本文關(guān)鍵詞：通腑瀉熱法輔助治療外科膿毒癥急性肺損傷的臨床研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《中南大學(xué)》 2010年

mGluR Ⅰ的激活在中性粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞相互黏附中的調(diào)節(jié)作用

劉雪云  

【摘要】： 谷氨酸(glutamate, Glu)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中一類重要的興奮性神經(jīng)遞質(zhì),通過激活谷氨酸受體(glutamate receptors, GluRs)發(fā)揮作用。Glu過度激活其受體所引起的興奮性神經(jīng)毒性在神經(jīng)損傷的發(fā)生中具有重要作用。近年來一些研究者注意到在中樞神經(jīng)系統(tǒng)外的外周非神經(jīng)組織也廣泛存在GluRs的表達(dá),但它們的生理及病理意義遠(yuǎn)未闡明。本研究室的前期研究發(fā)現(xiàn),親離子型谷氨酸受體中的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體的激活可以通過促進(jìn)中性粒細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的黏附而加重急性肺損傷。但代謝型谷氨酸受體在此過程中有何影響未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過觀察Ⅰ組代謝型谷氨酸受體(group I metabotropic glutamate receptor, mGluRⅠ)在中性粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞上的表達(dá),以及該受體的激活對中性粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附的影響,并對其可能機(jī)制進(jìn)行研究,為深入研究肺臟等外周組織中谷氨酸受體的生理及病理意義,拓展肺部疾病機(jī)制及防治的研究提供新的思路。 方法：取健康人新鮮靜脈血Ficoll-Hypaque密度梯度離心法分離中性粒細(xì)胞,培養(yǎng)人正常臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human normal umbilical vein endothelial cells, HUVE-12),免疫細(xì)胞化學(xué)法和Realtime-PCR法檢測中性粒細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞mGluRⅠ(包括mGluR1和mGluR5)的表達(dá),分別應(yīng)用不同濃度,不同時(shí)間的mGluRⅠ的特異性激動(dòng)劑S-3,5-二羥基苯甘氨酸(S-3,5-dihydroxy-phenylglycine, S-DHPG)處理中性粒細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞,通過比色法檢測中性粒細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的黏附率,采用流式細(xì)胞技術(shù)測定中性粒細(xì)胞黏附分子CDlla和內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子ICAM-1表達(dá)的變化。 結(jié)果： 1.中性粒細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞中有mGluRⅠ的：mGluR1和mGluR5的mRNA和蛋白表達(dá)。 2.S-DHPG在10-8～10-6 mol/L濃度范圍內(nèi)作用于中性粒細(xì)胞呈劑量依賴性提高中性粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞之間的黏附率(P0.05或P0.01)；10-6mol/L的S-DHPG單獨(dú)作用于中性粒細(xì)胞0.5h,即可促進(jìn)中性粒細(xì)胞黏附于內(nèi)皮細(xì)胞(P0.01)；隨著作用時(shí)間的延長,中性粒細(xì)胞黏附于內(nèi)皮細(xì)胞的比率并不隨之增加；10-6 mol/L的S-DHPG單獨(dú)作用于中性粒細(xì)胞可促CDlla表達(dá)(P0.01)；mGluRⅠ拮抗劑(RS)-a-甲基-4-羧基苯甘氨酸[(RS)-alpha-methyl-4-carboxyphenylglycine,(±)-MCPG]0.5 mmol/L可以顯著阻斷激動(dòng)劑S-DHPG(10-6 mol/L,1 h)的促黏附及促CDlla表達(dá)效應(yīng)(P0.01)。 3.S-DHPG在10-8～10-6 mol/L濃度范圍內(nèi)作用于內(nèi)皮細(xì)胞呈劑量依賴性提高中性粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞之間的黏附率(P0.05或P0.01)；10"6 mol/L的S-DHPG單獨(dú)作用于內(nèi)皮細(xì)胞0.5h,即可促進(jìn)中性粒細(xì)胞黏附于內(nèi)皮細(xì)胞(P0.01)；隨著作用時(shí)間的延長,中性粒細(xì)胞黏附于內(nèi)皮細(xì)胞的比率并不隨之增加；10-6 mol/L的S-DHPG單獨(dú)作用于內(nèi)皮細(xì)胞可促ICAM-1表達(dá)(P0.01)；mGluRⅠ拮抗劑(±)-MCPG(0.5 mmol/L)可以顯著阻斷激動(dòng)劑S-DHPG(10-6 mol/L,1h)的促黏附效應(yīng)及促ICAM-1表達(dá)效應(yīng)(P0.01)。 結(jié)論： 1.中性粒細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞均可表達(dá)mGluR1/5受體。 2.中性粒細(xì)胞膜上mGluRⅠ的激活可促進(jìn)中性粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的相互黏附,其機(jī)制可能與上調(diào)中性粒細(xì)胞表面黏附分子CDlla的表達(dá)有關(guān)。 3.內(nèi)皮細(xì)胞膜上mGluRⅠ的激活可促進(jìn)中性粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的相互黏附,其機(jī)制可能與上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞表面黏附分子ICAM-1的表達(dá)有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R363
【目錄】：

摘要4-6

ABSTRACT6-10

縮略語表10-11

第一章 前言11-13

第二章 材料與方法13-20

2.1 材料13

2.2 方法13-20

第三章 結(jié)果20-23

3.1 中性粒細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞上mGluR1及mGluR5受體的表達(dá)20

3.2 S-DHPG對中性粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞相互黏附的影響20-21

3.3 mGluRⅠ受體拮抗劑(±)-MCPG對中性粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附的影響21-22

3.4 mGluRⅠ激活對中性粒細(xì)胞表面黏附分子CD11a(LFA-1)表達(dá)的影響22

3.5 mGluRⅠ激活對內(nèi)皮細(xì)胞表面黏附分子ICAM-1(CD54)表達(dá)的影響22-23

第四章 附圖23-33

第五章 討論33-38

5.1 mGluRⅠ在中性粒細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞上的表達(dá)33-34

5.2 mGluRⅠ對中性粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附的影響34-35

5.3 mGluRⅠ激活促進(jìn)中性粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附的可能機(jī)制35-36

5.4 mGluRⅠ激活在中性粒細(xì)胞內(nèi)皮細(xì)胞黏附中的作用研究的意義36-38

第六章 結(jié)論38-39

參考文獻(xiàn)39-44

綜述44-55

致謝55-56

攻讀學(xué)位期間主要的研究成果56

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9 單志新;林秋雄;楊敏;鄧春玉;朱杰寧;麥麗萍;符永恒;林曙光;余細(xì)勇;;血管緊張素Ⅱ通過AP-1調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞中巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子的表達(dá)[A];第十三次全國心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

10 劉啟兵;劉璐璐;黃繼云;顏森泉;韓峰;樓宜嘉;;S-亞硝酰谷胱甘肽經(jīng)由活性氧-線粒體通路致人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡[A];中國毒理學(xué)會(huì)第五次全國學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2009年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 吳一福;[N];中國醫(yī)藥報(bào);2008年

2 ;[N];科技日報(bào);2000年

3 趙軍;[N];科技日報(bào);2007年

4 吳一福;[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

5 楊茜;[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

6 衣曉峰 李媛媛;[N];健康報(bào);2006年

7 紀(jì)英超;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年

8 楊春;[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2001年

9 衣曉峰 李媛媛;[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

10 衣曉峰 靳萬慶 本報(bào)記者　 □ 李媛媛 本報(bào)通訊員　;[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李寒;開放MitK_（ATP）通道對缺血再灌注心肌保護(hù)作用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2005年

2 賈素潔;內(nèi)源性一氧化氮合酶抑制物與內(nèi)皮細(xì)胞通訊功能障礙及（口山）酮的保護(hù)作用[D];中南大學(xué);2007年

3 張毅民;內(nèi)皮源性降鈣素基因相關(guān)肽合成與釋放調(diào)節(jié)機(jī)制及其病理生理意義[D];中南大學(xué);2010年

4 杜歡;基于絡(luò)脈理論的腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞調(diào)控腦微環(huán)境的分子機(jī)制研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2011年

5 邢邯英;血紅素加氧酶-1對糖尿病血管病變的影響及機(jī)制初探[D];河北醫(yī)科大學(xué);2005年

6 房凱;高表達(dá)Caveolin-1抑制內(nèi)皮細(xì)胞增殖的信號傳遞機(jī)制研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2005年

7 付嘉;重組人β2糖蛋白1及其第一結(jié)構(gòu)域?qū)沽字贵w綜合癥患者血清誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞活化的影響及作為耐受原的初步探討[D];吉林大學(xué);2006年

8 楊敏;黃芪衛(wèi)矛合劑對糖尿病腎病大鼠腎臟內(nèi)皮細(xì)胞損傷的干預(yù)研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2007年

9 伍尚敏;YH-16、平陽霉素、地塞米松對血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2008年

10 朱海燕;黃芪多糖對人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞再灌注損傷粘附分子表達(dá)及調(diào)控的研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2008年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王大鵬;VEGF及其受體FLK-1在人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞UPR過程中的表達(dá)[D];中國醫(yī)科大學(xué);2003年

2 邰海服;單純肥胖大鼠血管內(nèi)皮損傷與血脂關(guān)系及丹皮酚的保護(hù)作用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2009年

3 楊小芳;促紅細(xì)胞生成素預(yù)防培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的研究[D];蘭州大學(xué);2009年

4 朱紅梅;腫瘤上清液誘導(dǎo)的正常內(nèi)皮細(xì)胞與成纖維細(xì)胞的特性研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2002年

5 李健;鎂對培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞缺氧再復(fù)氧損傷的保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];青島大學(xué);2003年

6 胡學(xué)峰;生物陶瓷人工骨血管化的探索[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

7 聶志華;胰島素、血管緊張素Ⅱ?qū)θ搜軆?nèi)皮細(xì)胞NF－κB的激活和血脂康干預(yù)的影響[D];江西醫(yī)學(xué)院;2005年

8 劉漪淪;K562細(xì)胞條件培養(yǎng)基對內(nèi)皮細(xì)胞氧化還原態(tài)的影響及其在腫瘤血管生成中的意義[D];四川大學(xué);2005年

9 王雪青;三氧化二砷對內(nèi)皮細(xì)胞增殖和分泌一氧化氮的影響[D];四川大學(xué);2004年

10 高卉;Ghrelin對缺氧/復(fù)氧血管內(nèi)皮細(xì)胞的影響[D];四川大學(xué);2004年

  本文關(guān)鍵詞：通腑瀉熱法輔助治療外科膿毒癥急性肺損傷的臨床研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：131630