在膿毒癥的早期,絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)通路分別被直接和間接的激活。MAPK通路是真核細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞外信號(hào)到細(xì)胞內(nèi)反應(yīng)的重要信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng);Janus激酶/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子(JAK/STAT)通路是膿毒癥中重要的信號(hào)通路之一,參與多種重要炎癥因子的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及調(diào)控。在機(jī)體的膿毒性反應(yīng)中內(nèi)毒素(脂多糖,LPS)起觸發(fā)劑的作用,它激活MAPK通路后,腫瘤壞死因子(TNF)-α、白介素1β(IL-1β)等多種炎性細(xì)胞因子大量生成,其具體機(jī)制已基本清楚。其中TNF-α作為一種重要的早期炎癥介質(zhì),又間接激活JAK/STAT途徑,STATs活化后直接進(jìn)入核內(nèi)參與LPS誘導(dǎo)的基因表達(dá)。在這一病理過(guò)程中,STAT3被激活,晚期炎癥介質(zhì)——高遷移率族蛋白B1(HMGB1)合成和釋放增加,這兩者均可引起TNF-α的表達(dá)增強(qiáng),但其具體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制仍不清楚。許多資料表明,參與膿毒癥的信號(hào)通路之間存在著復(fù)雜的交匯作用,其中STAT3蛋白序列中含有簡(jiǎn)單、高度保守的MAPK磷酸化位點(diǎn);而細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基未端激酶(JNK)和p38都可以...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖5srl滬n…3和P38單獨(dú)和共同作用對(duì)全長(zhǎng)TNF一a啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性的影響

圖5srl滬n…3和P38單獨(dú)和共同作用對(duì)全長(zhǎng)TNF一a啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性的影響Fig.5Influenceofs口DU…3andP38onfulllengthTNF一aPromotertra!招criPtactivityaloneandtogetherA:dose一effeetof....

圖7RNAi一s衛(wèi)訂3對(duì)P38和51肖I，3相互作用誘導(dǎo)全長(zhǎng)TNF心啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性的

干擾實(shí)驗(yàn)這兩條通路中任何一方就可以減少TNF一的PK和51’A1，3質(zhì)�；旌衔锕餐D(zhuǎn)染細(xì)胞，進(jìn)對(duì)P38和s℃汀3相互作用誘導(dǎo)全長(zhǎng)TNF一住與RNAi對(duì)照相比，刺激前P38和STAr3升高了6.5倍。在加入州Ai一S毛氣1，3后，刺倍。

圖1不同長(zhǎng)度TNF一a啟動(dòng)子的PCR擴(kuò)增和酶切鑒定Fig.1PCRofdifferenilengthTNF一aPromoterandidentifieationofdifferentTNF一a

在100bp附近分別有一條帶，與預(yù)計(jì)的目的片段大小位置相符(圖A)。不同長(zhǎng)度rrNF一a啟動(dòng)子缺失突變體分別經(jīng)KPnl艦indm雙酶切后分別產(chǎn)生約70/75/80/85/85A大小的目的片段，結(jié)果如圖1(A一D)。B1ZM2000bP000bP250bP100bPD123....

圖351滬n，3對(duì)不同長(zhǎng)度TNF一a啟動(dòng)子缺失突變體活性影響

3對(duì)不同長(zhǎng)度TNF一a啟動(dòng)子缺失突變體活性影響Effectofs口L戊I，3ondifferentlengthTNF一aPromotermutant新構(gòu)建的T邢一a啟動(dòng)子缺失突變體活性的影響果，在對(duì)TNF一a啟動(dòng)子堿基片段進(jìn)行生物學(xué)信息分析后間可能存在與51’AT3結(jié)合位點(diǎn)相似的....

本文編號(hào)：3900322