本文關(guān)鍵詞：IFN-λR1與TRAF6的相互作用及對NF-κB與ISRE活性的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的構(gòu)建含有信號肽的全長IFN-λR1質(zhì)粒,研究在配體IFN-λ1存在的情況下IFN-λR1與TRAF6的相互作用及對NF-κB與ISRE活性的影響。方法利用多次PCR將信號肽編碼序列引入IFN-λR1序列中,構(gòu)建表達(dá)載體,用免疫熒光及膜蛋白分離實驗鑒定IFN-λR1的表達(dá)定位。用免疫共沉淀的方法研究IFN-λ1刺激下IFN-λR1與TRAF6間的相互作用。用雙熒光素酶報告基因?qū)嶒炑芯縄FN-λR1與TRAF6相互作用后對下游NF-κB與ISRE活性的影響,采用實時定量PCR的方法檢測此種作用對OAS1與Mx1基因表達(dá)的影響。結(jié)果成功構(gòu)建了含信號肽的全長IFN-λR1表達(dá)載體,細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的IFN-λR1可正確定位于細(xì)胞膜上。細(xì)胞共轉(zhuǎn)染IFN-λR1和TRAF6,在免疫沉淀物中可以檢測到兩個蛋白同時存在。細(xì)胞內(nèi)共表達(dá)的IFN-λR1能夠抑制TRAF6誘導(dǎo)的NF-λB的激活,而共表達(dá)的TRAF6可以抑制IFN-λR1下游ISRE的活性,并下調(diào)OAS1與Mx1基因的表達(dá)。結(jié)論證實了在IFN-λ1存在下IFN-λR1與TRAF6的相互作用及二者相互作用對各自細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響,為TRAF6作為IFN-λ受體信號通路中的相互作用蛋白提供了新的實驗依據(jù)。
【作者單位】： 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所;北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)系、醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)國家重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： IFN-λR TRAF NF-κB ISRE 相互作用
【分類號】：R346
【正文快照】： 學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)系、醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)國家重點實驗室干擾素-λ(interferon-λ,IFN-λ)是2003年由Sheppard等[1]和Kotenko等[2]共同發(fā)現(xiàn),屬于Ⅲ型干擾素,包括:IFN-λ1、IFN-λ2和IFN-λ3,又稱白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-29、IL-28A和IL-28B。IFN-λ的受體由特

【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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8 張文;張p

本文編號：414797