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脂肪來源干細(xì)胞向成骨分化及褪黑素干預(yù)細(xì)胞生物學(xué)活性的變化

發(fā)布時間:2017-05-29 10:11

  本文關(guān)鍵詞:脂肪來源干細(xì)胞向成骨分化及褪黑素干預(yù)細(xì)胞生物學(xué)活性的變化,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:背景:研究表明褪黑素能促進(jìn)脂肪來源干細(xì)胞向神經(jīng)元轉(zhuǎn)化,但對脂肪來源干細(xì)胞成骨分化后細(xì)胞的作用報道較少。目的:觀察脂肪來源干細(xì)胞向成骨分化及褪黑素對成骨分化后細(xì)胞生物學(xué)活性的影響。方法:1取昆明種小鼠附睪處脂肪利用Ⅰ型膠原酶消化法和差速貼壁法獲取、純化脂肪來源干細(xì)胞,應(yīng)用CD44免疫組化染色對細(xì)胞進(jìn)行鑒定。2取第2代脂肪來源干細(xì)胞,加入成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng),行堿性磷酸酶染色和von Kossa法檢測細(xì)胞分化情況。3取成骨誘導(dǎo)后的細(xì)胞,加入不同濃度的褪黑素,利用MTT法檢測24,48 h時細(xì)胞增殖情況。4取成骨誘導(dǎo)后的細(xì)胞,加入最佳濃度的褪黑素,分別檢測加入藥物3,6 d時的堿性磷酸酶活性。結(jié)果與結(jié)論:1接種48 h后大多數(shù)細(xì)胞貼壁,接種后4 d細(xì)胞呈現(xiàn)多種細(xì)胞形態(tài),并形成大小不一的細(xì)胞集落,傳代后的細(xì)胞形態(tài)趨于穩(wěn)定,均稱長梭型,培養(yǎng)細(xì)胞CD44呈陽性表達(dá),陽性顆粒位于胞膜,呈棕黃色。2成骨誘導(dǎo)后的細(xì)胞應(yīng)用von Kossa法染色呈陽性,黑色沉積物在細(xì)胞外的基質(zhì)中呈網(wǎng)格狀分布;堿性磷酸酶染色呈陽性,細(xì)胞內(nèi)可見棕黑色顆粒。3在24 h和48 h時間點(diǎn),1,10,100μmol/L組的吸光度值明顯大于空白組(P0.05),選擇這3個濃度作為最佳的褪黑素濃度。4各組成骨誘導(dǎo)后細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶活性隨時間延長明顯增加,差異有顯著性意義(P0.05)。褪黑素組(1,10,100μmol/L)在3 d時的堿性磷酸酶活性與空白組相比無明顯差異(P0.05),在6 d時較空白組明顯增加(P0.05)。提示褪黑素可以增強(qiáng)脂肪來源干細(xì)胞成骨分化后細(xì)胞增殖,并提高細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶活性。
【作者單位】: 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院骨外科;新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)二科;
【關(guān)鍵詞】干細(xì)胞 脂肪組織 細(xì)胞分化 成骨細(xì)胞 褪黑激素 組織工程 脂肪干細(xì)胞 褪黑素 脂肪來源干細(xì)胞 成骨分化 堿性磷酸酶
【基金】:2015年度新鄉(xiāng)市科技發(fā)展計劃項(xiàng)目(15SF27)~~
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 0引言Introduction骨科常見疾病如骨折、骨腫瘤、骨結(jié)核等均能造成骨質(zhì)缺損,常常需要植骨治療,取大量自體骨損傷較大,且植骨存在著不融合的可能性,如何治療骨缺損和提高植骨融合率一直困擾著患者和廣大臨床醫(yī)生。理想的骨移植替代材料既能夠達(dá)到或超過自體骨移植的愈合效果,又

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本文編號:404686

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