自Bikenbach（1981）首次標記小鼠皮膚干細胞以來的二十余年間，科學(xué)家們對表皮干細胞進行了大量研究，但至今沒有建立起表皮干細胞系的報道，從而制約了表皮干細胞研究的深入進行。開展分離純化表皮干細胞建系及生物學(xué)特性研究，為表皮干細胞應(yīng)于醫(yī)學(xué)臨床的組織工程及人類重大疾病的細胞治療打下技術(shù)基礎(chǔ)。該項研究不僅具有重要的理論意義，而且具有重要的臨床應(yīng)用價值，為無數(shù)正受燒傷、刀傷、各種潰爛煎熬及因患有皮膚癌及頑固性皮膚病而感到絕望的病人帶來新為生活的希望。尋找可替代角膜緣干細胞的理想種子細胞構(gòu)建組織工程化上皮，是治療因疾病及各種理化因素導(dǎo)致雙眼角膜緣干細胞缺損（limbal stem cell deficiency，LSCD）而致盲的病人的首要選擇。表皮和角膜均來自外胚層，表皮干細胞（epidermal stem cells，ESCs）和角膜緣干細胞（limbal stem cells，LSCs）有相似的生物學(xué)特性。雖在胚胎發(fā)育過程中二者方向不同，但并不是不可逆的。本研究在總結(jié)、比較ESCs和LSCs生物學(xué)特性的基礎(chǔ)上，借鑒成體干細胞可塑性的最新研究成果，提出以ESCs替代LSCs重建LSC... 

【文章頁數(shù)】：119 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
前 言
文獻綜述
    第一章 表皮干細胞
        1 表皮發(fā)育與表皮干細胞在體分布模式
            1.1 表皮發(fā)生與角蛋白表達
            1.2 表皮增殖單位(Epidermal Proliferation unit. EPU)學(xué)說
            1.3 網(wǎng)狀嵴分布模式
            1.4 隆突激活假說
        2 干細胞微環(huán)境與干細胞命運調(diào)控
        3 表皮干細胞的生物學(xué)特性
            3.1 慢周期性(slow cycling)
            3.2 自我更新能力
            3.3 粘附特性
            3.4 表皮干細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征
            3.5 表皮干細胞表面標志
        4 表皮干細胞分離純化鑒定
            4.1 分離方法
            4.2 篩選純化表皮干細胞的方法
            4.3 表皮干細胞的鑒定
        5 表皮干細胞研究中仍需研究的幾個問題
            5.1 皮膚中是否存在一種根本干細胞(ulitmate stem cell)？
            5.2 表皮干細胞的標記有待進一步研究
            5.3 分離表皮干細胞的有效方法
            5.4 表皮干細胞的數(shù)量
    第二章 表皮干細胞可塑性
        1 成體干細胞可塑性研究
            1.1 成體干細胞可塑性相關(guān)概念的演繹
            1.2 成體干細胞可塑性研究概況
            1.3 成體干細胞可塑性研究的特點
            1.4 評價成體干細胞可塑性的標準
            1.5 成體干細胞可塑性現(xiàn)象所引發(fā)的幾個問題
            1.6 結(jié)語
        2 表皮干細胞分化潛能與可塑性
        3 表皮干細胞的應(yīng)用前景
            3.1 表皮干細胞組織工程皮膚構(gòu)建中的應(yīng)用
            3.2 表皮干細胞是理想的基因治療載體
            3.3 細胞治療
            3.4 生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因動物，推動生物制藥產(chǎn)業(yè)
    第三章 表皮干細胞重建角膜緣干細胞缺損眼表的可行性研究
        1 角膜緣干細胞基本特性
            1.1 只有角膜緣存在干細胞
            1.2 角膜緣干細胞的慢周期性
            1.3 角膜緣干細胞分化潛能
            1.4 角膜干細胞的分子標記
        2 角膜緣干細胞缺損與治療
            2.1 角膜緣干細胞缺損(Limbal stem Cell deficiency，LSCD)
            2.2 角膜干細胞缺損治療措施
            2.3 角膜干細胞移植值得關(guān)注的幾個問題
        3 表皮干細胞重建角膜緣干細胞缺損眼表的可行性
            3.1 表皮干細胞與角膜緣干細胞有相同的胚胎學(xué)起源
            3.2 成體干細胞可塑性現(xiàn)象給予我們新的啟示
            3.3 成體干細胞與胚胎干細胞是統(tǒng)一的
實驗研究
    第四章 表皮干細胞建系研究
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果
            2.1 ESCs的生長行為
            2.2 組織塊法獲取ESCS的效率
            2.3 原代培養(yǎng)細胞集落增殖速度與季節(jié)的關(guān)系
            2.4 ESC3集落形成率
            2.5 不同代干細胞生長曲線
            2.6 原代干細胞與傳代后表皮干細胞分子標志
            2.7 表皮干細胞形成表皮膜片
            2.8 由表皮干細胞構(gòu)建組織工程化皮膚
        3 討論
            3.1 分離純化表皮干細胞的方法
            3.2 無血清無飼養(yǎng)層培養(yǎng)體系擴增表皮干細胞
            3.3 表皮干細胞的鑒定
            3.4 成年動物皮膚中的胚胎樣干細胞
            3.5 表皮干細胞可分化形成毛囊
        4 小結(jié)
    第五章 表皮干細胞誘導(dǎo)分化研究
        1 材料與方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果
            2.1 表皮干細胞向神經(jīng)細胞誘導(dǎo)分化
            2.2 向心肌細胞誘導(dǎo)分化
            2.3 向成骨細胞誘導(dǎo)分化
        3 討論
            3.1 向神經(jīng)細胞誘導(dǎo)分化
            3.2 向心肌細胞誘導(dǎo)分化
            3.3 向成骨細胞誘導(dǎo)分化
        4 小結(jié)
    第六章 表皮干細胞構(gòu)建組織工程化角膜上皮重建LSCD模型羊眼表研究
        1 材料和方法
            1.1 材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果
            2.1 羊膜支架
            2.2 LSCD模型羊眼表特征
            2.3 表皮干細胞在羊膜上的生長行為及羊膜植片的組織學(xué)特征
            2.4 移植效果
        3 討論
            3.1 羊膜是負載表皮干細胞的理想載體
            3.2 表皮干細胞羊膜植片能有效重建LSCD模型羊眼表
            3.3 異體移植
            3.4 表皮干細胞重建LSCD眼表的可能性機理
        4 小結(jié)
結(jié) 論
致 謝
參考文獻
作者簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]一種表皮干細胞檢測方法的建立[J]. 程大勝 ,夏照帆,唐洪泰,田建廣,王皓.  解放軍醫(yī)學(xué)雜志. 2003(06)
[2]成年山羊皮膚干細胞體外克隆與誘導(dǎo)分化[J]. 楊學(xué)義,曹斌云,馮秀亮,馬勇江,竇忠英.  中國修復(fù)重建外科雜志. 2003(02)
[3]胎鼠表皮干細胞的分離培養(yǎng)及毛囊再生[J]. 韓軍濤,陳璧.  第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2003(01)
[4]人羊膜負載豬角朊細胞重建表皮的形態(tài)學(xué)研究[J]. 閆國和,粟永萍,艾國平,林遠,程天民,可金星,黃文琪.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2002(08)
[5]汗腺發(fā)生過程中基質(zhì)金屬蛋白酶與層黏連蛋白、纖連蛋白的表達特征[J]. 李建福,付小兵,盛志勇.  中華創(chuàng)傷雜志. 2002(07)
[6]進一步重視從發(fā)育和比較生物學(xué)來研究創(chuàng)傷后的組織修復(fù)與再生[J]. 付小兵 ,盛志勇 ,王正國.  解放軍醫(yī)學(xué)雜志. 2002(05)
[7]人全層組織工程皮膚的研制[J]. 金巖,呂紅兵,劉源,趙宇,聶鑫,劉曉亮,張勇杰.  實用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2002(02)
[8]深入開展組織由解剖修復(fù)到功能性修復(fù)的應(yīng)用基礎(chǔ)研究[J]. 盛志勇,付小兵.  中華外科雜志. 2002(01)
[9]皮膚組織工程研究進展[J]. 蔡霞,曹誼林,商慶新,關(guān)文祥.  中華實驗外科雜志. 2001(03)
[10]體內(nèi)外誘導(dǎo)CD34+細胞生成血管內(nèi)皮細胞的方法及其組織工程學(xué)運用[J]. 譚強,沙慧芳,江曉豐,史振余,顧偉勇,周允中.  復(fù)旦學(xué)報(醫(yī)學(xué)科學(xué)版). 2001(03)

博士論文
[1]小鼠胚胎干細胞定向誘導(dǎo)分化成骨細胞研究[D]. 宋曉平.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2003



本文編號：3729984