本文關(guān)鍵詞：黃綠青霉素對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和凋亡作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 通過體外培養(yǎng)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞CIT中毒模型，觀察CIT對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、凋亡的影響和作用機(jī)制。 方法 1.體外培養(yǎng)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞，用CIT毒素進(jìn)行染毒處理。 2.通過酶標(biāo)儀(MTT)檢測(cè)不同濃度CIT，不同作用時(shí)間對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞活性的影響。 3.通過流式細(xì)胞術(shù)（FCM）檢測(cè)不同濃度CIT，，不同作用時(shí)間對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期的影響。 4.通過蛋白免疫印跡方法（Westernblotting）檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9，PARP的表達(dá)水平。 結(jié)果 1.CIT降低人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的活性，濃度越高/作用時(shí)間越長(zhǎng)細(xì)胞活性越減弱(P0.05)。黃綠青霉素通過阻止人臍經(jīng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞中DNA的分裂使細(xì)胞滯留在G0/G1期，并使S期延長(zhǎng)(P0.05)。 2．CIT在10μg/L，20μg/L的作用濃度均可引發(fā)細(xì)胞凋亡，高濃度CIT組凋亡更明顯(P0.05)。 3.CIT染毒HUVECs的促凋亡蛋白Bax表達(dá)量增高，抑凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)量降低，高劑量組變化更加明顯（P0.05）。 4.CIT染毒組caspase-3和caspase-9的活化片段明顯增高，PARP降解產(chǎn)物的含量也呈增高狀態(tài)，且高劑量染毒組更加明顯。 結(jié)論 1.CIT通過阻止人臍經(jīng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞中DNA的分裂使細(xì)胞滯留在G0/G1期，阻止細(xì)胞分裂增殖，從而降低血管內(nèi)皮細(xì)胞的活性，且隨CIT濃度的升高，滯留作用越明顯。 2. CIT可導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，并呈劑量-效應(yīng)關(guān)系，由此引起的血管內(nèi)皮損傷，或可在動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病等發(fā)生中起到一定作用。 3.CIT能夠改變Bax/Bcl-2的比例形成同源二聚體，啟動(dòng)線粒體凋亡，上調(diào)活化的caspase-9含量，從而形成級(jí)聯(lián)反應(yīng)進(jìn)一步活化caspase-3，并識(shí)別其底物PARP并使之降解從而阻止了PARP對(duì)損傷DNA的修復(fù)功能，最后導(dǎo)致細(xì)胞凋亡，而由此引起的血管內(nèi)皮受損，可能成為引發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病的使動(dòng)因素。
【關(guān)鍵詞】：黃綠青霉素 血管內(nèi)皮細(xì)胞 Bax Bcl-2 Caspase-3 Caspase-9 PARP
【學(xué)位授予單位】：泰山醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R329.2
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 符號(hào)說明8-9
• 前言9-11
• 材料與方法11-34
• 結(jié)果34-40
• 討論40-46
• 結(jié)論46-47
• 展望47-48
• 參考文獻(xiàn)48-53
• 綜述一53-57
• 參考文獻(xiàn)55-57
• 綜述二57-63
• 參考文獻(xiàn)60-63
• 致謝63-64
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文64

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：407998