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快速老化小鼠聽功能、耳蝸p75表達(dá)的增齡性變化及BMSC轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2017-04-03 02:11

  本文關(guān)鍵詞:快速老化小鼠聽功能、耳蝸p75表達(dá)的增齡性變化及BMSC轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:探討快速老化小鼠聽功能、神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體p75在其耳蝸表達(dá)的增齡性變化特點(diǎn)以及為應(yīng)用神經(jīng)生長(zhǎng)因子修飾的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行耳蝸移植治療老年聾的實(shí)驗(yàn)研究提供支持。方法:選取快速老化小鼠亞系8(SAMP8)為研究對(duì)象,3、5、7月齡各6只。測(cè)定ABR反應(yīng)閾值;p75在耳蝸的表達(dá)經(jīng)組織免疫組化檢測(cè),并測(cè)其光密度值。分為四個(gè)轉(zhuǎn)染組:A重組質(zhì)粒組;B脂質(zhì)體組;C空質(zhì)粒組;D陰性對(duì)照組。將含NGF的質(zhì)粒經(jīng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)至BMSC,48小時(shí)后固定于4%多聚甲醛中,免疫組化檢測(cè)NGF、p75在細(xì)胞中的表達(dá)。結(jié)果:1、各組小鼠ABR閾值隨著月齡增加而增高,各組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2、各月齡組小鼠耳蝸毛細(xì)胞、螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞胞漿均有p75的陽性表達(dá),且隨月齡增加表達(dá)也升高,各組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3、各轉(zhuǎn)染組細(xì)胞的胞漿均有棕黃色顆粒(NGF)的表達(dá),脂質(zhì)體組、空質(zhì)粒組、陰性對(duì)照組表達(dá)甚微,而重組質(zhì)粒組表達(dá)很明顯(與其余三組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義);重組質(zhì)粒組p75的表達(dá)甚微,其余三組均可見棕黃色顆粒(p75)的表達(dá),且重組質(zhì)粒組的p75的表達(dá)與其余三組的比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:隨著快速老化小鼠聽功能增齡性減退,p75的表達(dá)水平也隨之增高,提示p75可能參與介導(dǎo)耳蝸功能受損的過程;轉(zhuǎn)染后BMSC中p75的低表達(dá),很可能是因?yàn)镹GF轉(zhuǎn)染至BMSC后,NGF能明顯的抑制細(xì)胞內(nèi)p75的表達(dá)水平,因此p75表達(dá)明顯降低,為老年性耳聾的基因治療提供了新的可能。
【關(guān)鍵詞】:快速老化小鼠 老年性耳聾 耳蝸 神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體p75 骨髓基質(zhì)干細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】:桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R764.436
【目錄】:
  • 中文摘要5-7
  • ABSTRACT7-9
  • 英漢縮略詞表9-10
  • 前言10-12
  • 1 材料與方法12-17
  • 1.1 實(shí)驗(yàn)儀器與材料12
  • 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑12-13
  • 1.3 實(shí)驗(yàn)方法13-17
  • 2 結(jié)果17-23
  • 2.1 小鼠 ABR 閾值增齡性變化17
  • 2.2 各月齡小鼠耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞、毛細(xì)胞p75的表達(dá)17-19
  • 2.3 BMSC的NGF、p75免疫組化染色情況19-23
  • 3 討論23-27
  • 3.1 NGF生物學(xué)特性23-24
  • 3.2 神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體p75生物學(xué)特性24
  • 3.3 快速老化小鼠耳蝸神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體p75增齡性變化24-25
  • 3.4 骨髓基質(zhì)干細(xì)胞與老年性耳聾25-26
  • 3.5 NGF轉(zhuǎn)染BMSC的培養(yǎng)26-27
  • 4 結(jié)論27-28
  • 參考文獻(xiàn)28-34
  • 附錄(綜述)34-46
  • 參考文獻(xiàn)42-46
  • 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄46-47
  • 致謝47-48

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本文編號(hào):283546

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