已知機體95％以上的感染發(fā)生在粘膜或由粘膜入侵，尤其是呼吸道和消化道粘膜，直接面對外界環(huán)境，時時刻刻接觸大量繁雜的抗原，包括病原體。因此，粘膜是病原體感染和疫苗免疫最重要也是最常見的途徑。和系統(tǒng)免疫相比，粘膜具有其獨特的性質(zhì)，隨著人們對粘膜特性的認識的深入，粘膜疫苗和粘膜免疫成為感染免疫學(xué)和預(yù)防醫(yī)學(xué)的研究熱點和前沿，研究粘膜疫苗免疫反應(yīng)規(guī)律和保護機制，是粘膜疫苗研制、改進及制定免疫實施方案的重要理論基礎(chǔ)。通過應(yīng)用粘膜疫苗載體和粘膜免疫可以解決基因疫苗和基因治療中的一些尚難以解決的問題，近年來倍受基因疫苗和基因治療研究者的青睞。因此，粘膜疫苗的免疫保護機制及作為外源DNA的攜帶載體的研究具有重要的理論意義和實際意義。本文就我室構(gòu)建的兩類不同侵襲表型的雙價痢疾菌苗，研究不同動物模型、不同粘膜途徑的免疫反應(yīng)和保護機制，并就其作為基因治療載體的可能性進行了初步研究。 FSM-2117和FS-5416(FS-5402，5411，5414)是我室構(gòu)建的兩類具有不同侵襲表型的福氏、宋內(nèi)氏雙價痢菌苗株，它們共同的特點是都穩(wěn)定表達了福氏及宋內(nèi)氏雙價LPS-O抗原，不同之處是前者不表達侵襲蛋白抗原...

【文章頁數(shù)】：113 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖4:IPa一和IPa+雙價痢疾基因工程菌苗不同粘膜免疫后局部特異性抗體的變化

2.6四株侵襲性雙價痢疾菌苗眼粘膜免疫豚鼠后淚液中抗體反應(yīng)四株侵襲性雙價痢疾菌苗和一株非侵襲性雙價痢疾菌苗8xl護一lxl護滴眼免疫后，隔日一次，共7次。末次免疫后第七天取淚液測定雙價特異性抗體。由圖4可見，免疫后兩類雙價痢疾菌苗組淚液中福氏、宋內(nèi)雙價特異性IgA、IgG都較對照....

圖17重組克隆載體的鑒定

論文第二部分雙價痢疾菌苗作為DNA治療載體的初步研究(2)雙酶切鑒定:由于外源片段是通過雙酶切后連入載體的，故用這兩個酶切割重組質(zhì)粒時可獲得TRAIL或STRAIL和載體兩個片段。如圖17A、B、C所示，酶切實驗進一步證明三個重組質(zhì)粒中分別含有T隊IL846bP、843bp、50....

圖20原核表達載體pGEx一KG一TRAIL的鑒定F1920IdentifieationofexPressionPlasmidPGEX一K

論文第二部分雙價痢疾菌苗作為DNA治療載體的初步研究獲得原核表達載體，菌落PCR和雙酶切鑒定陽性克隆(圖20)。P3，Hilldlll.，，，solbp片身嗽~-、一、、一丫zP4T4liZaseBamHI瓏ndlll/托ndln/產(chǎn)\、訓(xùn)/圖19:重組質(zhì)粒pGEM一T-sTRA....

本文編號：3955607