本文關(guān)鍵詞：HIF-1α及VEGF在大鼠腦室出血模型中的表達(dá)及意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：原發(fā)性腦室出血是指出血位于腦室脈絡(luò)叢或室管膜下區(qū)1.5cm以內(nèi)，局限于腦室系統(tǒng)的出血。它是一種臨床較為少見但極其嚴(yán)重的急癥，具有高致殘率與高死亡率的特點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)通過側(cè)腦室注血法建立大鼠腦室出血模型，應(yīng)用Western bloting技術(shù)檢測腦室出血后不同時(shí)間點(diǎn)室管膜下區(qū)HIF-1α及VEGF蛋白的表達(dá)變化，并探討HIF-1α和VEGF在腦室出血后腦組織損傷過程中可能發(fā)揮的作用機(jī)制。 方法：1.健康成年SD雄性大鼠60只，，體重300g±10g。采用隨機(jī)數(shù)字法分為手術(shù)組(n=50)與假手術(shù)組(n=10)，每組10只。2.參照K.R.Lodhia的報(bào)道的方法建立大鼠側(cè)腦室出血模型，并進(jìn)行一定程度改進(jìn)。側(cè)腦室注血組是將160ul非抗凝自體鼠尾動(dòng)脈血分2次注入到右側(cè)腦室，建立腦室出血模型，按提取標(biāo)本的時(shí)間不同分為術(shù)后1、2、5、7、14天五個(gè)時(shí)間點(diǎn)。假手術(shù)組動(dòng)物僅切開頭皮，于定位點(diǎn)鉆孔穿刺并注射160μl雙蒸水。各組大鼠于同一環(huán)境單獨(dú)喂養(yǎng)。3.手術(shù)組動(dòng)物按照規(guī)定時(shí)間點(diǎn)行神經(jīng)行為學(xué)評分后處死，假手術(shù)組于術(shù)后2小時(shí)處死。動(dòng)物于生物冰塊上斷頭取腦，沿穿刺點(diǎn)冠狀切開腦組織，觀察側(cè)腦室寬度及形態(tài)變化后，取室管膜下區(qū)腦組織置于液氮驟冷2小時(shí)后，于-80度冰箱保存。采用western bloting技術(shù)檢測腦室出血后HIF-1α和VEGF的時(shí)序性表達(dá)規(guī)律與出血時(shí)間的相關(guān)關(guān)系。4.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：使用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。組間計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn)，以P0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果：1.一般情況觀察：腦室注血組大鼠麻醉清醒后均出現(xiàn)不同程度精神萎靡，活動(dòng)少，飲水及攝食量明顯減少，體重隨時(shí)間逐漸下降。不同時(shí)間點(diǎn)大鼠神經(jīng)功能缺損評分：術(shù)后1、2、5、7、14天分別為10.8±1.1,13.6±0.9,15.7±1.2，16.4±1.2，17.9±1.1.假手術(shù)組大鼠神經(jīng)行為學(xué)評分無異常（19分），經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，腦室注血組1、2天與假手術(shù)組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。2.免疫印記Western Bloting結(jié)果：（1）HIF-1α蛋白：在腦室注血組第1天即可見明顯條帶出現(xiàn)，第2天時(shí)條帶增寬，達(dá)到高峰，第5天后開始減少，到第14天條帶幾乎不可見，與假手術(shù)組相當(dāng)。除第14天組外，其余各實(shí)驗(yàn)組與對照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。各實(shí)驗(yàn)組間比較，除第1天與第5天之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）外，其余各組之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；（2）VEGF蛋白：在實(shí)驗(yàn)組第1天可見條帶出現(xiàn)，第2天明顯有增寬，達(dá)到高峰，到第五天后開始減少，第14天條帶已基本不可見。除第14天外,其余各實(shí)驗(yàn)組與假手術(shù)組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），各實(shí)驗(yàn)組間比較，除第1天與第5天之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）外，其余各組之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 結(jié)論：1.本實(shí)驗(yàn)采用大鼠自體動(dòng)脈血注入側(cè)腦室的方法建立大鼠腦室出血的模型，動(dòng)物死亡率低，模型較穩(wěn)定，使用非抗凝的動(dòng)脈血更符合腦室出血的發(fā)病過程，能夠較好的模擬臨床上腦室出血后的各種病理生理變化。2.腦室出血后HIF-1α在室管膜下區(qū)的表達(dá)具有時(shí)間相關(guān)性，第1天即有明顯表達(dá)，第2天達(dá)到高峰，第5天有所下降，到第14天與對照假手術(shù)組已無明顯差別。3.VEGF的表達(dá)也具有時(shí)序性，在腦室注血后第1天已有表達(dá)，第2天明顯增加，到第5天開始下降，第14天與對照假手術(shù)組已無明顯差別。4.腦室出血后腦室內(nèi)血腫對腦室壁的機(jī)械壓迫作用及腦脊液循環(huán)吸收障礙導(dǎo)致腦室擴(kuò)張，顱內(nèi)壓升高，腦血流灌注不足，引起腦組織缺血缺氧。HIF-1α與VEGF在腦室出血后室管膜下區(qū)的表達(dá)明顯且具有時(shí)間相關(guān)性，而二者的表達(dá)亦具有相關(guān)性，在腦室出血后腦缺血缺氧的一系列病理生理變化中起了重要作用。
【關(guān)鍵詞】：自發(fā)性腦室出血 HIF-1α VEGF 室管膜下區(qū) 蛋白免疫印記
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R-332;R743.34
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 前言9-10
• 材料與方法10-18
• 結(jié)果18-20
• 附圖20-24
• 附表24-25
• 討論25-29
• 結(jié)論29-30
• 參考文獻(xiàn)30-34
• 綜述 原發(fā)性腦室出血研究進(jìn)展34-43
• 參考文獻(xiàn)39-43
• 致謝43-44
• 個(gè)人簡歷44

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

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  本文關(guān)鍵詞：HIF-1α及VEGF在大鼠腦室出血模型中的表達(dá)及意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：450673