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WNT6在BMSCs增殖、遷移和成骨分化中的作用

發(fā)布時間:2017-06-10 23:00

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【摘要】:目的探討WNT6對BMSCs增殖、成骨分化和遷移能力的影響。方法取小鼠BMSCs培養(yǎng)至30%~50%融合時,分別行WNT6沉默及過表達觀察。WNT6沉默實驗分為3組,分別為轉(zhuǎn)染W(wǎng)NT6特異性sh RNA組(A1組)、轉(zhuǎn)染對照sh RNA組(B1組)、未轉(zhuǎn)染的正常細胞組(C1組)。過表達觀察實驗分為3組,分別為轉(zhuǎn)染W(wǎng)NT6重組表達質(zhì)粒組(A2組)、轉(zhuǎn)染空載體組(B2組)、未轉(zhuǎn)染的正常細胞組(C2組)。倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),A1、B1、A2、B2組篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞;于轉(zhuǎn)染后48 h取細胞,采用實時熒光定量PCR檢測WNT6m RNA表達,Western blot檢測WNT6及Ki73蛋白表達,Transwell法檢測細胞遷移,MTT法檢測細胞增殖;C1、C2組培養(yǎng)后相同時間點取細胞進行以上觀測。各組細胞經(jīng)成骨誘導培養(yǎng)12 d,檢測ALP活性及鈣沉積量。結(jié)果倒置顯微鏡下,A1、B1、C1組及A2、B2、C2組細胞形態(tài)基本一致。A1組WNT6 m RNA及蛋白、Ki67蛋白表達、細胞增殖及細胞遷移數(shù)目、ALP活性以及鈣沉積量均顯著低于B1、C1組,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05),B1、C1組間比較差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05);而A2組以上各指標均顯著高于B2、C2組,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05),B2、C2組間比較差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論 WNT6能促進小鼠BMSCs增殖和遷移,并增強其成骨分化能力。
【作者單位】: 河南省中醫(yī)院創(chuàng)傷骨科;河南中醫(yī)學院基礎(chǔ)醫(yī)學院;
【關(guān)鍵詞】WNT BMSCs 細胞增殖 細胞遷移 成骨分化
【分類號】:R329.2
【正文快照】: BMSCs是具有自我更新、復制及多向分化潛能的成體干細胞[1],可向成骨細胞、成纖維細胞、脂肪細胞和網(wǎng)狀細胞等方向分化。BMSCs增殖、分化和遷移是骨折愈合的基礎(chǔ),但其調(diào)控機制仍不清楚。WNTs是一種分泌糖蛋白家族,目前至少發(fā)現(xiàn)19種,在所有動物中幾乎都有表達[2]。WNT信號能夠

【共引文獻】

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

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中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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【相似文獻】

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6 楊柳;β-TCP三維灌注生物反應(yīng)器用于骨髓間充質(zhì)干細胞擴增及成骨分化研究[D];上海交通大學;2008年

7 尚國偉;小鼠骨髓間質(zhì)干細胞成骨分化及促腎上腺皮質(zhì)激素的影響[D];鄭州大學;2014年

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本文編號:440154

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