本文關(guān)鍵詞：兔骨髓間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)及其載體的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:于體外對新西蘭白兔骨髓間充質(zhì)干細胞進行培養(yǎng),分別采用密度梯度離心法和全骨髓貼壁培養(yǎng)法,并對兩種不同方法進行比較。應(yīng)用培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細胞和羊膜構(gòu)建結(jié)膜缺損的生物學(xué)修復(fù)材料。方法:1正常的3月齡的新西蘭白兔,在無菌條件下,行骨髓穿刺獲得新西蘭白兔骨髓,分別采用全骨髓貼壁培養(yǎng)法和密度梯度離心法對骨髓間充質(zhì)干細胞進行分離、純化、培養(yǎng),并進行傳代觀察。2分別將第3代骨髓間充質(zhì)干細胞接種于預(yù)置蓋玻片的六孔培養(yǎng)板中,細胞90%以上融合時,對細胞爬片進行免疫組化染色,并對兩種方法培養(yǎng)細胞的免疫組織化學(xué)結(jié)果進行對比。3將生長狀態(tài)良好的第3代骨髓間充質(zhì)干細胞接種到羊膜基底面,待細胞融合,取材后于掃描電鏡下觀察細胞與羊膜的貼合狀況,于透射電鏡下觀察細胞情況。結(jié)果:1兩種方法培養(yǎng)的間充質(zhì)干細胞形態(tài)相似。原代培養(yǎng)的新西蘭白兔骨髓間充質(zhì)干細胞呈簇狀、貼壁呈集落生長,細胞形態(tài)為梭形、多角形,傳代后細胞形態(tài)較為均一,分布均勻。細胞增長活躍、傳代周期短。2免疫組織化學(xué)染色CD34(-)、CD44(+)。3全骨髓培養(yǎng)法較密度梯度離心法CD44的平均光密度值低,CD34的平均光密度值高。4電鏡下觀察到細胞可以生長于羊膜基底面,與羊膜良好貼合。結(jié)論:1利用全骨髓貼壁培養(yǎng)法和密度梯度離心法均可以得到骨髓間充質(zhì)干細胞,并可以傳代,細胞生長狀態(tài)良好。2免疫組織化學(xué)結(jié)果支持所獲得的細胞為骨髓間充質(zhì)干細胞。3全骨髓貼壁培養(yǎng)法較密度梯度離心法培養(yǎng)的細胞純度低。4羊膜可以作為骨髓間充質(zhì)干細胞載體來構(gòu)建結(jié)膜缺損修復(fù)材料。
【關(guān)鍵詞】：骨髓間充質(zhì)干細胞 培養(yǎng)方法 細胞生長曲線 免疫組織化學(xué)染色 平均光密度值 羊膜
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R779.6
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-8
• 英文縮寫8-9
• 前言9-10
• 材料與方法10-15
• 結(jié)果15-17
• 附圖17-26
• 附表26-27
• 討論27-31
• 結(jié)論31-32
• 參考文獻32-35
• 綜述 骨髓間充質(zhì)干細胞研究進展35-46
• 參考文獻42-46
• 致謝46-47
• 個人簡歷47

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  本文關(guān)鍵詞：兔骨髓間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)及其載體的實驗研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：287358