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氯化鈷模擬低氧環(huán)境下人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及基因蛋白的表達(dá)

發(fā)布時間:2017-06-06 16:21

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【摘要】:背景:氯化鈷可促進(jìn)人臍帶源性間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖,具有時間和濃度依賴性,并對其基因蛋白表達(dá)具有調(diào)控作用。目的:研究氯化鈷模擬的低氧環(huán)境對人臍帶源性間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖及基因蛋白表達(dá)的影響,旨在建立高效的間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)擴(kuò)增體系。方法:采用組織塊法提取人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,氯化鈷模擬化學(xué)低氧環(huán)境,在不同濃度(0,100,150,200,250μmol/L)和不同時間(0,1,2,3,4 d)條件下,用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞表面相關(guān)抗原的鑒定及細(xì)胞周期檢測;CCK-8法測定細(xì)胞增殖情況;RT-PCR測定缺氧誘導(dǎo)因子1α、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶、基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1、白細(xì)胞介素6、轉(zhuǎn)化生長因子βmR NA的表達(dá);Western blot測定缺氧誘導(dǎo)因子1α蛋白的表達(dá)。結(jié)果與結(jié)論:人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞表面相關(guān)抗原CD29、CD73、CD90、CD105表達(dá)陽性,CD31、CD14、CD34、CD45、CD11b、HLA-DR呈陰性表達(dá),且不受氯化鈷模擬的低氧環(huán)境影響。氯化鈷模擬的化學(xué)性低氧可促進(jìn)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞增殖,且具有一定時間及濃度依賴性。RT-PCR檢測到低氧組缺氧誘導(dǎo)因子1α、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶、基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1 m RNA表達(dá)上調(diào),而白細(xì)胞介素6及轉(zhuǎn)化生長因子βmR NA表達(dá)下調(diào),差異有顯著性意義(P0.05)。低氧組中缺氧誘導(dǎo)因子1α蛋白表達(dá)增高。結(jié)果表明氯化鈷模擬的體外低氧環(huán)境能促進(jìn)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞增殖,最佳濃度為200μmol/L,但過高濃度(250μmol/L)時反而抑制其增殖,機(jī)制可能與缺氧誘導(dǎo)因子1α基因與蛋白表達(dá)增加相關(guān)。
【作者單位】: 解放軍蘭州軍區(qū)蘭州總醫(yī)院血液科/全軍血液病中心;蘭州大學(xué)第二醫(yī)院血液內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】臍帶 間質(zhì)干細(xì)胞 細(xì)胞低氧 細(xì)胞增殖 缺氧誘導(dǎo)因子 組織工程 干細(xì)胞 臍帶臍血干細(xì)胞 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 低氧 氯化鈷 增殖 基因表達(dá) 缺氧誘導(dǎo)因子α
【基金】:甘肅省科技重大專項(1102FKDA005)~~
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 0引言IntroductionCD73-PE、CD90-PE、CD105-PE、CD31-PE、CD14-PE、人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞易于分離且無嚴(yán)重爭議的倫理問CD34-PE、CD11b-PE、CD45-Percp、Anti-HLA-DR-FITC題,可作為間充質(zhì)干細(xì)胞的一種理想選擇性資源,其特性優(yōu)購自美國Becton Dickinson公司;水合氯化鈷(Co Cl2·

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本文編號:426890

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