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C.jejuni在不同條件下的形態(tài)學(xué)變化及GBS小鼠模型的建立

發(fā)布時(shí)間:2017-05-27 18:11

  本文關(guān)鍵詞:C.jejuni在不同條件下的形態(tài)學(xué)變化及GBS小鼠模型的建立,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:第一部分空腸彎曲菌在不同培養(yǎng)條件下的形態(tài)學(xué)變化 目的:觀察空腸彎曲菌(Campylobacter jejuni,C.jejuni,Cj)在不同培養(yǎng)條件下的形態(tài)學(xué)變化。 方法:將實(shí)驗(yàn)室保存的空腸彎曲菌菌株于不同培養(yǎng)方式、不同培養(yǎng)條件下培養(yǎng),分時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行革蘭染色觀察其形態(tài)變化。 結(jié)果:1將狀態(tài)生長良好的革蘭陰性桿菌C.jejuni-Lichang菌株(哥倫比亞血平板培養(yǎng)基)放置在有氧培養(yǎng)條件下,約14小時(shí)時(shí)開始出現(xiàn)球菌,約30小時(shí)幾乎全部為球菌;放置在微需氧培養(yǎng)條件下,約24小時(shí)時(shí)開始出現(xiàn)球菌,約48小時(shí)仍可見少量桿菌; 2放入布氏肉湯培養(yǎng),在微需氧環(huán)境下培養(yǎng),在84小時(shí)后仍可見革蘭陰性桿菌; 3有氧環(huán)境下變化為革蘭陰性球菌的C.jejuni-Lichang菌株重新傳代放回最適生長的微需氧環(huán)境,其形態(tài)又可恢復(fù)為革蘭陰性桿菌。 結(jié)論:1空腸彎曲菌從微氧條件下到有氧條件下培養(yǎng),其形態(tài)可從桿狀改變?yōu)榍蛐,且與持續(xù)微需氧條件下培養(yǎng)相比其形態(tài)改變時(shí)間早; 2C.jejuni-Lichang在有氧環(huán)境下培養(yǎng)84小時(shí)后,再轉(zhuǎn)入微氧環(huán)境下時(shí),細(xì)菌仍可繼續(xù)生長; 3營養(yǎng)條件和供氧狀態(tài)是影響空腸彎曲菌形態(tài)改變的重要因素。 第二部分空腸彎曲菌致GBS小鼠模型的建立 目的:建立空腸彎曲菌(Campylobacter jejuni,Cj)感染C57bl/6小鼠的吉蘭-巴雷綜合癥(Guillain-Barre syndrome,GBS)模型,初步探討以空腸彎曲菌為感染源引起繼發(fā)免疫相關(guān)疾病的發(fā)病模式,為研究GBS的發(fā)病機(jī)制、其病理生理及空腸彎曲菌的生長特性、感染特性奠定研究模型基礎(chǔ)。 方法:1以吉蘭-巴雷綜合征(Guillain-Barre syndrome,GBS)患者分離培養(yǎng)空腸彎曲菌,經(jīng)中國疾病預(yù)防控制中心鑒定為空腸彎曲菌菌株,并經(jīng)美國疾病預(yù)防控制中心鑒定血清型為PENO19型。用哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基于42℃,5%O2、10%CO_2、85%N_2培養(yǎng)空腸彎曲菌; 2采用3種免疫抗原方式進(jìn)行造模,即MOG35-55與完全弗氏佐劑混合后腹腔注射(A組)、MOG35-55稀釋液與空腸彎曲菌菌液及完全弗氏佐劑混合后皮下多點(diǎn)注射(B組)、MOG35-55與完全弗氏佐劑及空腸彎曲菌菌液灌喂(C組); 3采用不同濃度的空腸彎曲菌及完全弗氏佐劑混合后皮下多點(diǎn)注射; 4自造模起觀察小鼠臨床癥狀,包括肢體活動、肌力、精神狀態(tài)等并進(jìn)行神經(jīng)功能評分; 5取肢體運(yùn)動障礙的小鼠取其坐骨神經(jīng)及臂叢神經(jīng)分支進(jìn)行HE染色。 結(jié)果:1不同免疫方式:A組2只小鼠在免疫后12~13天出現(xiàn)肢體癱瘓等臨床癥狀;B組2只小鼠在免疫后14-15天開始出現(xiàn)軟癱等臨床癥狀;C組免疫5天后,1只小鼠死亡,1只小鼠完全癱瘓,解剖均可見雙側(cè)頸部有血凝塊,考慮為灌胃損傷,感染致死。2只小鼠于灌胃后5-7天出現(xiàn)精神差,活動減少,13-15天出現(xiàn)肢體癱瘓等臨床癥狀;對照組小鼠則狀態(tài)良好,,未見明顯異常。 2不同濃度:高濃度組在免疫后的11-14天,6只小鼠均出現(xiàn)肢體癱瘓等臨床癥狀;中濃度組免疫后14-17天4只小鼠陸續(xù)出現(xiàn)肢體癱瘓臨床癥狀;低濃度組免疫后16天1只小鼠出現(xiàn)肢體癱瘓臨床癥狀;佐劑組6只小鼠均未見肢體無力癱瘓等癥狀。 3神經(jīng)病理學(xué)檢查結(jié)果顯示軸索萎縮,未見明顯神經(jīng)脫髓鞘改變。初步診斷為急性軸索性神經(jīng)病。 結(jié)論:1空腸彎曲菌感染小鼠后可致急性周圍神經(jīng)。 2C57BL/6小鼠可作為吉蘭巴雷綜合征的模型動物。
【關(guān)鍵詞】:空腸彎曲菌 形態(tài)學(xué) 空腸彎曲菌 吉蘭巴雷綜合征 C57bl/6小鼠 動物模型
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R-332;R745.43
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • ABSTRACT6-9
  • 引言9-10
  • 第一部分 空腸彎曲菌不同培養(yǎng)條件下形態(tài)學(xué)變化10-24
  • 前言10
  • 材料與方法10-14
  • 結(jié)果14-16
  • 附圖16-21
  • 討論21-22
  • 小結(jié)22-23
  • 參考文獻(xiàn)23-24
  • 第二部分 空腸彎曲菌致 GBS 小鼠模型的建立24-43
  • 前言24
  • 材料與方法24-31
  • 結(jié)果31-33
  • 附圖33-37
  • 討論37-40
  • 小結(jié)40
  • 參考文獻(xiàn)40-43
  • 結(jié)論43-44
  • 綜述 吉蘭巴雷綜合癥的現(xiàn)代病因理論研究進(jìn)展44-53
  • 參考文獻(xiàn)50-53
  • 致謝53-54
  • 個(gè)人簡歷54

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 李春巖;急性運(yùn)動性軸索型格林—巴利綜合征[J];腦與神經(jīng)疾病雜志;1998年03期

2 彭聿平,邱一華,程純,戴麗,黃慧偉;不同種系動物誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎模型的研究[J];南通醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2000年01期

3 姜海;李春巖;顧一心;劉瑞春;張茂俊;張建中;;吉蘭-巴雷綜合征相關(guān)空腸彎曲菌脂寡糖基因簇序列分析[J];腦與神經(jīng)疾病雜志;2007年02期

4 鄭桂麗,廖紹安,翟俊輝,紀(jì)偉尚,楊瑞馥;環(huán)境中“活的非可培養(yǎng)(VBNC)”細(xì)菌的研究進(jìn)展[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;2004年04期

5 李春巖;田文強(qiáng);劉瑞春;王桂榮;薛平;楊程;;PEN019空腸彎曲菌的脂多糖致軸索型格林-巴利綜合征動物模型研究[J];中華物理醫(yī)學(xué)雜志;1997年01期


  本文關(guān)鍵詞:C.jejuni在不同條件下的形態(tài)學(xué)變化及GBS小鼠模型的建立,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:400794

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