華支睪吸蟲(chóng)生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2的生物學(xué)特性和功能研究
發(fā)布時(shí)間:2017-05-28 19:00
本文關(guān)鍵詞:華支睪吸蟲(chóng)生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2的生物學(xué)特性和功能研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的探索華支睪吸蟲(chóng)生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2(Clonorchis sinensis growth factor receptor bound protein 2,CsGrb2)的生物學(xué)特性和功能。方法從華支睪吸蟲(chóng)cDNA文庫(kù)獲得CsGrb2的cDNA全長(zhǎng),NCBI搜索與之相似度高的基因序列,預(yù)測(cè)其所含結(jié)構(gòu)域和功能;應(yīng)用MEGA5程序?qū)?lái)自于Genbank中與之有較高相似度的基因序列進(jìn)行分析,構(gòu)建基因進(jìn)化樹(shù);原核表達(dá)重組融合蛋白CsGrb2,用表達(dá)的融合蛋白CsGrb2免疫小鼠,產(chǎn)生多克隆抗體,采用Western blot鑒定華支睪吸蟲(chóng)提取物中的天然CsGrb2,采用免疫組化法檢測(cè)CsGrb2在華支睪吸蟲(chóng)成蟲(chóng)及囊蚴的分布;采用qRT-PCR測(cè)定CsGrb2基因在不同發(fā)育階段的表達(dá)水平。結(jié)果 CsGrb2基因編碼一個(gè)含有SH3-SH2-SH3結(jié)構(gòu)的多肽,與人及各種動(dòng)物的Grb2有著很高的相似度,與其他吸蟲(chóng)有著更近的進(jìn)化關(guān)系;重組CsGrb2在原核系統(tǒng)中大量表達(dá)并純化,Western blot顯示天然CsGrb2與重組CsGrb2分子質(zhì)量相同,均為34ku;CsGrb2在囊蚴中的表達(dá)量高于成蟲(chóng)。免疫組化顯示CsGrb2主要分布于成蟲(chóng)的口、腹吸盤,間質(zhì)組織,受精囊中的精子及囊蚴的大多數(shù)器官。結(jié)論CsGrb2屬于保守蛋白,推測(cè)在華支睪吸蟲(chóng)的器官生成,能量代謝和精子的有絲分裂方面發(fā)揮作用。
【作者單位】: 濱州醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】: 華支睪吸蟲(chóng) 生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白 器官生成 能量代謝 精子生成
【分類號(hào)】:R383.2
【正文快照】: *華支睪吸蟲(chóng)病主要流行于我國(guó)的東南部、越南、韓國(guó)和泰國(guó)等地,嚴(yán)重威脅著人類的健康。據(jù)報(bào)道,全球有3 500萬(wàn)人遭受華支睪吸蟲(chóng)感染[1]。人和哺乳動(dòng)物是華支睪吸蟲(chóng)的終宿主,由于生食或食入未做熟的含有囊蚴的淡水魚而感染。食入后,囊蚴經(jīng)胃到達(dá)十二指腸,然后脫囊。脫囊后的幼蟲(chóng)
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1 鐘睿,
本文編號(hào):403211
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