目的探討三磷酸腺苷(ATP)合酶在糖尿病大鼠陰莖海綿體平滑肌細(xì)胞病變中的作用機(jī)制。方法體內(nèi)實驗:40只SD大鼠隨機(jī)分為正常對照組與糖尿病組(按60mg/kg腹腔內(nèi)注射鏈脲佐菌素后72h、1周、2周隨機(jī)血糖水平>16.7mmol/L為造模成功),飼養(yǎng)10周后比較大鼠陰莖勃起功能;處死后取陰莖海綿體組織,采用膠原纖維染色法檢測纖維化程度,免疫組化法檢測Caspase-3表達(dá),Western blot法檢測F1-ATPase蛋白表達(dá)。體外實驗:取正常大鼠陰莖海綿體平滑肌細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),分為對照組(正常培養(yǎng)基培養(yǎng))、高糖組(含30mmol/L葡萄糖的培養(yǎng)基培養(yǎng))、高糖+ATP酶過表達(dá)組(ATPase高表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染陰莖海綿體平滑肌細(xì)胞24h后,再用含30mmol/L葡萄糖的培養(yǎng)基培養(yǎng))。48h后采用Western blot法檢測F1-ATPase、轉(zhuǎn)化生長因子β₁(TGF-β₁)、結(jié)締組織生長因子(CTGF)蛋白表達(dá)。結(jié)果在體內(nèi)實驗中,與正常對照組比較,糖尿病組30min內(nèi)陰莖勃起次數(shù)明顯減少(P<0.05),陰莖海綿體膠原纖維/肌纖維比...

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 體內(nèi)試驗
        1.1.1 動物及試劑
        1.1.2動物分組及模型制備
        1.1.3 陰莖勃起功能檢測
        1.1.4 大鼠陰莖組織獲取及處死
        1.1.5 陰莖海綿體組織纖維化觀察
        1.1.6 陰莖海綿體F1-ATPase蛋白表達(dá)水平檢測
        1.1.7 陰莖海綿體平滑肌細(xì)胞凋亡檢測
    1.2 體外試驗
        1.2.1 主要試劑
        1.2.2 細(xì)胞分離、培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染
        1.2.3 F1-ATPase、TGF-β1和CTGF蛋白表達(dá)水平檢測
    1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 糖尿病組與正常對照組大鼠體重及血糖濃度比較
    2.2 糖尿病組與正常對照組大鼠陰莖勃起功能比較
    2.3 糖尿病組與正常對照組大鼠陰莖海綿體纖維化比較
    2.4 糖尿病組與正常對照組大鼠陰莖海綿體Caspase-3陽性的平滑肌細(xì)胞比例比較
    2.5 體內(nèi)外實驗觀察細(xì)胞內(nèi)F1-ATPase蛋白表達(dá)變化
    2.6 體外實驗觀察TGF-β1通路上蛋白表達(dá)變化
3 討論



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