本文關(guān)鍵詞：黃河三角洲來源的耐鹽堿放線菌OUCMDZ-2399的抗生活性產(chǎn)物研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：微生物的多樣性為新化合物的多樣性提供了堅實的基礎(chǔ),也為生物化學(xué)的革新提供豐富的資源。目前有超過23,000個已知的天然來源化合物,其中42%來自于放線菌。在將近10,000個抗生素類天然產(chǎn)物中,就有45-55%來自于鏈霉菌的次級代謝產(chǎn)物。而最近的統(tǒng)計數(shù)據(jù)表明我們發(fā)現(xiàn)的微生物中,真菌僅占全部生物量的5%,細菌(包含放線菌)還不足0.1%。黃河三角洲是長期的海陸相互作用形成的具有復(fù)雜生態(tài)環(huán)境的地域,土壤鹽堿化,部分地區(qū)鹽度頗高。在兼具海陸特性的土壤中,土著的生物物種包括微生物都形成了較為獨特的代謝方式,產(chǎn)生新穎的活性代謝產(chǎn)物�；谝陨涎芯楷F(xiàn)狀,這一區(qū)域的放線菌具有潛在研究價值。為研究該來源的具有耐鹽堿特性的菌株次級代謝產(chǎn)物,我們使用化學(xué)特征與生物活性集成的篩選模式,同時追蹤生物活性,對該地區(qū)的微生物進行了研究。主要內(nèi)容包括：耐鹽堿微生物的分離純化,耐鹽堿放線菌的生物化學(xué)篩選以及發(fā)酵條件優(yōu)化；優(yōu)選符合條件的放線菌進行發(fā)酵并分離純化代謝產(chǎn)物；化合物的結(jié)構(gòu)鑒定以及活性評價。從黃河三角洲土壤樣品中分離純化獲得86株微生物,排重后余66株,包括47株放線菌和19株真菌。通過化學(xué)和活性雙重標(biāo)準(zhǔn)的篩選,得到兩株活性優(yōu)良的耐鹽堿放線菌OUCMDZ-2399和OUCMDZ-2407。通過從培養(yǎng)基、樹脂、pH、鹽度四個方面摸索放線菌的最佳生長條件,確定發(fā)酵OUCMDZ-2399。發(fā)酵完畢后對其次級代謝產(chǎn)物采用加壓正向硅膠柱色譜、減壓硅膠柱色譜、薄層色譜、凝膠柱色譜和半制備高效液相色譜等多種色譜分離技術(shù)進行分離純化,每次純化完畢后都進行定性的生物活性測試,以追蹤活性化合物所在的流分,最終從OUCMDZ-2399中獲得7個化合物,目前已鑒定其中3個。已鑒定的化合物均為Lobophorins化合物,結(jié)構(gòu)上屬于4-羥乙酰乙酸內(nèi)酯(tetronate)化合物。利用藥敏紙片法和微量比濁法對化合物進行抑菌活性評價,確定化合物對金黃色葡萄球菌的MIC等于甚至低于陽性藥環(huán)丙沙星,對于枯草芽孢桿菌也有較好的抑制活性。其后采用MTT法和CCK-8法對化合物進行細胞毒活性測試,基本上對于A549、 K562、 MCF-7以及HL-60均無抑制作用。綜上所述,本文結(jié)合化學(xué)與生物活性集成篩選模式得到一株耐鹽堿放線菌,并對其進行次級代謝產(chǎn)物的研究,分離鑒定了3個化合物,并對其進行抑菌和細胞毒的初步評價。以上結(jié)果表明黃河三角洲中確實有很大生物及化學(xué)的挖掘潛質(zhì),放線菌一如既往表現(xiàn)出出色的研究潛力。
【關(guān)鍵詞】：耐鹽堿放線菌 黃河三角洲 次級代謝產(chǎn)物 抑菌活性 Lobophorins
【學(xué)位授予單位】：中國海洋大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R915
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• Abbreviation10-12
• 前言12-34
• 1 Tetronates化合物的結(jié)構(gòu)12-16
• 2 Lobophorins化合物的活性16-19
• 3 Lobophorins化合物的生物合成19-25
• 4 Lobophorins化合物的全合成25-30
• 小結(jié)30-31
• References31-34
• 第一章 耐鹽堿菌株的分離及篩選34-65
• 1.1 微生物的分離純化34-38
• 1.2 菌株的排重及保藏38-42
• 1.3 次級代謝產(chǎn)物活性篩選42-50
• 1.4 候選菌株發(fā)酵條件的摸索50-63
• References63-65
• 第二章 耐鹽堿放線菌OUCMDZ-2399抑菌活性產(chǎn)物研究65-85
• 2.1 菌株發(fā)酵及化合物分離65-72
• 2.2 化合物結(jié)構(gòu)鑒定72-81
• 2.3 化合物結(jié)構(gòu)表征81
• 2.4 化合物的活性評價81-83
• 2.5 小結(jié)與討論83-84
• Reference84-85
• 第三章 實驗部分85-94
• 3.1 實驗材料、試劑及儀器85-89
• 3.2 試驗方法89-93
• References93-94
• 結(jié)語與創(chuàng)新點94-95
• 個人簡歷及相關(guān)研究成果95
• 相關(guān)研究成果95-96
• 致謝96-97
• 附錄97-104

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1 楊燁;王e，

本文編號：257024