本文關(guān)鍵詞：結(jié)核分枝桿菌毒素-抗毒素系統(tǒng)mazEF6缺失突變株的構(gòu)建及其表型的初步探討，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：為構(gòu)建結(jié)核分枝桿菌毒素-抗毒素系統(tǒng)mazEF6缺失突變株,并對其表型進行初步探討,首先用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)分別從H37Rv標(biāo)準株和PUC-19K質(zhì)粒擴增出mazEF6基因的同源臂及卡那霉素抗性基因kan;然后應(yīng)用融合PCR技術(shù)將mazEF6基因的同源臂與kan基因進行雜交拼接,獲得目的融合片段,將該融合片段克隆于pMD-19T(simple)載體形成自殺質(zhì)粒pMD-19T-ΔmazEF6-kan,并將自殺質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至大腸埃希菌DH5α中;最后利用電穿孔技術(shù)將自殺質(zhì)粒電轉(zhuǎn)至H37Rv標(biāo)準株中,在卡那霉素抗性改良羅氏培養(yǎng)基上篩選H37RvΔmazEF6缺失突變株單個菌落,提取陽性菌株全基因組DNA為模板,PCR擴增克隆片段并測序。將所獲得的H37RvΔmazEF6缺失突變株進行遺傳穩(wěn)定性檢測后,對其表型進行初步研究。結(jié)果顯示,該缺失株在15代內(nèi)未發(fā)生回復(fù)性突變;與野生株相比,缺失株生長速度緩慢且細菌形態(tài)短小。本研究證實,融合PCR技術(shù)便于快速獲得結(jié)核分枝桿菌缺失突變株;結(jié)核分枝桿菌在缺失毒素-抗毒素系統(tǒng)mazEF6基因后生存能力下降,這為進一步研究毒素-抗毒素系統(tǒng)的作用奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)與免疫學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 結(jié)核分枝桿菌 毒素-抗毒素系統(tǒng) 缺失突變株
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81160368;81341079)
【分類號】：R378.911
【正文快照】： 結(jié)核病(tuberculosis,TB)是一種由結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染引起的最常見的人獸共患慢性傳染病。隨著結(jié)核分枝桿菌耐藥率升高、人類免疫缺陷病毒(humanimmunodeficiency virus,HIV)合并結(jié)核分枝桿菌感染增多,結(jié)核病在全球的流行日趨增強。結(jié)核分枝桿

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 喬鳳;陳澤良;王玉飛;趙瑾;杜昕穎;于雅琴;黃留玉;;pUC19K質(zhì)粒的構(gòu)建及其在布魯氏菌突變株構(gòu)建中的應(yīng)用[J];中國生物工程雜志;2007年12期

2 賢一博;崔麗丹;張俊杰;;結(jié)核枝桿菌中毒素-抗毒素系統(tǒng)的鑒定[J];微生物學(xué)報;2011年02期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 盧福芝;孫靚;黃靖華;黃艷燕;周興;黃日波;;質(zhì)粒pUC19-CM-D的構(gòu)建及應(yīng)用[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年19期

2 賀云霞;徐慧;葉飛;孫慧玲;王宏俊;龔玉梅;黃秀芬;張莉;張培君;;副豬嗜血桿菌aroA基因自殺載體的構(gòu)建[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2011年13期

3 盧福芝;孫靚;黃靖華;黃艷燕;黃日波;;質(zhì)粒pUC19-CM-D的構(gòu)建及應(yīng)用(摘要)(英文)[J];Agricultural Science & Technology;2010年05期

4 曲R

本文編號：418272