本文關鍵詞：微小核糖核酸-21抑制spry2影響jurkat細胞IL-10表達的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[目的]通過研究微小核糖核酸(miRNA)-21調控spry2對surkat細胞IL-10、IL-2和TNF-α表達的影響,從而探討miRNA-21在炎癥反應中的作用機制。 【方法]將人T淋巴細胞系jurkat E6-1細胞分為人工合成的miRNA-21模擬物(Mimics)組和miRNA-21模擬物陰性對照(Mimics NC)組、miRNA-21抑制物(inhibitors)組和miRNA-21抑制物組陰性對照(inhibitors NC)組,使用無血清的RPMI1640把jurkat細胞的濃度調整為2×106/m1,各組轉染物的終濃度為75nM,每組重復8次,對培養(yǎng)的jurkat細胞使用脂質體2000試劑進行細胞轉染48小時后,離心收集各組jurkat細胞的上清液,并用PBS洗滌jurkat細胞后提取細胞總RNA和蛋白,使用熒光定量聚合酶鏈反應(FQ-PCR)檢測各組細胞的miRNA-21和spry2mRNA的表達水平,采用蛋白免疫印跡技術(Western Blotting)檢測各組spry2蛋白表達,同時用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測細胞上清液白細胞介素10(IL-10)、白細胞介素2(IL-2)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)的分泌水平,并對IL-10的分泌與miRNA-21和spry2的表達進行直線相關性分析。 [結果]jurkat細胞轉染48h后,與其陰性對照組比較,Mimics組miRNA-21的相對表達量和細胞上清液IL-10的分泌水平顯著增加(P0.05), spry2mRNA的相對表達量和spry2的相對蛋白含量顯著減少(P0.05),細胞上清液TNF-α和IL-2的分泌水平無顯著變化(P0.05)；與其陰性對照組比較,抑制物組miRNA-21的相對表達量和細胞上清液IL-10的分泌水平顯著減少(P0.05),spry2mRNA相對表達量和spry2的相對蛋白含量顯著增加(P0.05),細胞上清液TNF-α和IL-2的分泌水平無顯著變化(P0.05) IL-10的分泌水平與miRNA-21的表達量呈顯著正相關(r=0.816,P0.01),IL-10的分泌水平與spry2蛋白的相對表達量呈顯著負相關,(r=-0.762,P0.05)。 [結論]在jurkat細胞中,miRNA-21可能通過抑制其靶基因spry2的表達而促進抗炎性細胞因子IL-10的分泌,因此表明miRNA-21可能通過促進IL-10的表達而發(fā)揮潛在的保護作用。
【關鍵詞】：微小核糖核酸-21 spry2 jurkat細胞 IL-10
【學位授予單位】：廣西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R363
【目錄】：

• 術語和中英文對照4-6
• 摘要6-7
• ABSTRACT7-9
• 前言9-14
• 材料和方法14-31
• 結果31-46
• 討論46-49
• 結論49-50
• 參考文獻50-56
• 綜述56-75
• 參考文獻67-75
• 致謝75-76
• 碩士研究生期間發(fā)表的論文76

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王來娣;鄭云;蔣拾貝;王星果;張軍;龔道清;;miRNA在脂代謝中的研究進展[J];動物營養(yǎng)學報;2013年07期

2 沈素晶;黃憲章;莊俊華;;微小RNA與類風濕關節(jié)炎[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;2013年20期

3 周鵬志;陳斌;胡品津;孫嫣;;miR-19a對潰瘍性結腸炎的作用機制[J];南方醫(yī)科大學學報;2013年09期

4 楊先濤;張禎禎;詹學;朱朝敏;;肺結核患兒外周血單個核細胞中microRNA表達的初步研究[J];第三軍醫(yī)大學學報;2013年19期

5 楊敏;楊再興;仲人前;;長鏈非編碼RNA在免疫系統(tǒng)中的研究進展[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;2013年24期

6 Juan Liu;Chang-Ping Wu;Bin-Feng Lu;Jing-Ting Jiang;;Mechanism of T cell regulation by microRNAs[J];Cancer Biology & Medicine;2013年03期

7 方楚玲;張貝;郭琳瑯;;微小RNA調控肺癌耐藥相關信號通路的研究進展[J];廣東醫(yī)學;2013年21期

8 周誠;買月琴;潘治宇;陶志勇;夏惠;李正紅;;高濃度葡萄糖對人樹突狀細胞CD83、CD86、CD36、CCR7和μ-阿片受體的影響[J];蚌埠醫(yī)學院學報;2013年11期

9 Wen Chen;Ze-Hui Yan;Yu-Ming Wang;Bao-Yan Xu;Guo-Hong Deng;;Genome-wide microarray-based analysis of miRNAs expression in patients with acute-onchronic liver failure[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2014年01期

10 李術;楊子江;;microRNA在硒對免疫調控中作用的研究進展[J];東北農業(yè)大學學報;2014年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Qifei Deng;Suli Huang;Xiao Zhang;Wangzhen Zhang;Jing Feng;Tian Wang;Die Hu;Lei Guan;Jun Li;Xiayun Dai;Huaxin Deng;Xiaomin Zhang;Tangchun Wu;;Plasma microRNA Expression and Micronuclei Frequency in Workers Exposed to Polycyclic Aromatic Hydrocarbons[A];第十三次全國勞動衛(wèi)生與職業(yè)病學術會議論文匯編[C];2014年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 聶宇;骨髓間充質干細胞凋亡相關microRNA的鑒定及功能學研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2011年

2 姚春霞;GATA轉錄因子對心肌能量代謝及細胞增殖的調控機制研究[D];鄭州大學;2012年

3 鄧棋霏;遺傳多態(tài)性、microRNA與肺癌、焦爐工氧化應激和遺傳損傷的關聯(lián)性研究[D];華中科技大學;2013年

4 杜漸;胰腺癌BxPC-3細胞上清液通過上調樹突狀細胞miRNA-146a的表達抑制其成熟及免疫功能的研究[D];大連醫(yī)科大學;2012年

5 黃素麗;血漿microRNA與急性心梗發(fā)病風險和焦爐工心率變異性改變的關聯(lián)研究[D];華中科技大學;2013年

6 趙小慶;剪切后內含子與相應mRNA的相互作用分析[D];內蒙古大學;2013年

7 鄢文;microRNA-19促進人肺腺癌細胞株A549向間充質細胞轉化[D];南方醫(yī)科大學;2011年

8 賈曉健;以HDL受體SR-BI基因3'UTR為靶點的microRNA和小分子化合物的發(fā)現(xiàn)及作用機制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2013年

9 虞桂;冠心病不穩(wěn)定性心絞痛血瘀證的microRNA生物標志物研究[D];中國中醫(yī)科學院;2013年

10 陳婷;microRNA-155調控oxLDL刺激樹突細胞參與動脈粥樣硬化免疫炎癥反應的作用及機制[D];浙江大學;2013年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張海軍;動脈粥樣硬化與microRNA-21及TGFβRⅡ的表達研究[D];廣州醫(yī)學院;2011年

2 吳廣亮;MIR-21在周期性張應變誘導大鼠血管平滑肌細胞細胞外基質表達中的作用及其機制[D];上海交通大學;2012年

3 鄧垂文;原發(fā)性膽汁性肝硬化抗線粒體抗體陽性與陰性患者間血清差異蛋白質組學研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2012年

4 熊雁;血管內皮細胞microRNA-21在高糖環(huán)境及冠心病病人中表達的差異及其功能研究[D];遵義醫(yī)學院;2012年

5 張敏;miR-106a致去卵巢小鼠認知功能減退的機制研究[D];南京醫(yī)科大學;2013年

6 申璐;miR-21與MAPKs信號通路反饋調控在亞砷酸鈉所致HELF細胞惡性轉化中的作用[D];南京醫(yī)科大學;2013年

7 王曉龍;miR-146a，miR-155在食管鱗癌中的表達及臨床意義[D];鄭州大學;2013年

8 李永輝;miR-29a在動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展中的作用及其分子機制[D];河北醫(yī)科大學;2013年

9 辛立建;C57BL/6小鼠實驗性自身免疫性腦脊髓炎模型中SOCS1-JAK2-STAT3信號通路作用機制的探討[D];河北醫(yī)科大學;2013年

10 張向君;MiRNA-143在ob/ob小鼠體內的表達以及游離脂肪酸對其表達的調控研究[D];蚌埠醫(yī)學院;2013年

  本文關鍵詞：微小核糖核酸-21抑制spry2影響jurkat細胞IL-10表達的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：419958