WNT6在BMSCs增殖、遷移和成骨分化中的作用
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【摘要】:目的探討WNT6對(duì)BMSCs增殖、成骨分化和遷移能力的影響。方法取小鼠BMSCs培養(yǎng)至30%~50%融合時(shí),分別行WNT6沉默及過表達(dá)觀察。WNT6沉默實(shí)驗(yàn)分為3組,分別為轉(zhuǎn)染W(wǎng)NT6特異性sh RNA組(A1組)、轉(zhuǎn)染對(duì)照sh RNA組(B1組)、未轉(zhuǎn)染的正常細(xì)胞組(C1組)。過表達(dá)觀察實(shí)驗(yàn)分為3組,分別為轉(zhuǎn)染W(wǎng)NT6重組表達(dá)質(zhì)粒組(A2組)、轉(zhuǎn)染空載體組(B2組)、未轉(zhuǎn)染的正常細(xì)胞組(C2組)。倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),A1、B1、A2、B2組篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞;于轉(zhuǎn)染后48 h取細(xì)胞,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)WNT6m RNA表達(dá),Western blot檢測(cè)WNT6及Ki73蛋白表達(dá),Transwell法檢測(cè)細(xì)胞遷移,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖;C1、C2組培養(yǎng)后相同時(shí)間點(diǎn)取細(xì)胞進(jìn)行以上觀測(cè)。各組細(xì)胞經(jīng)成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)12 d,檢測(cè)ALP活性及鈣沉積量。結(jié)果倒置顯微鏡下,A1、B1、C1組及A2、B2、C2組細(xì)胞形態(tài)基本一致。A1組WNT6 m RNA及蛋白、Ki67蛋白表達(dá)、細(xì)胞增殖及細(xì)胞遷移數(shù)目、ALP活性以及鈣沉積量均顯著低于B1、C1組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),B1、C1組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而A2組以上各指標(biāo)均顯著高于B2、C2組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),B2、C2組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 WNT6能促進(jìn)小鼠BMSCs增殖和遷移,并增強(qiáng)其成骨分化能力。
【作者單位】: 河南省中醫(yī)院創(chuàng)傷骨科;河南中醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: WNT BMSCs 細(xì)胞增殖 細(xì)胞遷移 成骨分化
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: BMSCs是具有自我更新、復(fù)制及多向分化潛能的成體干細(xì)胞[1],可向成骨細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和網(wǎng)狀細(xì)胞等方向分化。BMSCs增殖、分化和遷移是骨折愈合的基礎(chǔ),但其調(diào)控機(jī)制仍不清楚。WNTs是一種分泌糖蛋白家族,目前至少發(fā)現(xiàn)19種,在所有動(dòng)物中幾乎都有表達(dá)[2]。WNT信號(hào)能夠
【共引文獻(xiàn)】
中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條
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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條
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【相似文獻(xiàn)】
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