本文關鍵詞：基于活細胞顯微技術(shù)的登革病毒膜融合實驗方法的建立及初步應用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的建立一種基于活細胞顯微技術(shù)的膜融合實驗方法,分析抗體在登革病毒(Dengue virus,DENV)包膜糖蛋白E(envelope glycoprotein)介導的細胞膜融合中的作用。方法 DENV感染C6/36蚊子細胞,48 h后酸化細胞內(nèi)涵體環(huán)境以誘導病毒與細胞發(fā)生膜融合,同時加入不同稀釋濃度的中和抗體;觀察抗體在病毒—宿主細胞膜融合中所起到的作用;借助Incell Analyzer 2000高內(nèi)涵細胞成像分析系統(tǒng)拍攝圖片并用軟件進行定量分析。結(jié)果在宿主細胞內(nèi)涵體環(huán)境酸性化(p H值6.0)后的100 min時能清晰地觀察到登革病毒與C6/36細胞發(fā)生膜融合;中和抗體4G2及9F12均能抑制膜融合(IC50分別為0.02、0.03 g·L-1),最終中和登革病毒感染。結(jié)論運用此方法,能測定登革病毒抗體的膜融合抑制能力,從而了解其中和作用機制。
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院檢驗科;
【關鍵詞】： 登革病毒 中和抗體 膜融合
【基金】：安徽省自然科學基金青年科學基金項目(No1508085QH176)
【分類號】：R373
【正文快照】： 登革病毒(DENV)是一種小型包膜病毒,主要通過受體介導的內(nèi)吞作用以及隨著病毒包膜與宿主細胞內(nèi)涵體膜的融合進入細胞內(nèi)復制[1]。作為包膜病毒進入細胞并將基因組釋放進入細胞質(zhì)所必需的步驟,病毒—細胞膜融合過程是通過一種或者多種病毒表面蛋白即融合蛋白發(fā)生構(gòu)象的變化得以

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  本文關鍵詞：基于活細胞顯微技術(shù)的登革病毒膜融合實驗方法的建立及初步應用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：402121