目的:創(chuàng)傷性脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)難治性外傷疾病,具有較高的致殘率和病死率,因無法解決受損脊髓組織神經(jīng)電信號通路連接等問題,目前沒有很好的治療方案。目前干細胞療法在脊髓損傷修復(fù)中取得了一定療效,其促進組織損傷修復(fù)和再生在很大程度上依賴其旁分泌實現(xiàn),而外泌體(exosomes)是干細胞旁分泌的主要活性成分,故本課題旨在研究人臍帶間充質(zhì)干細胞來源外泌體(exosomes derived from human umbilical cord mesenchymal stem cell,hucMSC-Ex)在大鼠脊髓撞擊損傷修復(fù)中的作用,并探討其相關(guān)機制。方法:構(gòu)建原位注射hucMSC-Ex修復(fù)SD大鼠脊髓撞擊損傷模型,進行術(shù)后為期6 w的BBB score,結(jié)合對損傷部位脊髓組織大體觀的觀察、脊髓組織HE染色和TUNEL染色情況判斷hucMSC-Ex對SCI的修復(fù)作用。體內(nèi)采用western-blot、免疫組化、免疫熒光染色和qRT-PCR技術(shù)檢測hucMSC-Ex對脊髓組織中小膠質(zhì)細胞極化態(tài)的影響。體外培養(yǎng)小膠質(zhì)細胞,使用LPS(Lipopol...

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2.1技術(shù)路線1：原位注射hucMSC-Ex修復(fù)大鼠脊髓撞擊損傷模型的構(gòu)建

hucMSC-Ex促進小膠質(zhì)細胞向M2表型極化緩解脊髓損傷的實驗研究8第二章研究目的、實驗方案及意義2.1研究目的（1）建立原位注射hucMSC-Ex修復(fù)脊髓撞擊損傷的模型，明確hucMSC-Ex極化小膠質(zhì)細胞促進脊髓損傷修復(fù)的作用。（2）探討hucMSC-Ex促進小膠質(zhì)細胞向M....

圖2.2技術(shù)路線2：hucMSC-Ex在小膠質(zhì)細胞表型轉(zhuǎn)化中的作用（）體內(nèi)實驗

江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文9位左右兩側(cè)各三個深位及背側(cè)損傷表面共計7個位點注射hucMSC-Ex，PBS組即將hucMSC-Ex換成相同體積的PBS。利用小動物活體成像技術(shù)觀察Dil-hucMSC-Ex在體內(nèi)的分布，通過對實驗組動物進行為期6w的后肢運動功能評分、不同時間點組織大體觀、....

圖2.3技術(shù)路線3：hucMSC-Ex促進小膠質(zhì)細胞極化對神經(jīng)系統(tǒng)其它細胞的影響

hucMSC-Ex促進小膠質(zhì)細胞向M2表型極化緩解脊髓損傷的實驗研究10胞。通過形態(tài)觀察、蛋白標(biāo)志物檢測和免疫熒光染色對其進行鑒定。②LPS極化原代小膠質(zhì)細胞模型：用1μG/mLLPS和200μG/mLhucMSC-Ex處理原代小膠質(zhì)細胞，分3組：①PBS組；②LPS組；③LPS....

圖2.4技術(shù)路線4：hucMSC-Ex促進小膠質(zhì)細胞向M2極化的機制研究（1）根據(jù)HFL-Ex和hucMSC-ExmiRNA表達差異譜測序結(jié)果挑選hucMSC-Ex中高表達的miRNA，并采用qRT-PCR技術(shù)檢測HFL-Ex和hucMSC-Ex中miRNA中的

江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文11（3）對內(nèi)皮細胞HUVEC的影響：小膠質(zhì)細胞上清液處理內(nèi)皮細胞檢測其凋亡相關(guān)指標(biāo)，觀察小管形成和內(nèi)皮細胞遷移情況。見技術(shù)路線3。2.2.4hucMSC-Ex促進小膠質(zhì)細胞向M2極化的機制研究圖2.4技術(shù)路線4：hucMSC-Ex促進小膠質(zhì)細胞向M2極化的機....

本文編號：3908852