本文關(guān)鍵詞：曲古霉素A對小鼠骨髓源性樹突狀細胞表型和功能的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：未成熟樹突狀細胞（immature dendritic cells, imDCs）誘導(dǎo)免疫耐受的作用越來越受到重視，如何保持其未成熟狀態(tài)成為研究熱點。本文旨在研究曲古霉素A（Trichostatin A,TSA）對小鼠骨髓源性樹突狀細胞表型和功能的影響。 方法：取小鼠骨髓前體細胞，在含重組小鼠粒/巨細胞刺激因子（recombinant mousegranulocyte-macrophage colony-stimulating factor, rmGM-CSF）和重組小鼠白介素-4（recombinant mouse interleukin4,rmIL-4）完全培養(yǎng)基中誘導(dǎo)其向DCs分化，于第6天收集疏松貼壁細胞分為4組：空白組（不添加任何藥物）、TSA組(加入100ng/mlTSA)、LPS組（加入100ng/ml LPS）、LPS+TSA組（分別加入上述藥物），繼續(xù)培養(yǎng)48h后收集細胞。倒置顯微鏡觀察不同時間段細胞形態(tài)學(xué)變化。收集上述4組誘導(dǎo)培養(yǎng)至第8天疏松半貼壁細胞，PBS洗滌后調(diào)整細胞濃度5×106/ml，取100ul懸液加入流式試管中，加入FITC標(biāo)記CD86、CD80單克隆抗體各0.5ug，同型對照組分別加入相應(yīng)的同型對照抗體，4℃靜置避光30min,PBS再次洗滌后上流式細胞儀測定各組DCs表面CD86、CD80的表達情況。混合淋巴細胞增殖實驗檢測（MTT法）4組誘導(dǎo)培養(yǎng)至第8天的DCs對異基因T淋巴細胞增殖能力的影響。ELISA檢測各組培養(yǎng)至第8天的細胞上清液IL-12、IL-10分泌的變化。 結(jié)果：倒置顯微鏡觀察，，剛開始前體細胞體積較小，呈圓形貼壁生長。隨著培養(yǎng)時間的延長，胞體增大，變成橢圓形或不規(guī)則，至第2天有少量DCs集落生成，第4天DCs集落增多、增大，繼續(xù)培養(yǎng)至第6天見DCs集落呈疏松貼壁懸浮狀態(tài)生長，集落周圍有樹突樣懸浮細胞出現(xiàn)，呈典型DCs形態(tài)；流式細胞儀結(jié)果顯示經(jīng)TSA處理后，DCs表面分子CD86、CD80表達均低于其它各組（P0.05），尤其較LPS組降低更明顯；混合淋巴增殖實驗顯示TSA誘導(dǎo)的DCs顯著降低同種異基因T淋巴細胞增殖能力，提示DCs抗原提呈能力受損；ELISA檢測結(jié)果表明TSA能顯著提高樹突狀細胞分泌Th2型細胞因子IL-10（P0.05），與此同時對Th1型細胞因子IL-12分泌量抑制顯著（P0.05）。 結(jié)論：TSA能夠抑制樹突狀細胞的成熟和誘導(dǎo)未成熟樹突狀細胞的產(chǎn)生。該DCs不能被促炎因子激活，穩(wěn)定保持耐受性表型特征，因此其誘導(dǎo)的DCs在今后炎癥性疾病和器官移植排斥反應(yīng)等方面具有廣泛應(yīng)用前景。
【關(guān)鍵詞】：曲古霉素A 樹突狀細胞 混合淋巴細胞反應(yīng) 免疫功能
【學(xué)位授予單位】：蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R363
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-10
• 材料和方法10-15
• 結(jié)果15-21
• 討論21-25
• 結(jié)論25-26
• 參考文獻26-29
• 致謝29-30
• 附錄30-42
• A 英文縮略詞對照表30-31
• B 常用試劑配制31-32
• C 圖片及個人簡歷32-34
• D．綜述34-42
• 參考文獻40-42

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本文編號：406013