大鼠胰島和胰腺干細(xì)胞的體外分離和培養(yǎng)
發(fā)布時(shí)間:2023-04-09 01:27
成體胰腺內(nèi)存在著具有繁殖分化能力的干細(xì)胞。由于成體胰腺內(nèi)的β細(xì)胞屬分化終末細(xì)胞,自我復(fù)制能力極低,多數(shù)學(xué)者認(rèn)為,成體胰腺內(nèi)衰老、死亡的β細(xì)胞主要是由具有潛在分化能力的胰腺干細(xì)胞增殖、分化來(lái)補(bǔ)充。并且,在胰腺導(dǎo)管部分結(jié)扎的動(dòng)物模型中,觀察到有胰島細(xì)胞的再生現(xiàn)象。近年來(lái),由于無(wú)血清組織細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展及對(duì)胰腺干細(xì)胞認(rèn)識(shí)的提高,已成功的在體外培養(yǎng)條件下分離培養(yǎng)出具有繁殖和分化能力的胰腺干細(xì)胞,但目前對(duì)胰腺干細(xì)胞的了解甚少,還沒(méi)有從單一細(xì)胞克隆出胰島,而且,由胰腺干細(xì)胞培養(yǎng)出的β細(xì)胞其分泌胰島素能力很低,還不能夠滿足臨床上移植的需要。本研究應(yīng)用組織細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù),從大鼠胰腺非胰島細(xì)胞中體外分離、培養(yǎng)出nestin陽(yáng)性細(xì)胞,并使其形成胰島樣細(xì)胞團(tuán),表達(dá)胰島素,證明其具有干細(xì)胞特點(diǎn)。 第一部分:SD新生大鼠和成熟大鼠胰島分離。 SD新生大鼠胰島分離應(yīng)用我們獨(dú)創(chuàng)的完整胰腺膠原酶消化法。原始的新生鼠胰島分離采用組織剪碎后經(jīng)膠原酶消化法,該方法不可避免的損傷部分胰島,使胰島的形態(tài)和功能受損。由于新生鼠胰腺內(nèi)纖維組織較少,胰腺體積小,胰腺的各部分可以較均勻的暴露在膠原酶中,本研究經(jīng)過(guò)多次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),新生...
【文章頁(yè)數(shù)】:67 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
縮略詞表
提要
第一章 緒論
第二章 材料和方法
一、 材料
二、 方法
(一) SD大鼠胰島體外分離
(二) SD 大鼠胰島干細(xì)胞體外分離和培養(yǎng)
(三) 胰島干細(xì)胞的鑒別
第三章 結(jié)果
一、 SD大鼠胰島體外分離結(jié)果
二、 SD大鼠胰島干細(xì)胞體外分離和培養(yǎng)結(jié)果
三、 胰島干細(xì)胞的鑒別結(jié)果
第四章 討論
第五章 結(jié)論
附圖
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷
摘要
Abstract
原創(chuàng)性聲明
致謝
本文編號(hào):3786816
【文章頁(yè)數(shù)】:67 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
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提要
第一章 緒論
第二章 材料和方法
一、 材料
二、 方法
(一) SD大鼠胰島體外分離
(二) SD 大鼠胰島干細(xì)胞體外分離和培養(yǎng)
(三) 胰島干細(xì)胞的鑒別
第三章 結(jié)果
一、 SD大鼠胰島體外分離結(jié)果
二、 SD大鼠胰島干細(xì)胞體外分離和培養(yǎng)結(jié)果
三、 胰島干細(xì)胞的鑒別結(jié)果
第四章 討論
第五章 結(jié)論
附圖
參考文獻(xiàn)
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原創(chuàng)性聲明
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