生物標(biāo)志物是指與生理或者病理生理過(guò)程相聯(lián)系的可監(jiān)測(cè)的變化,更好的尋找標(biāo)志物對(duì)疾病的預(yù)防、診斷、治療具有重要的意義。作為尋找疾病標(biāo)志物的“金礦”,尿液是研究疾病標(biāo)志物的理想來(lái)源。與最常用于檢測(cè)標(biāo)志物的血液來(lái)源相比,它可以無(wú)創(chuàng)、大量的獲取,并且由于不受穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié),可以容納并積累更多、更大的變化。尿液的一部分組成成分來(lái)源于血液濾過(guò)物,因此它不僅可作為研究泌尿系統(tǒng)生物標(biāo)志物的理想來(lái)源,也在一定程度上可以反映血液或者整個(gè)機(jī)體的狀態(tài)。本論文第二章節(jié)我們先探討了尿液作為標(biāo)志物來(lái)源的優(yōu)勢(shì),即在相同的條件下,尿液中可以找到更多的變化信息。通過(guò)抗凝劑肝素或阿加曲班改變雌性SD大鼠的凝血狀態(tài),用蛋白質(zhì)組學(xué)的方式檢測(cè)給藥前后血液和尿液中蛋白的改變。在同樣的鑒定策略及分析條件下,尿液中發(fā)現(xiàn)更多的變化蛋白。在阿加曲班干預(yù)組中,檢測(cè)到尿液中變化的蛋白有62個(gè),血液中變化的蛋白僅有1個(gè)。在肝素干預(yù)組中,尿液中變化的蛋白有27個(gè),血液中變化的蛋白僅有3個(gè)。Western blot顯示轉(zhuǎn)鐵蛋白(transferrin)和血紅素結(jié)合蛋白(hemopexin)在血液和尿液中的變化趨勢(shì)與質(zhì)譜結(jié)果一致。本實(shí)驗(yàn)提示尿液是更敏感的蛋...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖2.1靜脈注射肝素和阿加曲班對(duì)CT及APTT的影響

博士學(xué)位論文加曲班是一種新型凝血酶抑制劑，能直接與凝血酶的活化位點(diǎn)結(jié)合而抑而抑制血纖維蛋白的形成，還可以通過(guò)抑制凝血因子V、蛋白酶C的板聚集發(fā)揮其抗凝血作用[7-10]。用兩種不同的抗凝劑來(lái)觀察血液、尿液中的蛋白變化，分析不同的抗凝白變化是否有相同之處，同時(shí)可以排除抗凝劑直接作用....

圖2.2給予抗凝劑前后的尿液蛋白的SDS-PAGE膠分析

如圖2.2所示，給予抗凝劑前后，有些動(dòng)物的尿液蛋白會(huì)有一些改變，如樣本1和2的70kD部分；樣本3和4的40?50kD部分；樣本9和10的70?100kD部分。但這些變化在其它動(dòng)物的尿液樣本中并未出現(xiàn)，很可能是由于動(dòng)物的個(gè)體差異或者樣本處理所引入的差異。對(duì)于同一干預(yù)組的所有動(dòng)....

圖2.3尿液中變化蛋白的IPA分析

尿液是疾病標(biāo)志物研究的理想來(lái)源白Alpha-1-antiproteinase是血中最多的絲氨酸蛋白酶抑制劑[19]，并且是actorXia的主要抑制劑[20]。給予抗凝劑后，尿中Alpha1Antitrypsin的有可能機(jī)體通過(guò)增加此蛋白的排出，減少血中的含量，從而來(lái)減緩機(jī)....

圖2.4變化蛋白的westernblot驗(yàn)證注：用westernblot驗(yàn)證尿液和血液中的蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白和血紅素結(jié)合蛋白

顯示蛋白的變化趨勢(shì)與質(zhì)譜結(jié)果相一致。如圖2.4所示，其中A為肝素干預(yù)組，B為阿加曲班干預(yù)組。C表示抗凝劑干預(yù)前，T表示抗凝劑干預(yù)后。質(zhì)譜鑒定的變化蛋白在尿液中得到驗(yàn)證，而血液中相應(yīng)蛋白并無(wú)明顯改變，Westernblot結(jié)果與質(zhì)譜結(jié)果完全一致。說(shuō)明我們的鑒定結(jié)果和分析策略是真實(shí)....

本文編號(hào)：3974876