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骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞保護(hù)感光細(xì)胞的機(jī)制探討

發(fā)布時(shí)間:2017-04-05 18:08

  本文關(guān)鍵詞:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞保護(hù)感光細(xì)胞的機(jī)制探討,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:研究大鼠視網(wǎng)膜強(qiáng)光照射后組織結(jié)構(gòu)和功能的變化;探討視網(wǎng)膜下腔移植BMSCs(Bone marrow mesenchymal stem cells,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞)對(duì)光損傷視網(wǎng)膜感光細(xì)胞的保護(hù)作用及可能的機(jī)制。方法:1.視網(wǎng)膜光損傷大鼠造模:將SD大鼠分別放入自制光照模具內(nèi),以4k Lux(kilo-Lux,千勒克斯)強(qiáng)光循環(huán)照射大鼠,分別持續(xù)3d(Day,天)、5d、7d、9d、12d后,于F-ERG(Flash electroretinogram,閃光視網(wǎng)膜電圖)檢測(cè)后摘除眼球,行HE(Hematoxin-eosion,蘇木-伊紅)染色,觀察大鼠視功能和視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)的變化情況。2.視網(wǎng)膜下腔移植GFP-BMSCs(Green fluorescence protein-Bone marrow mesenchymal stem cells,表達(dá)綠色熒光蛋白的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞):實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分成正常對(duì)照組、光損傷組、DMEM(Dulbeccos modified eagles medium,改良必須培養(yǎng)基)組和BMSCs組。將3-5P的GFP-BMSCs和DMEM注射入光損傷視網(wǎng)膜下腔,分別于移植后第1w(Week,周)、4w、8w、12w行F-ERG檢測(cè)后摘取眼球,TEM(Transmission electron microscope,透射電鏡)觀察感光細(xì)胞外節(jié)組織變化;免疫熒光染色觀察移植12w后,細(xì)胞遷移整合情況并比較各組Rho(Rhodopsin,視紫紅質(zhì))殘余量;HE染色對(duì)比視網(wǎng)膜外核層厚度改變;蛋白印跡檢測(cè)光損傷后不同處理組第1d、3d、1w、2w、4w、6w、8w、12w的GS(Glutamine synthetase,谷氨酰胺合成酶)、GDNF(Glial cell line-derived neurotrophic factor,膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子)表達(dá)量變化。結(jié)果:1.F-ERG檢測(cè)顯示光暴露后,視網(wǎng)膜功能受損(p0.05),外核層的厚度變薄(p0.05),二者均隨著光暴露時(shí)間延長(zhǎng)損傷加劇,功能和形態(tài)學(xué)改變表現(xiàn)出一致性。但光暴露5d以內(nèi)和9d以后,視網(wǎng)膜外核層厚度變薄的速度均較慢。2.視網(wǎng)膜下腔移植GFP-BMSCs可延緩光損傷視網(wǎng)膜外核層厚度變薄(p0.05);F-ERG顯示BMSCs注射組視網(wǎng)膜功能較光損傷組和DMEM組明顯提高(p0.05);TEM觀察到BMSCs組的感光細(xì)胞外節(jié)結(jié)構(gòu)損傷較輕;免疫熒光染色觀察到GFP-BMSCs僅極少量向外層視網(wǎng)膜組織遷移;BMSCs組Rho殘余量顯著高于光損傷組和DMEM組(p0.05);Western Blot檢測(cè)結(jié)果示:視網(wǎng)膜下腔注射組的GS在移植后第3d時(shí)降至最低,隨后進(jìn)行性升高到第2w,但BMSCs組的表達(dá)量始終高于其他光暴露組(p0.05),GDNF在BMSCs組的表達(dá)量亦較高,但其峰值在第1w時(shí)。結(jié)論:視網(wǎng)膜下腔移植GFP-BMSCs對(duì)光損傷視網(wǎng)膜的感光細(xì)胞有保護(hù)作用,移植的BMSCs自身分泌同時(shí)促進(jìn)宿主視網(wǎng)膜分泌GDNF等神經(jīng)保護(hù)因子,使GS表達(dá)上調(diào),提高抵御興奮性神經(jīng)毒性的能力,上述直接和間接方式可能是其發(fā)揮保護(hù)作用的機(jī)制。
【關(guān)鍵詞】:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 視網(wǎng)膜下腔移植 視網(wǎng)膜光損傷 感光細(xì)胞 機(jī)制
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R774.1
【目錄】:
  • 附錄4-5
  • 中文摘要5-7
  • 英文摘要7-9
  • 前言9-12
  • 第一部分 視網(wǎng)膜光損傷大鼠模型研究12-19
  • 1 材料12-13
  • 2 方法13-15
  • 3 結(jié)果15-17
  • 4 討論17-19
  • 第二部分 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞保護(hù)光損傷感光細(xì)胞的研究19-37
  • 1 材料19-20
  • 2 方法20-24
  • 3 結(jié)果24-33
  • 4 討論33-37
  • 結(jié)論37-38
  • 參考文獻(xiàn)38-43
  • 綜述43-55
  • 參考文獻(xiàn)50-55
  • 致謝55-56

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 蘇吉兒;丁靜文;韓松;羅宏;李俊發(fā);;Müller細(xì)胞反應(yīng)性膠質(zhì)化在急性高眼壓致大鼠視網(wǎng)膜損傷中作用[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2013年02期

2 李筱榮;張曉敏;;間充質(zhì)干細(xì)胞在視網(wǎng)膜疾病中的臨床應(yīng)用展望[J];眼科;2011年04期


  本文關(guān)鍵詞:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞保護(hù)感光細(xì)胞的機(jī)制探討,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):287457

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