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TGF-β類生長(zhǎng)因子基因的克隆表達(dá)及在基因治療中的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2023-03-04 22:07
  TGF-β類生長(zhǎng)因子是一類具有廣泛生物學(xué)活性和重要臨床應(yīng)用價(jià)值的細(xì)胞因子,包括多種蛋白因子,它們?cè)诎被峤Y(jié)構(gòu)上具有不同程度的同源性,共同構(gòu)成了TGF-β超家族,包括BMPs、活化素、抑制素和繆勒氏物質(zhì)等。近年來(lái),人們對(duì)TGF-β類生長(zhǎng)因子與骨修復(fù)的關(guān)系進(jìn)行了廣泛的研究,證明TGF-β類生長(zhǎng)因子能通過(guò)化學(xué)趨化作用使間充質(zhì)干細(xì)胞聚集,促進(jìn)其增殖并向成骨方向分化,從而起到促進(jìn)骨形成的作用。在眾多的TGF-β類生長(zhǎng)因子中,TGF-β1、BMP2和BMP7因其較強(qiáng)的成骨能力而受到密切的關(guān)注。 基因工程重組蛋白的應(yīng)用和基因治療是TGF-β類生長(zhǎng)因子應(yīng)用中的兩種重要的策略。本研究從TGF-β1、BMP2和BMP7基因的克隆和鑒定入手,利用基因工程的方法,在大腸桿菌中表達(dá)TGF-β1,制備了具有生物活性的TGF-β1,同時(shí)構(gòu)建了BMP2和BMP7真核表達(dá)質(zhì)粒以及TGF-β1、BMP2和BMP7的重組腺病毒,體外分離培養(yǎng)了骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,通過(guò)間接轉(zhuǎn)移技術(shù)(ex vivo)和直接轉(zhuǎn)移技術(shù)(in vivo)對(duì)TGF-β1、BMP2和BMP7在基因治療中的應(yīng)用進(jìn)行了初步研究。本研究由四部分組成。 ...

【文章頁(yè)數(shù)】:91 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
縮略語(yǔ)
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 TGF-β類生長(zhǎng)因子基因的克隆
    材料和方法
    試驗(yàn)結(jié)果
    討論
第二部分 TGF-β1成熟肽基因在大腸桿菌中表達(dá)
    材料和方法
    試驗(yàn)結(jié)果
    討論
第三部分 TGF-β類生長(zhǎng)因子真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)
    材料和方法
    試驗(yàn)結(jié)果
    討論
第四部分 表達(dá)TGF-β類生長(zhǎng)因子的重組腺病毒的制備和異位誘導(dǎo)成骨的研究
    材料和方法
    試驗(yàn)結(jié)果
    討論
總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
致謝



本文編號(hào):3755097

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