本文關(guān)鍵詞：微小核糖核酸-21抑制spry2影響jurkat細(xì)胞IL-10表達(dá)的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[目的]通過研究微小核糖核酸(miRNA)-21調(diào)控spry2對surkat細(xì)胞IL-10、IL-2和TNF-α表達(dá)的影響,從而探討miRNA-21在炎癥反應(yīng)中的作用機(jī)制。 【方法]將人T淋巴細(xì)胞系jurkat E6-1細(xì)胞分為人工合成的miRNA-21模擬物(Mimics)組和miRNA-21模擬物陰性對照(Mimics NC)組、miRNA-21抑制物(inhibitors)組和miRNA-21抑制物組陰性對照(inhibitors NC)組,使用無血清的RPMI1640把jurkat細(xì)胞的濃度調(diào)整為2×106/m1,各組轉(zhuǎn)染物的終濃度為75nM,每組重復(fù)8次,對培養(yǎng)的jurkat細(xì)胞使用脂質(zhì)體2000試劑進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染48小時后,離心收集各組jurkat細(xì)胞的上清液,并用PBS洗滌jurkat細(xì)胞后提取細(xì)胞總RNA和蛋白,使用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(FQ-PCR)檢測各組細(xì)胞的miRNA-21和spry2mRNA的表達(dá)水平,采用蛋白免疫印跡技術(shù)(Western Blotting)檢測各組spry2蛋白表達(dá),同時用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測細(xì)胞上清液白細(xì)胞介素10(IL-10)、白細(xì)胞介素2(IL-2)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)的分泌水平,并對IL-10的分泌與miRNA-21和spry2的表達(dá)進(jìn)行直線相關(guān)性分析。 [結(jié)果]jurkat細(xì)胞轉(zhuǎn)染48h后,與其陰性對照組比較,Mimics組miRNA-21的相對表達(dá)量和細(xì)胞上清液IL-10的分泌水平顯著增加(P0.05), spry2mRNA的相對表達(dá)量和spry2的相對蛋白含量顯著減少(P0.05),細(xì)胞上清液TNF-α和IL-2的分泌水平無顯著變化(P0.05)；與其陰性對照組比較,抑制物組miRNA-21的相對表達(dá)量和細(xì)胞上清液IL-10的分泌水平顯著減少(P0.05),spry2mRNA相對表達(dá)量和spry2的相對蛋白含量顯著增加(P0.05),細(xì)胞上清液TNF-α和IL-2的分泌水平無顯著變化(P0.05) IL-10的分泌水平與miRNA-21的表達(dá)量呈顯著正相關(guān)(r=0.816,P0.01),IL-10的分泌水平與spry2蛋白的相對表達(dá)量呈顯著負(fù)相關(guān),(r=-0.762,P0.05)。 [結(jié)論]在jurkat細(xì)胞中,miRNA-21可能通過抑制其靶基因spry2的表達(dá)而促進(jìn)抗炎性細(xì)胞因子IL-10的分泌,因此表明miRNA-21可能通過促進(jìn)IL-10的表達(dá)而發(fā)揮潛在的保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：微小核糖核酸-21 spry2 jurkat細(xì)胞 IL-10
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R363
【目錄】：

• 術(shù)語和中英文對照4-6
• 摘要6-7
• ABSTRACT7-9
• 前言9-14
• 材料和方法14-31
• 結(jié)果31-46
• 討論46-49
• 結(jié)論49-50
• 參考文獻(xiàn)50-56
• 綜述56-75
• 參考文獻(xiàn)67-75
• 致謝75-76
• 碩士研究生期間發(fā)表的論文76

【共引文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：微小核糖核酸-21抑制spry2影響jurkat細(xì)胞IL-10表達(dá)的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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