心血管疾病是最重要的人類疾病之一,在歐美發(fā)達(dá)國(guó)家和中國(guó)都是導(dǎo)致人類 死亡的的頭號(hào)殺手。對(duì)心血管疾病的分子遺傳學(xué)研究,不僅可提供精確的診斷方 法,發(fā)展新的有效的治療手段,同時(shí)還有助于我們理解心臟工作和血管發(fā)育的機(jī) 理。在本研究中,我們克隆了一個(gè)新的血管生成因子,VG5Q, 其突變可引起先天 性靜脈畸形骨肥大綜合征(Klippel-Trenaunay Syndrome,以下簡(jiǎn)稱 KTS);在一 個(gè)大的長(zhǎng) QT 家系中,我們發(fā)現(xiàn)了一個(gè)新的 KCNQ1 基因的突變,L187P, 該突變引 起這一家庭的部分成員患有呈常染色體顯性遺傳的長(zhǎng) QT 綜合征。 KTS 是一類先天性血管疾病,其癥狀是毛細(xì)血管、靜脈管、淋巴管畸形,以及 骨和軟組織肥大,可影響到身體的許多部位,出現(xiàn)疼痛、殘疾和畸形,給病人帶來(lái) 極大的痛苦和精神壓力。KTS通常散發(fā),其發(fā)病原因尚不清楚。 本文通過(guò)定位克隆的方法克隆了一個(gè)新基因 VG5Q,并研究了該基因在血管生成 過(guò)程中的生理功能。我們?cè)谝晃话l(fā)生了 t(5;11)(q13.3;p15.1)平衡易位的 KTS 病人身 上分離淋巴細(xì)胞,通過(guò)體細(xì)胞雜交,獲得了含衍生 5 號(hào)染色體...

【文章頁(yè)數(shù)】：99 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
第一部分 VG5Q,一個(gè)新的血管生成因子,突變引起KTS
    前言
    材料和方法
        一、 技術(shù)路線和實(shí)驗(yàn)方案
        二、 實(shí)驗(yàn)材料和方法
            1 KTS病人與臨床診斷
            2 DNA的提取
            3 建立人鼠雜種體細(xì)胞株
            4 應(yīng)用公用數(shù)據(jù)庫(kù)中的STS作為探針,對(duì)斷裂點(diǎn)初步定位
            5 應(yīng)用Celera數(shù)據(jù)庫(kù)中已知序列,設(shè)計(jì)STS對(duì)斷裂點(diǎn)進(jìn)行精確定位
            6 克隆兩個(gè)易位接合序列
            7 克隆全長(zhǎng)VG5QcDNA
            8 VG5Q的組織分布和內(nèi)皮細(xì)胞的表達(dá)
            9130 個(gè)KTS病人VG5Q基因的突變檢測(cè)
            10 構(gòu)建VG5QPromoter-Luc+載體及chr11-5-Luc+載體
            11 Luciferase檢測(cè)
            12 野生型和突變型VE5G表達(dá)載體的構(gòu)建與表達(dá)
            13 雞胚的絨毛膜囊CAM檢測(cè)
    結(jié)果
        1 衍生5號(hào)染色體和衍生11號(hào)染色體的雜種細(xì)胞株的獲得
        2 易位斷裂點(diǎn)的確定
        3 兩個(gè)易位接合區(qū)域的精確克隆
        4 T（5;11）易位斷裂愈合的可能機(jī)制
        5 新基因VG5Q,KTS候選基因
        6 T（5;11）易位與VG5Q
        75 個(gè)KTS病人的VG5Q具有的E133K突變
        8 染色體的平衡易位引起VG5Q的表達(dá)增強(qiáng)
        9 VG5Q是一個(gè)血管生成因子,E133K是一種功能增強(qiáng)型突變
    討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 新的KCNQ1突變,L187P,引起長(zhǎng)QT綜合癥
    前言
    材料與方法
        1 家系材料
        2 DNA提取
        3 連鎖分析
        4 測(cè)序
        5 SSCP檢測(cè)
        6 RFLP分析
    結(jié)果
        1 兩個(gè)LQT家系genotype結(jié)果
        2 LodScore的計(jì)算
        3 KCNQ1第三外顯子發(fā)生L187P替換
        4 L187P與疾病共分離
        5 RFLP分析結(jié)果表明L187P是引起家系2患LQT的致病突變
    討論
    參考文獻(xiàn)
附錄:博士期間發(fā)表的論文
致謝



本文編號(hào)：3853143