誘導臍血造血干/祖細胞分化為紅系祖細胞及其規(guī)模化擴增
發(fā)布時間:2024-05-21 00:53
目前血液來源緊張及輸血相關傳染病的發(fā)生使得臨床輸血治療面臨巨大的挑戰(zhàn),尋找更為安全、充足的血液來源一直以來都是輸血醫(yī)學研究的重要方向。干細胞技術(shù)的不斷發(fā)展使得我們有可能在體外將干細胞定向誘導分化為紅細胞作為血液替代來源,然而目前的技術(shù)條件下生產(chǎn)制備干細胞來源的成熟紅細胞產(chǎn)品面臨很多困難,而干細胞來源的紅系祖細胞同樣可以作為非應急性(或擇期)輸血的血液替代產(chǎn)品。本研究擬利用臍帶血造血干/祖細胞作為起始細胞,體外誘導其向紅系祖細胞分化,并添加小分子化合物對誘導擴增體系進行優(yōu)化,初步探討利用生物反應器規(guī)模化制備臍帶血來源的紅系祖細胞的技術(shù)方法。本課題研究首先建立了無血清體系中高效誘導臍帶血造血干/祖細胞向紅系祖細胞分化的技術(shù)方法,誘導效率超過90%,對獲得的紅系祖細胞進行了多方而的鑒定,并對誘導的紅系祖細胞的不同分化階段進行了動力學分析。為了進一步優(yōu)化誘導擴增體系,實現(xiàn)規(guī);瘮U增臍帶血造血干/祖細胞來源的紅系祖細胞,本研究嘗試在誘導擴增體系中添加一種小分子化合物“二甲基乙二酰基甘氨酸”(Dimethyloxalylglycine, DMOG),在體外模擬低氧微環(huán)境,提高紅系祖細胞誘導擴增效率...
【文章頁數(shù)】:85 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
符號說明
1 前言
2 紅系祖細胞誘導擴增體系的建立
2.1 紅系祖細胞誘導擴增體系的建立與驗證
2.1.1 材料與方法
2.1.2 實驗結(jié)果
2.2 誘導擴增后紅系祖細胞的表型與功能鑒定
2.2.1 材料與方法
2.2.2 實驗結(jié)果
2.3 討論
2.4 小結(jié)
3 紅系祖細胞誘導擴增體系的優(yōu)化
3.1 添加小分子優(yōu)化紅系誘導擴增體系
3.1.1 材料與方法
3.1.2 實驗結(jié)果
3.2 Fed-batch的二維模擬優(yōu)化培養(yǎng)模式
3.2.1 材料與方法
3.2.2 實驗結(jié)果
3.3 討論
3.4 小結(jié)
4 紅系祖細胞的規(guī);瘮U增
4.1 利用WAVE生物反應器擴增紅系祖細胞
4.1.1 材料與方法
4.1.2 實驗結(jié)果
4.2 紅系祖細胞的體內(nèi)存活及安全性檢測
4.2.1 材料與辦法
4.2.2 實驗結(jié)果
4.3 討論
4.4 小結(jié)
5 結(jié)論
參考文獻
綜述
參考文獻
攻讀學位期間的主要研究成果目錄
致謝
本文編號:3979369
【文章頁數(shù)】:85 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
符號說明
1 前言
2 紅系祖細胞誘導擴增體系的建立
2.1 紅系祖細胞誘導擴增體系的建立與驗證
2.1.1 材料與方法
2.1.2 實驗結(jié)果
2.2 誘導擴增后紅系祖細胞的表型與功能鑒定
2.2.1 材料與方法
2.2.2 實驗結(jié)果
2.3 討論
2.4 小結(jié)
3 紅系祖細胞誘導擴增體系的優(yōu)化
3.1 添加小分子優(yōu)化紅系誘導擴增體系
3.1.1 材料與方法
3.1.2 實驗結(jié)果
3.2 Fed-batch的二維模擬優(yōu)化培養(yǎng)模式
3.2.1 材料與方法
3.2.2 實驗結(jié)果
3.3 討論
3.4 小結(jié)
4 紅系祖細胞的規(guī);瘮U增
4.1 利用WAVE生物反應器擴增紅系祖細胞
4.1.1 材料與方法
4.1.2 實驗結(jié)果
4.2 紅系祖細胞的體內(nèi)存活及安全性檢測
4.2.1 材料與辦法
4.2.2 實驗結(jié)果
4.3 討論
4.4 小結(jié)
5 結(jié)論
參考文獻
綜述
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