造血干細(xì)胞移植(HSCT)可用來治療多種惡性造血系統(tǒng)疾病.HSCT成功植入的先決條件之一是必須輸入足夠量的造血干/祖細(xì)胞(HS/PCs).細(xì)胞劑量過少會(huì)導(dǎo)致植入時(shí)間延長(zhǎng),移植失敗的可能性增大.從臍帶血中直接分離的造血干細(xì)胞因數(shù)量較少而不能滿足臨床移植的需要.利用骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞作為滋養(yǎng)層聯(lián)合細(xì)胞因子組合(SCF+G-CSF+TPO)使臍血造血干/祖細(xì)胞體外擴(kuò)增75.2±15.0倍,CD34+細(xì)胞擴(kuò)增33.4±12.3倍.將擴(kuò)增的細(xì)胞收集,重新懸浮于L-15培養(yǎng)液中制成造血干/祖細(xì)胞制劑,并在建立相應(yīng)的檢測(cè)技術(shù)基礎(chǔ)上,進(jìn)行了細(xì)胞制劑的無菌檢測(cè)以及細(xì)胞制劑中細(xì)菌內(nèi)毒素、牛血清殘留量和干細(xì)胞因子殘留量的檢測(cè).通過上述檢測(cè)分析,為擴(kuò)增的造血干/祖細(xì)胞制劑服務(wù)臨床需要,輔助治療惡性血液病和再生障礙性貧血以及遺傳性貧血重建造血功能提供實(shí)驗(yàn)依據(jù).

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【文章目錄】：
1 材料和方法
2 臨床前安全性檢測(cè)
    2.1 細(xì)菌真菌檢查
    2.2 支原體檢查
    2.3 外源病毒檢測(cè)
        2.3.1 體外培養(yǎng)法檢測(cè)外源病毒
        2.3.2 體內(nèi)接種法檢測(cè)外源病毒
        2.3.3 雞胚接種法檢測(cè)外源病毒
    2.4 內(nèi)毒素檢測(cè)
        2.4.1 內(nèi)毒素限值 (L) 、樣品最大稀釋倍數(shù) (MVD) 的確定
        2.4.2 鱟試劑靈敏度復(fù)核
        2.4.3 細(xì)胞制品的干擾試驗(yàn)
        2.4.4 細(xì)胞制品內(nèi)毒素的檢測(cè)按照文獻(xiàn)[14]進(jìn)行并判定結(jié)果.
    2.5 SCF (干細(xì)胞因子) 殘留量檢測(cè)
    2.6 牛血清殘留量檢測(cè)
    2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
3 結(jié) 果
    3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.1.1 細(xì)胞生長(zhǎng)動(dòng)態(tài)
        3.1.2 細(xì)胞體外擴(kuò)增倍數(shù)
        3.1.3 細(xì)胞表面抗原分析
        3.1.4 集落形成能力測(cè)定
    3.2 安全性檢測(cè)
        3.2.1 無菌檢測(cè)
        3.2.2 外源病毒因子檢測(cè)
        3.2.3 細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)
            3.2.3.1 細(xì)菌內(nèi)毒素限值 (L) 和樣品最大稀釋倍數(shù) (MVD)
            3.2.3.2 靈敏度復(fù)核試驗(yàn)結(jié)果見表1.
            3.2.3.3 細(xì)胞制品的干擾試驗(yàn)
            3.2.3.4 細(xì)胞制品內(nèi)毒素檢測(cè)
        3.2.4 hSCF殘留量測(cè)定
        3.2.5 牛血清殘留量測(cè)定
4 討 論



本文編號(hào)：3790648