目的：銅綠假單胞菌屬革蘭氏陰性桿菌假單胞菌屬,為條件致病菌,可產(chǎn)生多種致病因子,包括一些酶類及毒素,例如：脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)等,當機體免疫力低下時可引起嚴重的肺部感染。LPS為銅綠假單胞菌的致病因素之一,它在調(diào)節(jié)宿主和細菌之間起到關(guān)鍵性作用。研究表明LPS可以誘導A549細胞發(fā)生凋亡,并促進細胞內(nèi)活性氧產(chǎn)生增多。文獻報道,活性氧是細胞凋亡的原因之一,活性氧可引起氧化應激最終導致細胞凋亡。SIRT1是一種具有NAD+依賴的蛋白去乙�；富钚缘亩喙δ苻D(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,它屬于Sir2家族,對細胞的生存、凋亡、衰老等生理活動起著十分重要的調(diào)節(jié)作用。研究表明SIRT1是一種抑制細胞凋亡的因子,可通過對p53去乙�；恼{(diào)控從而抑制細胞凋亡。本研究通過建立LPS誘導A549細胞凋亡模型,來分析在此過程中,SIRT1在銅綠假單胞菌LPS誘導A549細胞凋亡中的作用并探討活性氧在LPS誘導A549細胞凋亡中的作用。 方法：1.MTT方法檢測LPS在不同濃度及不同時間對A549細胞活力的影響。2.用Western blot方法檢測LPS在不同濃度及不同時間對A549細胞S...

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
目錄
縮略詞表
摘要
Abstract
前言
材料與方法
    一、主要材料、試劑與儀器設備
    二、試劑配制
    三、主要實驗方法和分組
        3.1 A549細胞培養(yǎng)
        3.2 實驗分組
        3.3 MTT檢測A549細胞活力
        3.4 細胞內(nèi)活性氧檢測
        3.5 細胞凋亡檢測
        3.6 細胞免疫熒光方法
        3.7 Western blot檢測蛋白表達
    四、實驗結(jié)果的統(tǒng)計學處理
結(jié)果
    一、LPS可降低A549細胞活力,呈時間及濃度依賴性
    二、SIRT1主要分布于A549細胞核內(nèi)
    三、LPS對A549細胞SIRT1表達的影響
    四、SIRT1、p53及Bcl2參與了LPS誘導的A549細胞凋亡
    五、白黎聲醇（Res)可通過上調(diào)A549細胞內(nèi)SIRT1的表達抑制細胞的凋亡
    六、煙酷胺(NAM)可通過抑制A549細胞內(nèi)SIRTl的表達促進細胞的調(diào)亡
    七、N-乙酰半胱氣酸（N-acety-L-cysteitre, NAC)可抑制活性氧的產(chǎn)生并減少A549細胞的凋亡
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述(一)
    參考文獻
綜述(二)
    參考文獻
致謝
個人簡歷



本文編號：3790562