發(fā)布時間：2017-06-14 22:10

  本文關鍵詞：HIF-1α及VEGF在大鼠腦室出血模型中的表達及意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：原發(fā)性腦室出血是指出血位于腦室脈絡叢或室管膜下區(qū)1.5cm以內，局限于腦室系統(tǒng)的出血。它是一種臨床較為少見但極其嚴重的急癥，具有高致殘率與高死亡率的特點。本實驗通過側腦室注血法建立大鼠腦室出血模型，應用Western bloting技術檢測腦室出血后不同時間點室管膜下區(qū)HIF-1α及VEGF蛋白的表達變化，并探討HIF-1α和VEGF在腦室出血后腦組織損傷過程中可能發(fā)揮的作用機制。 方法：1.健康成年SD雄性大鼠60只，，體重300g±10g。采用隨機數字法分為手術組(n=50)與假手術組(n=10)，每組10只。2.參照K.R.Lodhia的報道的方法建立大鼠側腦室出血模型，并進行一定程度改進。側腦室注血組是將160ul非抗凝自體鼠尾動脈血分2次注入到右側腦室，建立腦室出血模型，按提取標本的時間不同分為術后1、2、5、7、14天五個時間點。假手術組動物僅切開頭皮，于定位點鉆孔穿刺并注射160μl雙蒸水。各組大鼠于同一環(huán)境單獨喂養(yǎng)。3.手術組動物按照規(guī)定時間點行神經行為學評分后處死，假手術組于術后2小時處死。動物于生物冰塊上斷頭取腦，沿穿刺點冠狀切開腦組織，觀察側腦室寬度及形態(tài)變化后，取室管膜下區(qū)腦組織置于液氮驟冷2小時后，于-80度冰箱保存。采用western bloting技術檢測腦室出血后HIF-1α和VEGF的時序性表達規(guī)律與出血時間的相關關系。4.統(tǒng)計學分析：使用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對實驗數據進行統(tǒng)計學分析。組間計量資料比較采用t檢驗，以P0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。 結果：1.一般情況觀察：腦室注血組大鼠麻醉清醒后均出現(xiàn)不同程度精神萎靡，活動少，飲水及攝食量明顯減少，體重隨時間逐漸下降。不同時間點大鼠神經功能缺損評分：術后1、2、5、7、14天分別為10.8±1.1,13.6±0.9,15.7±1.2，16.4±1.2，17.9±1.1.假手術組大鼠神經行為學評分無異常（19分），經統(tǒng)計學檢驗，腦室注血組1、2天與假手術組比較有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。2.免疫印記Western Bloting結果：（1）HIF-1α蛋白：在腦室注血組第1天即可見明顯條帶出現(xiàn)，第2天時條帶增寬，達到高峰，第5天后開始減少，到第14天條帶幾乎不可見，與假手術組相當。除第14天組外，其余各實驗組與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。各實驗組間比較，除第1天與第5天之間無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）外，其余各組之間差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；（2）VEGF蛋白：在實驗組第1天可見條帶出現(xiàn)，第2天明顯有增寬，達到高峰，到第五天后開始減少，第14天條帶已基本不可見。除第14天外,其余各實驗組與假手術組比較，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），各實驗組間比較，除第1天與第5天之間無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）外，其余各組之間差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。 結論：1.本實驗采用大鼠自體動脈血注入側腦室的方法建立大鼠腦室出血的模型，動物死亡率低，模型較穩(wěn)定，使用非抗凝的動脈血更符合腦室出血的發(fā)病過程，能夠較好的模擬臨床上腦室出血后的各種病理生理變化。2.腦室出血后HIF-1α在室管膜下區(qū)的表達具有時間相關性，第1天即有明顯表達，第2天達到高峰，第5天有所下降，到第14天與對照假手術組已無明顯差別。3.VEGF的表達也具有時序性，在腦室注血后第1天已有表達，第2天明顯增加，到第5天開始下降，第14天與對照假手術組已無明顯差別。4.腦室出血后腦室內血腫對腦室壁的機械壓迫作用及腦脊液循環(huán)吸收障礙導致腦室擴張，顱內壓升高，腦血流灌注不足，引起腦組織缺血缺氧。HIF-1α與VEGF在腦室出血后室管膜下區(qū)的表達明顯且具有時間相關性，而二者的表達亦具有相關性，在腦室出血后腦缺血缺氧的一系列病理生理變化中起了重要作用。
【關鍵詞】：自發(fā)性腦室出血 HIF-1α VEGF 室管膜下區(qū) 蛋白免疫印記
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R-332;R743.34
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 前言9-10
• 材料與方法10-18
• 結果18-20
• 附圖20-24
• 附表24-25
• 討論25-29
• 結論29-30
• 參考文獻30-34
• 綜述 原發(fā)性腦室出血研究進展34-43
• 參考文獻39-43
• 致謝43-44
• 個人簡歷44

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前7條

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本文編號：450673