目的:創(chuàng)傷性脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)難治性外傷疾病,具有較高的致殘率和病死率,因無法解決受損脊髓組織神經(jīng)電信號(hào)通路連接等問題,目前沒有很好的治療方案。目前干細(xì)胞療法在脊髓損傷修復(fù)中取得了一定療效,其促進(jìn)組織損傷修復(fù)和再生在很大程度上依賴其旁分泌實(shí)現(xiàn),而外泌體(exosomes)是干細(xì)胞旁分泌的主要活性成分,故本課題旨在研究人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體(exosomes derived from human umbilical cord mesenchymal stem cell,hucMSC-Ex)在大鼠脊髓撞擊損傷修復(fù)中的作用,并探討其相關(guān)機(jī)制。方法:構(gòu)建原位注射hucMSC-Ex修復(fù)SD大鼠脊髓撞擊損傷模型,進(jìn)行術(shù)后為期6 w的BBB score,結(jié)合對(duì)損傷部位脊髓組織大體觀的觀察、脊髓組織HE染色和TUNEL染色情況判斷hucMSC-Ex對(duì)SCI的修復(fù)作用。體內(nèi)采用western-blot、免疫組化、免疫熒光染色和qRT-PCR技術(shù)檢測hucMSC-Ex對(duì)脊髓組織中小膠質(zhì)細(xì)胞極化態(tài)的影響。體外培養(yǎng)小膠質(zhì)細(xì)胞,使用LPS(Lipopol...

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖2.1技術(shù)路線1：原位注射hucMSC-Ex修復(fù)大鼠脊髓撞擊損傷模型的構(gòu)建

hucMSC-Ex促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞向M2表型極化緩解脊髓損傷的實(shí)驗(yàn)研究8第二章研究目的、實(shí)驗(yàn)方案及意義2.1研究目的（1）建立原位注射hucMSC-Ex修復(fù)脊髓撞擊損傷的模型，明確hucMSC-Ex極化小膠質(zhì)細(xì)胞促進(jìn)脊髓損傷修復(fù)的作用。（2）探討hucMSC-Ex促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞向M....

圖2.2技術(shù)路線2：hucMSC-Ex在小膠質(zhì)細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化中的作用（）體內(nèi)實(shí)驗(yàn)

江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文9位左右兩側(cè)各三個(gè)深位及背側(cè)損傷表面共計(jì)7個(gè)位點(diǎn)注射hucMSC-Ex，PBS組即將hucMSC-Ex換成相同體積的PBS。利用小動(dòng)物活體成像技術(shù)觀察Dil-hucMSC-Ex在體內(nèi)的分布，通過對(duì)實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物進(jìn)行為期6w的后肢運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分、不同時(shí)間點(diǎn)組織大體觀、....

圖2.3技術(shù)路線3：hucMSC-Ex促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞極化對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)其它細(xì)胞的影響

hucMSC-Ex促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞向M2表型極化緩解脊髓損傷的實(shí)驗(yàn)研究10胞。通過形態(tài)觀察、蛋白標(biāo)志物檢測和免疫熒光染色對(duì)其進(jìn)行鑒定。②LPS極化原代小膠質(zhì)細(xì)胞模型：用1μG/mLLPS和200μG/mLhucMSC-Ex處理原代小膠質(zhì)細(xì)胞，分3組：①PBS組；②LPS組；③LPS....

圖2.4技術(shù)路線4：hucMSC-Ex促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞向M2極化的機(jī)制研究（1）根據(jù)HFL-Ex和hucMSC-ExmiRNA表達(dá)差異譜測序結(jié)果挑選hucMSC-Ex中高表達(dá)的miRNA，并采用qRT-PCR技術(shù)檢測HFL-Ex和hucMSC-Ex中miRNA中的

江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文11（3）對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC的影響：小膠質(zhì)細(xì)胞上清液處理內(nèi)皮細(xì)胞檢測其凋亡相關(guān)指標(biāo)，觀察小管形成和內(nèi)皮細(xì)胞遷移情況。見技術(shù)路線3。2.2.4hucMSC-Ex促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞向M2極化的機(jī)制研究圖2.4技術(shù)路線4：hucMSC-Ex促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞向M2極化的機(jī)....

本文編號(hào)：3908852