目的：銅綠假單胞菌屬革蘭氏陰性桿菌假單胞菌屬,為條件致病菌,可產(chǎn)生多種致病因子,包括一些酶類及毒素,例如：脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)等,當(dāng)機(jī)體免疫力低下時(shí)可引起嚴(yán)重的肺部感染。LPS為銅綠假單胞菌的致病因素之一,它在調(diào)節(jié)宿主和細(xì)菌之間起到關(guān)鍵性作用。研究表明LPS可以誘導(dǎo)A549細(xì)胞發(fā)生凋亡,并促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)活性氧產(chǎn)生增多。文獻(xiàn)報(bào)道,活性氧是細(xì)胞凋亡的原因之一,活性氧可引起氧化應(yīng)激最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。SIRT1是一種具有NAD+依賴的蛋白去乙�；富钚缘亩喙δ苻D(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,它屬于Sir2家族,對(duì)細(xì)胞的生存、凋亡、衰老等生理活動(dòng)起著十分重要的調(diào)節(jié)作用。研究表明SIRT1是一種抑制細(xì)胞凋亡的因子,可通過(guò)對(duì)p53去乙�；恼{(diào)控從而抑制細(xì)胞凋亡。本研究通過(guò)建立LPS誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡模型,來(lái)分析在此過(guò)程中,SIRT1在銅綠假單胞菌LPS誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡中的作用并探討活性氧在LPS誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡中的作用。 方法：1.MTT方法檢測(cè)LPS在不同濃度及不同時(shí)間對(duì)A549細(xì)胞活力的影響。2.用Western blot方法檢測(cè)LPS在不同濃度及不同時(shí)間對(duì)A549細(xì)胞S...

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
目錄
縮略詞表
摘要
Abstract
前言
材料與方法
    一、主要材料、試劑與儀器設(shè)備
    二、試劑配制
    三、主要實(shí)驗(yàn)方法和分組
        3.1 A549細(xì)胞培養(yǎng)
        3.2 實(shí)驗(yàn)分組
        3.3 MTT檢測(cè)A549細(xì)胞活力
        3.4 細(xì)胞內(nèi)活性氧檢測(cè)
        3.5 細(xì)胞凋亡檢測(cè)
        3.6 細(xì)胞免疫熒光方法
        3.7 Western blot檢測(cè)蛋白表達(dá)
    四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
    一、LPS可降低A549細(xì)胞活力,呈時(shí)間及濃度依賴性
    二、SIRT1主要分布于A549細(xì)胞核內(nèi)
    三、LPS對(duì)A549細(xì)胞SIRT1表達(dá)的影響
    四、SIRT1、p53及Bcl2參與了LPS誘導(dǎo)的A549細(xì)胞凋亡
    五、白黎聲醇（Res)可通過(guò)上調(diào)A549細(xì)胞內(nèi)SIRT1的表達(dá)抑制細(xì)胞的凋亡
    六、煙酷胺(NAM)可通過(guò)抑制A549細(xì)胞內(nèi)SIRTl的表達(dá)促進(jìn)細(xì)胞的調(diào)亡
    七、N-乙酰半胱氣酸（N-acety-L-cysteitre, NAC)可抑制活性氧的產(chǎn)生并減少A549細(xì)胞的凋亡
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述(一)
    參考文獻(xiàn)
綜述(二)
    參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3790562