原代乳鼠心肌細胞分離培養(yǎng)的改進
本文關鍵詞:原代乳鼠心肌細胞分離培養(yǎng)的改進,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的探討提高細胞純度、存活率及活性的乳鼠心肌分離培養(yǎng)方法。方法改進心臟組織的處理方法,用胰酶預處理后再用II型膠原酶依次處理心肌組織,采用差速貼壁及化學藥物純化心肌細胞。結(jié)果提取的單個心肌細胞結(jié)構完整,呈類圓形;12 h時大部分細胞貼壁;24 h后幾乎全部貼壁,僅見少量漂浮細胞,貼壁細胞伸出偽足,呈梭形、三角形等,細胞出現(xiàn)自主搏動。48 h后心肌細胞偽足間形成聯(lián)接,交織成網(wǎng)狀,局部心肌細胞出現(xiàn)同步搏動。3 d后心肌細胞聚集成簇,呈島嶼樣搏動。心肌細胞存活率為96.6%,純度96%。結(jié)論此改進方法所提取培養(yǎng)的乳鼠心肌細胞存活率及純度高,細胞活性好,結(jié)構功能完整,可用于相關實驗中原代乳鼠心肌細胞的分離培養(yǎng)。
【作者單位】: 新疆醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院心臟中心;
【關鍵詞】: 心肌細胞 原代培養(yǎng) 新生大鼠
【基金】:國家自然科學基金(81060021)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 乳鼠心肌細胞常被用作體外實驗研究模型,用于心血管病的基礎研究。雖然早在1960年,Harary等[1]已提出原代乳鼠心肌細胞分離培養(yǎng)方法,但由于這一傳統(tǒng)方法所分離的心肌細胞存活率及純度低、細胞活性差等原因,尚不能滿足于基礎研究的需求。目前所報道的培養(yǎng)方法大多基于傳統(tǒng)方法
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 張曉京;張建棟;來麗娜;宋麗華;張曉一;郭春花;鄭王巧;宋曉亮;;SD乳鼠原代心肌細胞培養(yǎng)方法的改進[J];長治醫(yī)學院學報;2012年03期
2 伍長學;范英;李新;廖斌;石應康;詹福生;;新生大鼠心肌細胞原代培養(yǎng)方法的改進[J];瀘州醫(yī)學院學報;2009年01期
3 龐勇軍;孫莉;謝文娟;莫書榮;;新生大鼠心肌細胞分離、純化及培養(yǎng)方法的改進[J];上海交通大學學報(醫(yī)學版);2011年04期
4 柳梅;張剛成;姚藝;李珊珊;;乳鼠心肌細胞的體外培養(yǎng)[J];臨床和實驗醫(yī)學雜志;2009年01期
5 娜幾娜;王凌鵬;馬艷;侯月梅;;小鼠乳鼠心肌細胞的原代培養(yǎng)[J];新疆醫(yī)科大學學報;2008年07期
6 楊瑞豐 ,潘偉;心肌細胞培養(yǎng)進展[J];中國心血管病研究雜志;2005年08期
7 李志軍;曹雪濱;;新生大鼠原代心肌細胞的培養(yǎng)[J];新鄉(xiāng)醫(yī)學院學報;2012年01期
8 張琳;李東野;王志榮;夏勇;朱紅;潘德峰;張卓琦;楊煜;;新生大鼠心肌細胞原代培養(yǎng)方法的改良[J];徐州醫(yī)學院學報;2008年05期
9 李博;吳慧穎;樸虎林;柳克祥;;新生大鼠心肌細胞原代培養(yǎng)方法的改良[J];中國實驗診斷學;2012年02期
10 張麗娜;金國琴;郭煒;趙培;;原代乳鼠心肌細胞的培養(yǎng)方法[J];中藥藥理與臨床;2010年05期
【共引文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 王曉儉;王守彪;;消化酶濃度和消化時間對幼鼠心肌細胞培養(yǎng)的影響[J];青島大學醫(yī)學院學報;2012年01期
2 羅則佳;陳盛;何念海;陳曙光;;萊菔硫烷對乳鼠心肌細胞缺血缺氧損傷的保護作用[J];重慶醫(yī)學;2013年05期
3 童德兵;曹華明;羊鎮(zhèn)宇;;大鼠心肌細胞的分離培養(yǎng)[J];貴州醫(yī)藥;2014年07期
4 王平;高燕;殷潔;劉娜;趙渤年;;丹參脂溶性成分對心肌細胞缺氧缺糖損傷的保護作用[J];中華中醫(yī)藥雜志;2015年01期
5 吳蔚;Oa劍非;王曉萍;邵冰;;豚鼠乳鼠心房肌細胞體外培養(yǎng)的探討[J];重慶醫(yī)學;2014年36期
6 朱祖成;;清熱解毒中藥對心肌細胞缺氧復氧損傷影響的實驗研究[J];中國民族民間醫(yī)藥;2013年02期
7 高東學;張陳勻;劉啟方;;乳鼠竇房結(jié)細胞的原代培養(yǎng)和形態(tài)學特征[J];中華老年心腦血管病雜志;2012年08期
8 劉威;張光明;袁瑞;萬曉明;金宏;;乳鼠原代心肌細胞提取方法的改良[J];吉林醫(yī)藥學院學報;2013年06期
9 趙金紅;王偉;張新金;李建美;;促紅細胞生成素抑制Ang Ⅱ誘導的大鼠心肌細胞肥大及其可能的信號通路[J];基礎醫(yī)學與臨床;2014年03期
10 邢慧慧;金明;楊雨民;包俊萍;高曉慧;舒亮;賈磊;;廣棗總黃酮對體外培養(yǎng)大鼠心臟成纖維細胞周期影響[J];遼寧中醫(yī)藥大學學報;2014年04期
中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 胡保奎;耿召華;祝善俊;劉玉峰;;新生大鼠心肌細胞的原代培養(yǎng)及鑒定[A];全國第十三屆心臟學會、第十六屆心功能專業(yè)委員會和《心臟雜志》編委會聯(lián)合學術大會會議紀要[C];2013年
中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 肖健;硫化氫通過抑制自噬減輕心肌缺血再灌注損傷的實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學;2011年
2 馬前軍;血管緊張素Ⅱ誘導心肌細胞肥大經(jīng)典瞬時電位通道的表達改變及其對缺氧復氧損傷的影響[D];蘇州大學;2011年
3 楊迪成;促紅細胞生成素抗心肌缺血再灌注損傷的實驗研究[D];上海交通大學;2007年
4 張緒東;玉郎傘黃酮對心肌缺血再灌注損傷的保護作用及機制研究[D];廣西醫(yī)科大學;2008年
5 簡潔;玉郎傘黃酮成分的單體分離與藥效研究[D];廣西醫(yī)科大學;2009年
6 王亞坤;D-核糖對大鼠生理機能的影響及其機制[D];河北師范大學;2009年
7 童敏;重建心臟生物起搏器模型的體外研究[D];蘇州大學;2010年
8 卓犖;3,4-亞甲基二氧基甲基苯丙胺對大鼠心肌細胞Connexin43以及細胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)的影響[D];華中科技大學;2013年
9 劉燕青;HCN4在微波輻射致大鼠竇房結(jié)損傷中的作用研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2013年
10 劉蜜;西洋參莖葉總皂苷抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激相關凋亡改善大鼠急性心肌梗死后心室重構的研究[D];中國中醫(yī)科學院;2013年
中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 龐勇軍;紅景天苷對培養(yǎng)乳鼠心肌細胞肌質(zhì)網(wǎng)釋放游離鈣濃度的影響[D];廣西醫(yī)科大學;2011年
2 張燕;紅景天苷對缺氧心肌細胞能量代謝的影響[D];河北醫(yī)科大學;2011年
3 陳穎;姜黃素對血管緊張素Ⅱ誘導的培養(yǎng)心肌細胞血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體-1(LOX-1)mRNA表達的影響[D];安徽醫(yī)科大學;2011年
4 李穎;左卡尼汀對心肌細胞缺氧/缺血—再灌注損傷保護作用的實驗與臨床研究[D];廣州醫(yī)學院;2011年
5 薛慧艷;羥基紅花黃色素A對缺氧心肌細胞的保護作用及其機制探討[D];山東大學;2007年
6 王瑞華;FIAU用于心臟報告基因顯像的實驗研究[D];華中科技大學;2007年
7 鄧瑩瑩;硫胺素、葉酸對柯薩奇B_3病毒感染的心肌細胞保護作用的研究[D];廣西醫(yī)科大學;2010年
8 王芳兵;腎上腺髓質(zhì)素基因轉(zhuǎn)染的骨髓間充質(zhì)干細胞缺氧共培養(yǎng)對新生大鼠心肌細胞凋亡的影響[D];福建醫(yī)科大學;2012年
9 黎志財;內(nèi)源性TNF-α在細菌脂蛋白誘導心肌細胞凋亡中的作用以及IL-10的保護效應[D];南京醫(yī)科大學;2012年
10 許茸茸;當歸紅芪超濾膜提取物對阿霉素致心肌細胞損傷的保護研究[D];蘭州大學;2013年
【二級參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 董豐,龔開政,張振剛,王波,呂申;原代心肌細胞培養(yǎng)方法的探討[J];大連醫(yī)科大學學報;2001年04期
2 嚴泉劍,李六金,張宇梅,楊貴忠,劉海軍,郭金龍,王禾,邵國興;生長曲線擬合及細胞群體倍增時間的簡化計算[J];第四軍醫(yī)大學學報;2002年10期
3 王濤,余志斌,謝滿江,車紅磊;新生大鼠心肌細胞培養(yǎng)技巧[J];第四軍醫(yī)大學學報;2003年02期
4 陳克研;蔡書成;陳振文;王洋;張賀;王承利;;新生Wistar大鼠心肌細胞的分離培養(yǎng)與鑒定[J];中國畜牧獸醫(yī);2012年05期
5 陽海鷹;丁巍;丁愛石;彭雙清;;新生小鼠心肌細胞培養(yǎng)模型的建立及其在毒性評價研究中的應用[J];軍事醫(yī)學科學院院刊;2010年01期
6 劉丹,陳和平,何明;新生大鼠心肌細胞分離與原代培養(yǎng)[J];江西醫(yī)學院學報;2005年05期
7 郝亞榮,李庚山,李建軍;乳鼠心肌細胞培養(yǎng)[J];嶺南心血管病雜志;2001年02期
8 于寧;李應東;劉凱;陳徹;;新生大鼠心肌細胞的原代培養(yǎng)方法的探討[J];蘭州大學學報(醫(yī)學版);2006年02期
9 張穎;鄭燕倩;王紅衛(wèi);楊智f ;劉遠謀;李慈珍;;新生大鼠心肌細胞培養(yǎng)及電生理特性觀察[J];上海交通大學學報(醫(yī)學版);2007年04期
10 汪進益;范慧敏;劉中民;盧蓉;馬亮;李楊;;大鼠心肌成纖維細胞體外培養(yǎng)的生物學特性及轉(zhuǎn)基因研究[J];上海醫(yī)學;2008年05期
【相似文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 吳秦潔;張勇剛;胡火珍;干可;羅代升;;SD乳鼠心肌細胞的培養(yǎng)及其低溫下鈣波-搏動耦聯(lián)的初步研究[J];四川大學學報(自然科學版);2009年01期
2 樂智勇;羅紅;;乳鼠心肌細胞體外培養(yǎng)的探討[J];湖北中醫(yī)學院學報;2007年03期
3 孫銀平,白樺,邢東琦,吳立玲;AngⅡ?qū)θ槭笮募〖毎“逖苌L因子受體的調(diào)控作用[J];高血壓雜志;2001年04期
4 王洪新,,饒曼人;高鉀溶液對培養(yǎng)乳鼠心肌細胞結(jié)合PN200一110的影響[J];中國應用生理學雜志;1994年04期
5 劉霞;史明艷;歐陽五慶;;乳鼠心肌細胞的體外三維培養(yǎng)[J];西北農(nóng)林科技大學學報(自然科學版);2009年03期
6 張煜,焦青萍,黃蕓,張維,徐紅,邱朝暉,談中茹,李開滬;Egb761對SD乳鼠心肌細胞外鈣內(nèi)流的影響研究[J];老年醫(yī)學與保健;2001年01期
7 王寧;李應東;;乳鼠心肌細胞原代培養(yǎng)方法的改進[J];中國心血管病研究;2007年12期
8 陳鐵驊,凌琦;血管緊張素Ⅱ?qū)ε囵B(yǎng)乳鼠心肌細胞 Bcl-2和c-myc基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控作用[J];高血壓雜志;1999年03期
9 周倍伊,陶大昌,藤其志,王正榮;褪黑素對培養(yǎng)的乳鼠心肌細胞內(nèi)mPER1基因近日(晝夜)節(jié)律表達的影響[J];航天醫(yī)學與醫(yī)學工程;2002年06期
10 劉輝;王寧;梁宏亮;蘇潔;俞世強;劉金成;易定華;;黃芪甲苷后處理對乳鼠心肌細胞缺氧復氧損傷的作用研究[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2014年17期
中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條
1 吳秦潔;陳玉;張勇剛;胡火珍;;低溫下乳鼠心肌細胞胞內(nèi)鈣離子的時實動態(tài)觀察[A];中國細胞生物學學會第九次會員代表大會暨青年學術大會論文摘要集[C];2007年
2 孫欹陽;陳龍;王莎莎;;鎘負荷誘導培養(yǎng)乳鼠心肌細胞內(nèi)Ca~(2+)下調(diào)機制[A];中國生理學會第六屆全國青年生理學工作者學術會議論文摘要[C];2003年
中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 陳阜緒;不同葡萄糖濃度培養(yǎng)基對原代乳鼠心肌細胞影響的研究[D];浙江大學;2013年
本文關鍵詞:原代乳鼠心肌細胞分離培養(yǎng)的改進,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:431208
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