目的:手術(shù)時麻醉藥的使用可影響腫瘤進(jìn)展。右美托咪定(Dexmedetomidine,Dex)是臨床常用麻醉藥物之一,Dex對肺癌的作用尚不清楚。探究Dex對肺癌細(xì)胞增殖、凋亡、遷移、上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)、干性、耐藥的影響,并揭示相關(guān)的作用機(jī)制,將為肺癌患者麻醉藥的選擇提供指導(dǎo)。方法:Dex處理肺癌細(xì)胞(A549和H1299)后,(1)CCK8實驗和克隆形成實驗檢測細(xì)胞增殖,(2)流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞早期凋亡,western blot檢測凋亡相關(guān)蛋白Bax、抗凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2的表達(dá),(3)Transwell遷移實驗檢測細(xì)胞遷移,western blot及免疫熒光檢測細(xì)胞間質(zhì)化相關(guān)蛋白(N-cadherin、Vimentin)、上皮化相關(guān)蛋白(E-cadherin)的表達(dá),(4)qRT-PCR、western blot及免疫熒光檢測細(xì)胞干性相關(guān)因子(Sox2、Oct4、Nanog)mRNA及蛋白表達(dá);(5)構(gòu)建肺癌細(xì)胞順鉑(Cisplatin,Cis)損傷模型,CCK8實驗評估Dex對Cis細(xì)胞毒性的影響,免疫熒光...

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略詞中英文注釋表
第一章 緒論
    1.1 腫瘤
        1.1.1 腫瘤概述
        1.1.2 肺癌概述
    1.2 手術(shù)、圍手術(shù)期因素與腫瘤進(jìn)展
        1.2.1 手術(shù)與腫瘤
        1.2.2 圍術(shù)期因素與腫瘤
        1.2.3 麻醉與腫瘤
    1.3 右美托咪定
        1.3.1 右美托咪定與腫瘤
        1.3.2 右美托咪定與肺癌
    1.4 Wnt/β-catenin信號通路
        1.4.1 Wnt/β-catenin信號通路簡介
        1.4.2 Wnt/β-catenin信號通路與肺癌
    1.5 科學(xué)問題的提出
第二章 研究目的、方法、實驗設(shè)計和意義
    2.1 研究目的
    2.2 研究內(nèi)容
    2.3 研究方法
    2.4 研究方案
    2.5 研究意義
第三章 右美托咪定對肺癌的作用及機(jī)制研究
    3.1 試劑與儀器
        3.1.1 主要試劑
        3.1.2 主要溶液配制
        3.1.3 主要儀器與材料
    3.2 實驗方法
        3.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.2.2 CCK8 實驗
        3.2.3細(xì)胞克隆實驗
        3.2.4 流式細(xì)胞術(shù)
        3.2.5 細(xì)胞蛋白質(zhì)提取
        3.2.6 蛋白濃度測定
        3.2.7 Western blot
        3.2.8 Transwell實驗
        3.2.9 免疫熒光
        3.2.10 細(xì)胞總RNA的提取
        3.2.11 RNA逆轉(zhuǎn)錄
        3.2.12 實時熒光定量PCR
        3.2.13 統(tǒng)計學(xué)分析
    3.3 實驗結(jié)果
        3.3.1 Dex可抑制肺癌細(xì)胞增殖
        3.3.2 Dex可促進(jìn)肺癌細(xì)胞凋亡
        3.3.3 Dex可抑制肺癌細(xì)胞遷移及上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化
        3.3.4 Dex可抑制肺癌細(xì)胞干性相關(guān)蛋白表達(dá)
        3.3.5 Dex可增加順鉑對肺癌細(xì)胞的毒性作用
        3.3.6 Dex可抑制肺癌細(xì)胞Wnt/β-catenin信號通路
    3.4 討論
第四章 結(jié)論與展望
    4.1 結(jié)論
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文



本文編號：3979530