本文關(guān)鍵詞：二甲雙胍對Ⅱ型膠原誘導(dǎo)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠模型的抗炎及關(guān)節(jié)保護(hù)作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景和目的 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(Rheumatoidrthritis，RA)是一種以累及周圍關(guān)節(jié)為主的，系統(tǒng)性、炎癥性、自身免疫性疾病。致殘率高，是造成我國人群喪失勞動力和致殘的主要疾病之一。其病理特點為累及周身關(guān)節(jié)的增生性和侵蝕性滑膜炎，呈進(jìn)行性病變，終生反復(fù)，最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)侵蝕畸形、功能喪失。盡管RA的病因及發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，但研究證實：RA滑膜組織中浸潤的單核-巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等能夠產(chǎn)生大量的細(xì)胞因子，這些細(xì)胞因子通過作用于多種細(xì)胞并相互調(diào)節(jié)，形成一個復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)，最終導(dǎo)致了類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)生和發(fā)展。實驗證實，TNF-α是在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制中居于中心地位的炎癥因子，它不僅能夠通過NF-κB、JAK/STAT等通路介導(dǎo)RA的炎癥及關(guān)節(jié)破壞反應(yīng)，還可促使滑膜細(xì)胞、纖維母細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等以自分泌或旁分泌的形式產(chǎn)生多種炎癥因子，例如IL-1β、IL-6等，共同作用于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的炎癥及關(guān)節(jié)破壞反應(yīng)。所以以TNF-α為靶點的TNF-α拮抗劑-依那西普(etanercept)、阿達(dá)木單抗（adalilmumab）等為代表的生物制劑的出現(xiàn)，被認(rèn)為是RA治療的革命性變化。但是生物制劑昂貴且生物安全性尚有待實驗繼續(xù)證實，所以未被廣泛應(yīng)用。而且目前標(biāo)準(zhǔn)RA用藥包括非甾體類抗炎藥（non-steroidalanti-inflammatorydrugs，NSAID）、激素、改善RA病情藥物(disease-modifyingantirheumaticdrugs，DMARDs)并不能夠改善患者遠(yuǎn)期癥狀并且有較強(qiáng)的毒副作用。所以，尋找新的改善RA病情藥物仍然是臨床面臨的挑戰(zhàn)性問題。近年來研究表明，二甲雙胍不僅可以發(fā)揮全身性的抗炎作用，降低炎癥因子水平，升高抗炎因子水平；還能夠減弱炎癥因子介導(dǎo)的軟骨分解作用，維持體內(nèi)軟骨穩(wěn)態(tài)，保護(hù)軟骨；還可以調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞的細(xì)胞因子的產(chǎn)生來抑制破骨細(xì)胞的生成，減少破骨細(xì)胞的分化，保護(hù)骨質(zhì)；最終起到關(guān)節(jié)保護(hù)的作用。本研究擬在Ⅱ型膠原誘導(dǎo)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠模型上證實二甲雙胍對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠模型具有抗炎和關(guān)節(jié)保護(hù)的作用。 目的 1.研究二甲雙胍對Ⅱ型膠原誘導(dǎo)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠模型的抗炎作用； 2.研究二甲雙胍對Ⅱ型膠原誘導(dǎo)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠模型的關(guān)節(jié)保護(hù)作用。 方法 1.于4℃下，將Ⅱ型膠原溶于0.01mol/L醋酸中，制成最終濃度為2mg/ml的混合液，靜置過夜，待其完全溶解； 2.冰浴下，用高速勻漿機(jī)將混合液與完全弗氏佐劑以1:1相配比制成乳劑； 3.在大鼠尾部、肛周處皮膚多點皮內(nèi)注射0.3ml乳劑，，實驗第7日重復(fù)操作，加強(qiáng)誘導(dǎo)一次； 4.造模成功后，于實驗第7日隨機(jī)分組，給予各用藥組高劑量二甲雙胍(100mg/kg/d)，低劑量二甲雙胍(50mg/kg/d)，甲氨蝶呤(2.7mg/kg/w)灌胃干預(yù)治療； 5.每隔2日對各組大鼠進(jìn)行關(guān)節(jié)炎評分及距骨寬度測量，于第28日處死取材，再進(jìn)行大鼠踝關(guān)節(jié)X片，MICRO-CT三維數(shù)據(jù)重建，HE染色，大鼠血清中炎癥因子水平及抗炎因子水平等檢測。 結(jié)果 1.連續(xù)觀察大鼠后足關(guān)節(jié)炎評分及距骨寬度測量示：高劑量二甲雙胍組關(guān)節(jié)炎評分及距骨寬度較誘導(dǎo)組顯著降低（P0.05），其余兩用藥組較誘導(dǎo)組也有一定降低關(guān)節(jié)炎評分及距骨寬度的作用（P0.05）； 2.Elisa結(jié)果示：誘導(dǎo)組大鼠血清中炎癥因子TNF-α，IL-1β，IL-6水平顯著升高，抗炎因子IL-10水平顯著降低；高劑量二甲雙胍治療組可顯著降低大鼠血清中炎癥因子TNF-α，IL-1β，IL-6水平（P0.05），升高抗炎因子IL-10水平（P0.05）；低劑量組及甲氨蝶呤治療組大鼠血清中炎癥因子TNF-α，IL-1β，IL-6水平較誘導(dǎo)組有所降低（P0.05），抗炎因子IL-10水平也有升高（P0.05）。 3.X片示：誘導(dǎo)組出現(xiàn)嚴(yán)重的軟組織腫脹和骨質(zhì)吸收，關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)破壞，嚴(yán)重?fù)p毀；高劑量二甲雙胍組可顯著保留關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)并使其免受侵蝕，而低二甲雙胍劑量組和甲氨蝶呤治療組效果比高劑量二甲雙胍組弱； 4.MICRO-CT結(jié)果示：誘導(dǎo)組出現(xiàn)嚴(yán)重的骨質(zhì)吸收、溶解現(xiàn)象，骨質(zhì)表面十分毛糙，并出現(xiàn)空洞，關(guān)節(jié)完全損毀；高劑量二甲雙胍治療組：未出現(xiàn)嚴(yán)重的骨質(zhì)吸收、溶解現(xiàn)象，骨質(zhì)表面有些毛糙、未出現(xiàn)空洞，關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)保存完整；甲氨蝶呤治療組及低劑量二甲雙胍治療組：同樣出現(xiàn)出現(xiàn)嚴(yán)重的骨質(zhì)吸收、溶解現(xiàn)象，骨質(zhì)表面十分毛糙，同時大量出現(xiàn)骨質(zhì)空洞，關(guān)節(jié)完全損毀，程度均較B組結(jié)果有所降低。 5.HE染色結(jié)果示：誘導(dǎo)組HE染色結(jié)果示：出現(xiàn)云片狀炎癥細(xì)胞，深染藍(lán)色，炎癥細(xì)胞嚴(yán)重侵蝕骨質(zhì)，關(guān)節(jié)間隙消失，完全被炎癥細(xì)胞填充；甲氨蝶呤治療組及低劑量二甲雙胍治療組兩組HE結(jié)果：出現(xiàn)大量炎癥細(xì)胞，分布于關(guān)節(jié)間隙和軟骨及骨質(zhì)中，關(guān)節(jié)間隙分辨不清，炎癥細(xì)胞同樣嚴(yán)重侵蝕骨質(zhì)，關(guān)節(jié)間隙幾乎消失，被大量炎癥細(xì)胞充斥；高劑量二甲雙胍治療組HE結(jié)果出現(xiàn)少量炎癥細(xì)胞，，呈零星分布于關(guān)節(jié)間隙，關(guān)節(jié)間隙正常、清晰，炎癥細(xì)胞未嚴(yán)重侵蝕骨質(zhì)，粉紅色軟骨、深紅色骨質(zhì)均清晰可見，很少破壞。 結(jié)論 1.二甲雙胍對Ⅱ型膠原誘導(dǎo)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠模型具有劑量依賴性的抗炎作用。 2.二甲雙胍對Ⅱ型膠原誘導(dǎo)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠模型具有劑量依賴性的關(guān)節(jié)保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：二甲雙胍 Ⅱ型膠原 SD大鼠 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎 炎癥 關(guān)節(jié)保護(hù)
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R593.22;R-332
【目錄】：

• 縮略語表5-6
• 中文摘要6-9
• Abstract9-13
• 前言13-14
• 文獻(xiàn)回顧14-26
• 1 實驗材料26-28
• 1.1 實驗動物26-27
• 1.2 主要實驗試劑和設(shè)備27-28
• 2 實驗方法28-29
• 2.1 大鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎誘導(dǎo)乳劑的制備28
• 2.2 實驗分組及藥物治療方案28
• 2.3 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠模型的制備28-29
• 3 觀測指標(biāo)29-31
• 3.1 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠后足、踝關(guān)節(jié)大體觀察29
• 3.2 大鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎評分測定29
• 3.3 大鼠距骨寬度測量29
• 3.4 ELISA法檢測大鼠血清中炎癥因子及抗炎因子含量29-30
• 3.5 大鼠后足踝關(guān)節(jié)X線片檢查30
• 3.6 MICRO-CT重建30
• 3.7 HE染色30-31
• 3.8 統(tǒng)計學(xué)方法31
• 4 結(jié)果31-38
• 4.1 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠后足、踝關(guān)節(jié)大體觀察結(jié)果31-32
• 4.2 大鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎評分測定結(jié)果32-33
• 4.3 距骨寬度測量結(jié)果33-34
• 4.4 ELISA法檢測大鼠血清中炎癥因子及抗炎因子含量結(jié)果34-35
• 4.5 大鼠后足踝關(guān)節(jié)X線片檢查結(jié)果35
• 4.6 MICRO-CT重建結(jié)果35-36
• 4.7 HE染色結(jié)果36-38
• 5 討論38-47
• 小結(jié)47-48
• 參考文獻(xiàn)48-59
• 個人簡歷和研究成果59-60
• 致謝60

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 郭力嘉;常新;;巨噬細(xì)胞集落刺激因子對破骨細(xì)胞生物作用的研究進(jìn)展[J];大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2009年02期

2 張愛君;朱岱;;氟對骨細(xì)胞凋亡的影響[J];中國地方病防治雜志;2009年01期

3 范慧潔;戴如春;廖二元;;OPG/RANK/RANKL系統(tǒng)與骨折和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎[J];國際內(nèi)分泌代謝雜志;2006年04期

4 王燕,尚可,李玉坤,陶夏莉;骨疏康對1型糖尿病大鼠體外培養(yǎng)的破骨細(xì)胞影響的初步探討[J];中國骨腫瘤骨病;2004年02期

5 王燕,支忠繼,李玉坤;RANKL,M-CSF和破骨細(xì)胞體外培養(yǎng)[J];中國骨腫瘤骨病;2004年02期

6 Bo Gao;Liwei Zheng;;microRNA Expression in Rat Apical Periodontitis Bone Lesion[J];Bone Research;2013年02期

7 張志岐;束剛;江青艷;;下丘腦對脂類的營養(yǎng)感應(yīng)及其參與食欲調(diào)控的機(jī)制[J];動物營養(yǎng)學(xué)報;2013年07期

8 李鳳翱;湯紹芳;朱梅;;炎性反應(yīng)與骨骼健康[J];中華骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病雜志;2013年03期

9 閆演飛;康菲;楊波;苗瑩;董世武;;miR-144過表達(dá)慢病毒對關(guān)節(jié)炎模型小鼠滑膜組織病理進(jìn)程的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2014年10期

10 孫曉萱;周惠瓊;;類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎骨吸收指標(biāo)與關(guān)節(jié)破壞的相關(guān)性[J];中華骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病雜志;2014年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 顧建紅;王世濤;劉學(xué)忠;卞建春;袁燕;熊桂林;劉宗平;;1α,25-(OH)2D3通過成骨細(xì)胞M-CSF途徑影響破骨細(xì)胞增殖與分化[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜內(nèi)科學(xué)分會第七屆代表大會暨學(xué)術(shù)研討會論文集（上冊）[C];2011年

2 顧建紅;趙鴻雁;劉學(xué)忠;卞建春;袁燕;熊桂林;劉宗平;;1α,25-(OH)_2D_3通過成骨細(xì)胞M-CS途徑影響破骨細(xì)胞增殖與分化[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會——第三屆中國獸醫(yī)臨床大會論文集[C];2012年

3 梁清華;肖玉美;熊新貴;徐則林;;痹腫消湯及拆方對膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜組織中P38與JNK通路影響[A];第十一次中國中西醫(yī)結(jié)合實驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2013年

4 關(guān)向東;;2型糖尿病和非酒精性脂肪性肝病[A];第二屆廣東省脂肪肝專題研討會論文匯編[C];2011年

5 門建濤;馬毅;高宇;韓劍鋒;;四肢長管狀骨骨折患者脂聯(lián)素及臟器功能生化指標(biāo)的檢測及意義[A];中國醫(yī)藥教育論壇-中國醫(yī)藥教育協(xié)會第三屆三次理事大會暨學(xué)術(shù)年會論文專輯[C];2013年

6 紀(jì)桂元;Yupei Zhang;Qinhe Yang;Shaobin Cheng;Jing Hao;Xihong Zhao;Zhuoqin Jiang;;Genistein Suppresses LPS-Induced Inflammatory Response through Inhibiting NF-κB following AMP Kinase Activation in RAW 264.7 Macrophages[A];廣東省預(yù)防醫(yī)學(xué)會優(yōu)秀論文集[C];2014年

7 高宗勤;李琴;范迎賽;劉鐘杰;;耐斯糖對MC3T3細(xì)胞OPG/RANKL mRNA表達(dá)的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會中獸醫(yī)學(xué)分會第八次全國代表大會暨2014年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2014年

8 馬賢驥;蘭友玲;李天發(fā);;Ox-LDL對大鼠血管平滑肌細(xì)胞OPG及RANKL表達(dá)的影響[A];第六屆海南省生命科學(xué)聯(lián)合學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2014年

9 李鑫;王寶新;谷捷;王莘智;彭璐;王建國;黃惠勇;蔡雄;范伏元;;湖南地區(qū)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎主要中醫(yī)證型分布規(guī)律研究[A];第九次全國中西醫(yī)結(jié)合診斷學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2015年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王昱翔;逆轉(zhuǎn)錄病毒載體介導(dǎo)RNAi沉默ERβ對人成骨樣MG63細(xì)胞OPG和RANKL表達(dá)的影響[D];中南大學(xué);2011年

2 胡容;破骨細(xì)胞分化過程中microRNA表達(dá)譜及miR-148a的功能機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2011年

3 侯樂樂;雞骨保護(hù)素真核質(zhì)粒pcDNA3.1（+）-chOPG的構(gòu)建及其在蛋雞體內(nèi)、外表達(dá)及功能的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

4 王艷;雞核因子-κB受體激活物配基（chRANKL）基因的克隆、表達(dá)及生物學(xué)活性研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

5 宋宏杰;流體剪切應(yīng)力對大鼠成骨細(xì)胞整合素β1、αv及骨保護(hù)素（OPG）骨保護(hù)素配體（OPGL）的影響[D];四川大學(xué);2005年

6 汪昌寧;家族性巨頜癥家系收集與分子致病機(jī)理的研究[D];武漢大學(xué);2005年

7 李戈;造血調(diào)節(jié)因子M-CSF和EDAG的克隆及性質(zhì)研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2003年

8 韓大慶;破骨細(xì)胞完善體外類骨組織重建的探索性研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

9 馬麗輝;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎機(jī)制和相關(guān)研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2008年

10 張進(jìn);花錨的化學(xué)成分與生物活性研究[D];沈陽藥科大學(xué);2009年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張睿;M-CSF RANKL 1,25-（OH）_2D_3對破骨細(xì)胞形成分化影響的比較研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年

2 王信;誘導(dǎo)小鼠破骨前體細(xì)胞成熟分化的實驗條件探討[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

3 廖通權(quán);CD147/EMMPRIN對體外破骨細(xì)胞分化成熟及活化影響的實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2011年

4 尚臨娟;乳牙牙周膜干細(xì)胞在乳牙生理性根吸收中的作用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

5 張超一;NF-κB基因沉默對小鼠破骨樣細(xì)胞分化形成的影響[D];中國醫(yī)科大學(xué);2005年

6 徐立群;益骨膠囊含藥血清對共育體系中破骨細(xì)胞活性和凋亡的影響[D];暨南大學(xué);2005年

7 葉純;淫羊藿防治去勢大鼠骨質(zhì)疏松療效及影響椎骨微環(huán)境中TNF-α、TGF-β_1表達(dá)的研究[D];四川大學(xué);2004年

8 晁愛軍;人外周血單個核細(xì)胞體外誘導(dǎo)成為破骨細(xì)胞樣細(xì)胞及鑒定[D];天津醫(yī)科大學(xué);2006年

9 靳趁心;骨保護(hù)素與去卵巢實驗性牙周炎大鼠模型的實驗研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2006年

10 穆金萍;不同鈣營養(yǎng)狀態(tài)下骨保護(hù)蛋白配體與慢性氟中毒大鼠骨質(zhì)改變關(guān)系的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2006年

  本文關(guān)鍵詞：二甲雙胍對Ⅱ型膠原誘導(dǎo)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠模型的抗炎及關(guān)節(jié)保護(hù)作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：398430