到凍干標(biāo)準(zhǔn)品中,/ml。靜置 15min 待標(biāo)準(zhǔn)品徹底溶解后混勻,并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線圖 3。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]乳腺癌干細(xì)胞培養(yǎng)鑒定及分化過(guò)程中微環(huán)境的影響[J]. 張書(shū)卿,張博,洪亮,周永安,趙亮.  中國(guó)組織工程研究. 2015(14)
[2]乳腺癌干細(xì)胞的培養(yǎng)及鑒定[J]. 鄭文博,潘凌霄,唐煒,高進(jìn),葉熹罡.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(12)



本文編號(hào):2967666

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