本文關(guān)鍵詞：副溶血性弧菌Vop T蛋白的表達(dá)及其抗體的毒力菌株特異性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的研究副溶血性弧菌VopT蛋白的菌群特異性,為建立致病性副溶血性弧菌的快速檢測(cè)方法以及探討VopT的作用機(jī)制奠定基礎(chǔ)。方法根據(jù)副溶血性弧菌VopT蛋白基因(VPA1327)序列設(shè)計(jì)合成引物,通過(guò)PCR從副溶血性弧菌致病株WX06152(血清型O3∶K6)中擴(kuò)增出目的基因,構(gòu)建原核表達(dá)載體pET-30a(+)-VPA1327并轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)。經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá),重組蛋白應(yīng)用MALDI-TOF-MS/MS鑒定和His鎳柱純化,并通過(guò)免疫BALB/c小鼠制備抗血清,建立副溶血性弧菌VopT蛋白的間接ELISA檢測(cè)方法,并分析其敏感性和毒力菌株特異性。結(jié)果成功表達(dá)了大小為33kDa融合蛋白,肽指紋圖譜與副溶血性弧菌VopT蛋白一致。重組VopT抗血清能夠特異性檢測(cè)副溶血性弧菌毒力株的全菌細(xì)胞及其裂解蛋白,與環(huán)境株及其它種屬菌株無(wú)明顯交叉反應(yīng),靈敏度達(dá)到105 CFU·mL-1。結(jié)論重組VopT的抗血清具有良好特異性,為探討VopT致病機(jī)理和分泌機(jī)制研究提供了一定的參考依據(jù)。
【作者單位】： 揚(yáng)州大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院;揚(yáng)州大學(xué)江蘇省人獸共患病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;江蘇出入境檢驗(yàn)檢疫局動(dòng)植物與食品檢測(cè)中心;
【關(guān)鍵詞】： 副溶血性弧菌 VopT蛋白 原核表達(dá) 多克隆抗體 特異性
【基金】：江蘇省科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(No.BE2013733) 蘇北科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(No.BC2013438)聯(lián)合資助~~
【分類號(hào)】：R378
【正文快照】： 江蘇省科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(No.BE2013733)、蘇北科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(No.BC2013438)聯(lián)合資助副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)廣泛分布于海水環(huán)境和海產(chǎn)品中,流行病學(xué)研究顯示Vp引起的食源性疾病呈世界性分布,目前已經(jīng)成為沿海國(guó)家和地區(qū)面臨的重要公共衛(wèi)生問(wèn)題之一[1]。研究

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張慶寧;胡明;朱榮生;任相全;武英;王懷忠;劉玉慶;王述柏;;生態(tài)養(yǎng)豬模式中發(fā)酵床優(yōu)勢(shì)細(xì)菌的微生物學(xué)性質(zhì)及其應(yīng)用研究[J];山東農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年04期

2 趙新亮;馬強(qiáng);;玉米SRAP反應(yīng)體系的建立與優(yōu)化[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2006年15期

3 劉素霞;洪達(dá);高武軍;鄧傳良;盧龍斗;;石榴RAPD反應(yīng)體系優(yōu)化及親緣關(guān)系研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2007年36期

4 張金洲;項(xiàng)智鋒;王清華;李學(xué)斌;趙海濤;張廷虎;郭玉嬌;;利用RAPD標(biāo)簽分析3種鯉科魚(yú)群體的遺傳變異[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年23期

5 張金洲;項(xiàng)智鋒;李學(xué)斌;王清華;張廷虎;趙海濤;郭玉嬌;;利用RAPD指紋分析技術(shù)分析3種鯉科魚(yú)群體的遺傳變異[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年24期

6 張小華;馬愛(ài)軍;陸建蘭;;江西紅壤α-淀粉酶分離株的多態(tài)性研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年35期

7 徐冉;湯雪燕;繆e

本文編號(hào)：425519