本文關(guān)鍵詞：人成纖維細(xì)胞膠原吞噬與非膠原吞噬亞群分離及差異基因的篩選，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討建立新的分離人成纖維細(xì)胞膠原吞噬亞群(CPSF)和成纖維細(xì)胞非膠原吞噬亞群(n CPSF)的方法,并篩選兩者差異表達(dá)基因。方法:根據(jù)CPSF和n CPSF吞噬功能的差異,聯(lián)合應(yīng)用膠原包被的異硫氰酸熒光乳膠微球(COL-FITC-LB)吞噬技術(shù)和流式細(xì)胞分離技術(shù)分離二者,并通過生物芯片技術(shù)和real-time PCR篩選、驗(yàn)證兩者差異表達(dá)基因,尋找CPSF和n CPSF具有特征性的分子標(biāo)志物。結(jié)果:成功分離CPSF和n CPSF,并對其基因差異性分析,得到17個差異表達(dá)基因。與n CPSF比較,CPSF中有12個基因表達(dá)上調(diào),5個表達(dá)下調(diào)。對其中與膠原吞噬功能可能相關(guān)的3個基因進(jìn)行驗(yàn)證,即纖溶酶原激活物受體相關(guān)蛋白(urokinase plasminogen activator receptor-associated protein,u PARAP)、細(xì)胞色素b-245,β多肽(cytochrome b-245,beta polypeptide,CYBB)和同源物1(Hook homolog 1,HOOK1),CPSF中u PARAP表達(dá)量為n CPSF的2 788倍;CPSF中CYBB表達(dá)量為n CPSF的0.85倍;CPSF中HOOK1表達(dá)量為n CPSF的1.96倍,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:建立了分離CPSF和n CPSF的新方法。CPSF和n CPSF最主要的差異表達(dá)基因是u PARA P,對成纖維細(xì)胞膠原吞噬功能具有重要影響,是治療膠原代謝疾病新的候選靶分子之一。
【作者單位】： 中南大學(xué)湘雅醫(yī)院口腔醫(yī)學(xué)中心;首都醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院牙體牙髓科;
【關(guān)鍵詞】： 成纖維細(xì)胞 異硫氰酸熒光乳膠微球 基因芯片技術(shù) 尿激酶型纖溶酶原激活劑受體相關(guān)蛋白
【基金】：湖南省自然科學(xué)基金(2015JJ4074)~~
【分類號】：R363
【正文快照】： Methods:The CPSF and n CPSF was isolated by using collagen-fluorescein-isothiocynate-latex第一作者(First author):李江,Email:978707328@qq.combead(COL-FITC-LB)phagocytosis technique and FCM sorting method.Microarray analysis wasused to screen the different

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本文編號：447667