目的探討類鼻疽桿菌感染HepG2細(xì)胞后誘導(dǎo)的自噬抑制對胞內(nèi)脂質(zhì)代謝的調(diào)控作用。方法類鼻疽桿菌感染HepG2細(xì)胞6、12、24 h為感染組,以未感染組作為對照。激光共聚焦顯微鏡觀測各組細(xì)胞內(nèi)脂滴和GFP-自噬點的數(shù)量;定量試劑盒檢測各組細(xì)胞內(nèi)甘油三酯及膽固醇水平;Western blot檢測各組細(xì)胞中自噬相關(guān)蛋白LC3Ⅱ、p62表達(dá)水平。利用自噬抑制劑3-MA、Baf-A1以及自噬激活劑Rapa處理細(xì)胞,檢測改變宿主細(xì)胞自噬水平后,對類鼻疽桿菌感染HepG2細(xì)胞后胞內(nèi)脂質(zhì)代謝的影響;外源加入游離脂肪酸三醋酸甘油酯,通過細(xì)菌胞內(nèi)計數(shù)實驗檢測類鼻疽桿菌胞內(nèi)存活情況。結(jié)果類鼻疽桿菌感染HepG2細(xì)胞6、12、24 h后,與未感染組比較,胞內(nèi)脂滴數(shù)量增多,脂質(zhì)成分甘油三酯和膽固醇水平也隨感染時間延長逐漸升高,且在感染24 h后達(dá)到最高水平(P<0.01);自噬檢測發(fā)現(xiàn),與未感染組比較,LC3Ⅱ蛋白表達(dá)隨感染時間逐漸下降,p62蛋白表達(dá)水平隨感染時間逐漸蓄積,胞內(nèi)自噬小體的數(shù)量也隨感染時間逐漸減少,且感染24 h后數(shù)量最低(P<0.01),提示類鼻疽桿菌感染HepG2細(xì)胞后自噬受抑;使...

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 質(zhì)粒、菌株及細(xì)胞系
    1.2 主要試劑
    1.3 細(xì)胞培養(yǎng)及類鼻疽桿菌感染
    1.4 Western blot檢測
    1.5 激光共聚焦觀察
    1.6 定量試劑盒檢測細(xì)胞內(nèi)甘油三酯及膽固醇水平
    1.7 細(xì)菌胞內(nèi)增殖實驗
    1.8 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 類鼻疽桿菌感染HepG2細(xì)胞后導(dǎo)致宿主細(xì)胞脂質(zhì)蓄積
    2.2 類鼻疽桿菌感染HepG2細(xì)胞后宿主細(xì)胞自噬受抑
    2.3 激活自噬促進(jìn)宿主細(xì)胞脂質(zhì)代謝
    2.4 激活宿主脂質(zhì)代謝有利于類鼻疽桿菌的清除
3 討論



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