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日本血吸蟲蛋白磷酸酶PP2C-1的原核表達及活性分析

發(fā)布時間:2017-05-26 15:02

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【摘要】:目的構(gòu)建日本血吸蟲PP2C-1蛋白磷酸酶表達載體,并進行體外表達和酶活性分析。方法從日本血吸蟲基因組數(shù)據(jù)庫中找到一個可能編碼PP2C-1蛋白磷酸酶的基因Sj-PP2C-1,設(shè)計引物并通過PCR技術(shù)擴增得到該基因,將其成熟編碼區(qū)與pET28a表達載體連接后轉(zhuǎn)化大腸埃希菌并用IPTG誘導表達,對表達產(chǎn)物的磷酸酶活性進行分析。結(jié)果成功構(gòu)建了Sj-PP2C-1蛋白磷酸酶表達載體,其編碼區(qū)能夠在大腸埃希菌中表達分子質(zhì)量單位為40ku的目的蛋白;采用V2460系統(tǒng)進行檢測,Sj-PP2C-1具有PP2C磷酸酶活性。結(jié)論 Sj-PP2C-1基因原核表達產(chǎn)物具有蛋白磷酸酶活性,為研究PP2C類蛋白磷酸酶的功能打下了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 南通大學醫(yī)學院病原生物學系;
【關(guān)鍵詞】血吸蟲 日本 PPC蛋白磷酸酶 克隆 表達 活性分析
【基金】:國家自然科學基金項目(No.31100112) 江蘇高校優(yōu)勢學科建設(shè)工程資助項目(No.PAPD) 南通大學大學生創(chuàng)新訓練計劃項目(No.201410304049Z)
【分類號】:R383.24
【正文快照】: ***在真核生物中,蛋白質(zhì)的可逆磷酸化是真核細胞的關(guān)鍵調(diào)控機制,蛋白激酶和蛋白磷酸酶分別負責調(diào)控其底物的磷酸化狀態(tài),從而實現(xiàn)胞內(nèi)信號途徑的轉(zhuǎn)導[1]。蛋白磷酸酶廣泛存在于微生物、植物和哺乳動物之中,涉及到細胞生長、增殖、分化、凋亡、形態(tài)建成、細胞周期和分解代謝等許

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 杜國光;蛋白激酶與蛋白磷酸酶[J];海南醫(yī)學院學報;1997年01期

2 姚利曉,林矯矯,蔡幼民;寄生蟲的絲/蘇氨酸蛋白磷酸酶[J];國外醫(yī)學(寄生蟲病分冊);2004年06期

3 石繼祥,施杞;蛋白磷酸酶及其抑制劑研究近況[J];國外醫(yī)學.臨床生物化學與檢驗學分冊;2005年05期

4 夏若寒,劉聲遠,王建枝;抑制蛋白磷酸酶對嗜鉻細胞瘤細胞一氧化氮合酶活性的影響[J];中國組織化學與細胞化學雜志;2001年01期

5 楊艷蕊;王韻;;DARPP-32:神經(jīng)信息傳遞的整合器[J];生理科學進展;2006年02期

6 梁婧;徐立紅;;蛋白磷酸酶2A對微管的調(diào)控作用研究進展[J];中國細胞生物學學報;2011年06期

7 吳偉強;殷s,

本文編號:397169


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