目的評(píng)價(jià)SRPX2蛋白對(duì)人單核細(xì)胞系THP-1來(lái)源巨噬細(xì)胞遷移及極化功能的影響。方法經(jīng)佛波酯(PMA)誘導(dǎo)人單核細(xì)胞系THP-1為巨噬細(xì)胞后,將SRPX2重組蛋白作用于巨噬細(xì)胞,Transwell法檢測(cè)細(xì)胞遷移,免疫熒光法檢測(cè)SRPX2與uPAR的定位,Western blot檢測(cè)相應(yīng)信號(hào)通路蛋白的表達(dá)。再用IFN-γ及LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞的M1極化,SRPX2重組蛋白作用后,反轉(zhuǎn)錄PCR檢測(cè)M1/M2標(biāo)志物表達(dá)。結(jié)果 SRPX2明顯促進(jìn)人單核細(xì)胞系THP-1來(lái)源巨噬細(xì)胞的遷移(P<0.01),加入uPAR中和抗體后,明顯抑制遷移(P<0.01)。在誘導(dǎo)M1極化的巨噬細(xì)胞中,經(jīng)SRPX2重組蛋白作用后,M1標(biāo)志物CD40和IL-6明顯下降,而M2標(biāo)志物CD206和IL-6明顯上升(P<0.01)。SRPX2與uPAR及CD11b的表達(dá)存在共定位。SRPX2重組蛋白作用后巨噬細(xì)胞FAK及Akt磷酸化水平增高。結(jié)論 SRPX2可能通過(guò)uPAR/CD11b/FAK/Akt通路促進(jìn)人單核細(xì)胞THP-1來(lái)源巨噬細(xì)胞的遷移與M2極化。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 細(xì)胞:
        1.1.2 試劑及試劑盒:
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)遷移:
        1.2.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)檢測(cè):
        1.2.3 Western blot檢測(cè)蛋白表達(dá):
        1.2.4 免疫熒光雙染色共定位實(shí)驗(yàn):
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 SRPX2重組蛋白促進(jìn)巨噬細(xì)胞遷移
    2.2 SRPX2重組蛋白促進(jìn)THP-1來(lái)源巨噬細(xì)胞M2極化
    2.3 SRPX2、uPAR與CD11b在THP-1來(lái)源巨噬細(xì)胞中的表達(dá)定位
    2.4 SRPX2促進(jìn)THP-1來(lái)源巨噬細(xì)胞中FAK及Akt的磷酸化
3 討論



本文編號(hào)：3942332