提高新生大鼠原代心肌細(xì)胞純度方法的探討
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【摘要】:目的:探討提高新生大鼠原代心肌細(xì)胞純度的方法。方法:應(yīng)用0.08%心肌細(xì)胞消化液重復(fù)消化出生第1-3天乳鼠的心肌組織多次;收集的細(xì)胞用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中和。用差速貼壁分離法分離后,加入紅細(xì)胞裂解液,以除去紅細(xì)胞,加入溴脫氧尿嘧啶(Brdu)純化心肌細(xì)胞后置CO2培養(yǎng)箱孵育2天,無血清同步化1天。結(jié)果:分離1只乳鼠獲得的心肌細(xì)胞產(chǎn)量約為1.2×106個(gè),有活力心肌細(xì)胞占90%以上,心肌細(xì)胞純度90%,3-4天后心肌細(xì)胞融合成片,并出現(xiàn)自發(fā)性節(jié)律性搏動(dòng)。結(jié)論:該方法在保證心肌細(xì)胞產(chǎn)量和心肌細(xì)胞活性的同時(shí),能大幅度提高心肌細(xì)胞純度。
【作者單位】: 河南中醫(yī)學(xué)院;河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】: 新生大鼠 心肌細(xì)胞 原代培養(yǎng) 鑒定
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金委面上項(xiàng)目(81173410):參加優(yōu)化方通過TGF-β/smads通路改善心梗后心室重構(gòu)作用機(jī)制的研究,負(fù)責(zé)人:朱明軍;國(guó)家自然科學(xué)基金委面上項(xiàng)目(81373853):參附益心顆粒通過抑制AngⅡ改善心梗后心衰大鼠心肌代謝重構(gòu)的機(jī)制研究,負(fù)責(zé)人:朱明軍 河南省高?萍紕(chuàng)新團(tuán)隊(duì)支持計(jì)劃(13IRTSTHN012),負(fù)責(zé)人:朱明軍
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 自1960年Haracy L等[1]首次對(duì)乳鼠的心肌細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)以來,原代心肌細(xì)胞越來越多的用于實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)過國(guó)內(nèi)、外學(xué)者對(duì)原代心肌細(xì)胞培養(yǎng)方法的不斷探索,原代心肌細(xì)胞的產(chǎn)量和活性都得到了大幅度的提高。然而,隨著實(shí)驗(yàn)的不斷深入,對(duì)原代心肌細(xì)胞的純度要求也越來越高,尤其在探討藥
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本文關(guān)鍵詞:提高新生大鼠原代心肌細(xì)胞純度方法的探討,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
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