發(fā)布時(shí)間：2017-05-17 05:04

  本文關(guān)鍵詞：大鼠新生期脂多糖暴露對(duì)睪丸發(fā)育的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 觀察大鼠新生期脂多糖(LPS)暴露對(duì)睪丸發(fā)育的影響，探討新生期內(nèi)毒素血癥對(duì)雄性生殖的潛在危害。 方法 選用新生健康雄性SD大鼠，隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組于生后第4～12d期間，隔日腹腔注射脂多糖(75μg/kg，溶于生理鹽水中)，共5次，復(fù)制內(nèi)毒素?fù)p傷模型，對(duì)照組在相同時(shí)間腹腔注射等體積生理鹽水。兩組注射后均常規(guī)飼養(yǎng)至生后21d、PSd (preputial separation day,包皮分離日)、60d、77d稱取體重后，分批處死，摘取雙側(cè)睪丸，睪丸稱重后，常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)切片，分別行HE染色和免疫組化染色，光鏡觀察睪丸組織病理變化及增殖細(xì)胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible nitricoxide synthase, iNOS)和波形蛋白(vimentin, Vim)的表達(dá)分布情況。 結(jié)果 1.兩組各日齡大鼠的體重、睪丸重量、睪丸臟器系數(shù)及睪丸體積隨日齡增加而增加。包皮分離日實(shí)驗(yàn)組大鼠的睪丸重量，睪丸最大縱、橫徑，睪丸臟器系數(shù)以及睪丸體積與同齡對(duì)照組相比，均下降，差異有顯著性(P0.05)；60日齡實(shí)驗(yàn)組大鼠睪丸最大縱徑變小，與同齡對(duì)照組相比，差異有顯著性(P0.05)。 2. HE染色結(jié)果：對(duì)照組大鼠的生精小管分布均勻，生精上皮規(guī)則，各級(jí)生精細(xì)胞排列整齊，60日齡及77日齡大鼠管腔中可以見到大量精子。兩組大鼠的生精小管直徑隨日齡增加而增加。與同日齡對(duì)照組大鼠的生精小管直徑相比，實(shí)驗(yàn)組大鼠的生精小管直徑變小。實(shí)驗(yàn)組可見生精上皮脫落、變薄，生精細(xì)胞排列紊亂，嚴(yán)重者生精小管被大量脫落的生精細(xì)胞團(tuán)填塞。 3.免疫組化檢測(cè)結(jié)果：（1）對(duì)照組波形蛋白染色陽性反應(yīng)從生精小管基膜圍繞支持細(xì)胞核形成棕黃色的環(huán),并呈輻射狀延伸至管腔；實(shí)驗(yàn)組的波形蛋白表達(dá)減少或消失，伸至管腔的微絲明顯變短。（2）增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)陽性細(xì)胞主要是精原細(xì)胞和初級(jí)精母細(xì)胞，陽性產(chǎn)物位于細(xì)胞核，呈棕黃色、顆粒狀；實(shí)驗(yàn)組在上述部位的表達(dá)量減少。（3）誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)陽性反應(yīng)見于支持細(xì)胞、睪丸間質(zhì)細(xì)胞、管周肌樣細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)組在支持細(xì)胞和管周肌樣細(xì)胞表達(dá)明顯增強(qiáng)。 結(jié)論 1.大鼠新生期脂多糖暴露可改變支持細(xì)胞波形蛋白的表達(dá)和分布，破壞支持細(xì)胞的骨架結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致生精細(xì)胞脫落進(jìn)而損害生精過程，這種損害作用可延續(xù)至成年期。 2.大鼠新生期脂多糖暴露可致睪丸組織內(nèi)iNOS表達(dá)增加、PCNA表達(dá)減少，推測(cè)iNOS表達(dá)增加，所致的NO產(chǎn)生過多，，可能是脂多糖暴露導(dǎo)致支持細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)破壞，造成生精細(xì)胞脫落和生精細(xì)胞增殖分化障礙的機(jī)制之一。
【關(guān)鍵詞】：新生大鼠 脂多糖 睪丸 iNOS 波形蛋白 PCNA
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R321.1
【目錄】：

• 英文縮略詞表4-5
• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 前言10-13
• 材料和方法13-17
• 1. 材料13-14
• 1.1 試劑13
• 1.2 主要儀器13
• 1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及動(dòng)物模型制作13-14
• 2. 方法14-16
• 2.1 大鼠體重、睪丸重量、睪丸縱、橫徑、睪丸臟器系數(shù)及睪丸體積的測(cè)定和計(jì)算14
• 2.2 切片的制備14
• 2.3 HE 染色14-15
• 2.4 免疫組化染色15-16
• 3. 數(shù)據(jù)處理16-17
• 結(jié)果17-18
• 1. 大鼠體重、睪丸重量、睪丸最大縱、橫徑、睪丸臟器系及睪丸體積變化17
• 2. 大鼠睪丸的 HE 染色結(jié)果17
• 3. 波形蛋白、PCNA、iNOS 免疫組化檢測(cè)17-18
• 3.1 波形蛋白17
• 3.2 增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)17
• 3.3 誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)17-18
• 討論18-21
• 1. 新生期脂多糖暴露對(duì)大鼠體重、睪丸重量、睪丸臟器系數(shù)及睪丸體積的影響18
• 2. 新生期脂多糖暴露對(duì)大鼠睪丸組織學(xué)結(jié)構(gòu)及睪丸發(fā)育的影響18
• 3. LPS 對(duì)睪丸 PCNA、波形蛋白及 iNOS 表達(dá)的影響18-21
• 結(jié)論21-22
• 參考文獻(xiàn)22-26
• 附表與圖26-32
• 綜述32-39
• 參考文獻(xiàn)36-39
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文39-40
• 致謝40

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：372573