發(fā)布時(shí)間：2017-05-17 04:11

  本文關(guān)鍵詞：蠶蛹粗提浸液致敏小鼠過(guò)敏模型建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 家蠶過(guò)敏是一種具有中國(guó)特色的職業(yè)性過(guò)敏與食物過(guò)敏，家蠶蛋白有較強(qiáng)的過(guò)敏原活性也是主要的過(guò)敏原。建立蠶蛹粗提浸液致敏BALB/C小鼠腸道和哮喘模型；檢測(cè)特異性IgE和IgG水平，脾細(xì)胞因子變化，腸道和肺部HE染色病理分析。本研究具有鮮明的中國(guó)特色，為家蠶過(guò)敏的診斷與治療奠定基礎(chǔ)。 方法： 1.蠶蛹粗提浸液致敏BALB/C小鼠腸道過(guò)敏模型方法： 將32只5-6周近親雌性BALB/c小鼠隨機(jī)分為陰性組（PBS組），陽(yáng)性對(duì)照霍亂毒素組(CT組)，蠶蛹粗提浸液組(SPE組)，霍亂毒素+蠶蛹粗提浸液組(CT+SPE組)每組8只。陰性組灌胃PBS；陽(yáng)性組灌胃蠶蛹粗提浸液，間隔3天、共灌胃6次。灌胃激發(fā)3次，灌胃激發(fā)前后測(cè)肛溫、觀察致敏狀態(tài)；激發(fā)后給腸道致敏模型評(píng)分；收集小鼠血清，并收集小鼠脾臟細(xì)胞上清，測(cè): sIgE、sIgG2a、細(xì)胞因子（IFN-γ、IL-5、IL-4）。小鼠空腸段組織病理變化等指標(biāo)對(duì)模型的構(gòu)建進(jìn)行評(píng)價(jià)。 2.蠶蛹粗提浸液致敏小鼠哮喘模型方法： 將16只5-6周近親雌性BALB/c小鼠隨機(jī)分為陰性組（PBS組），，陽(yáng)性組（SPE組）每組8只。陰性組腹腔皮下注射PBS；陽(yáng)性組腹腔注射蠶蛹粗提浸液致敏，連續(xù)3次，每次間隔1周。然后滴鼻激發(fā)一周每天一次。激發(fā)后進(jìn)行氣道高反應(yīng)檢測(cè)；收集BALF（肺泡灌洗液）進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)、分類(lèi)。24小時(shí)內(nèi)收集小鼠血清；檢測(cè)特異性抗體（IgE）、細(xì)胞因子（IL-4、IL-10、INF-γ）以及肺組織病理變化等指標(biāo)對(duì)模型的構(gòu)建進(jìn)行評(píng)價(jià)。 結(jié)果： 1.蠶蛹粗提浸液致敏BALB/C小鼠腸道過(guò)敏模型結(jié)果： BALB/c小鼠CT+SPE組肛溫變化、過(guò)敏狀態(tài)最明顯；家蠶粗提浸液腸道組織病理改變，明顯有炎癥病變；脾細(xì)胞培養(yǎng)上清液IL-4、IL-5升高，INF-γ降低；嗜酸性粒細(xì)胞升高（P＜0.05），陰性組各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)升高。 2.蠶蛹粗提浸液致敏BALB/C小鼠哮喘模型結(jié)果： 家蠶粗提浸液組肺部病理改變，明顯有炎癥病變，BALF（肺泡灌洗液）細(xì)胞計(jì)數(shù)升高，灌洗液IL-4、IL-10升高，INF-γ降低；嗜酸性粒細(xì)胞升高（P＜0.05），陰性組各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)升高。 結(jié)論： 蠶蛹粗提浸液灌胃的方法致敏BALB/C小鼠腸道過(guò)敏建模成功；蠶蛹粗提浸液致敏BALB/C小鼠過(guò)敏性哮喘建模成功。兩個(gè)過(guò)敏模型的建立為以后蠶蛹過(guò)敏診斷治療打下基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：蠶蛹 過(guò)敏原 腸道過(guò)敏 過(guò)敏性哮喘 腹腔注射 灌胃
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R-332;R392
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-10
• 中英文縮略詞表10-11
• 第1章 引言11-14
• 1.1 變態(tài)反應(yīng)11
• 1.2 過(guò)敏原11
• 1.3 過(guò)敏性疾病的流行病學(xué)11-12
• 1.4 食物過(guò)敏12
• 1.5 家蠶過(guò)敏研究發(fā)展12-13
• 1.6 研究?jī)?nèi)容13-14
• 第2章 蠶蛹粗提浸液致敏BALB / C小鼠腸道過(guò)敏模型14-32
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料和試劑14-17
• 2.1.1 試劑及盒抗體14-15
• 2.1.2 主要儀器15-16
• 2.1.3 溶液配制16-17
• 2.1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及蠶蛹17
• 2.2 方法17-22
• 2.2.1 蠶蛹粗提浸液提取，BCA及定量17-19
• 2.2.2 蠶蛹粗提浸液致敏小鼠分組、劑量、測(cè)量肛溫19
• 2.2.3 灌胃致敏小鼠19
• 2.2.4 測(cè)量小鼠肛溫19
• 2.2.5 灌胃激發(fā)19-20
• 2.2.6 灌胃致敏小鼠癥狀評(píng)分20
• 2.2.7 小鼠眼球取血，取脾臟，取空腸20
• 2.2.8 小鼠空腸組織病理切片觀察20-21
• 2.2.9 ELISA測(cè)定血清中特異性IgE、SIgG2a及細(xì)胞因子水平21-22
• 2.3 結(jié)果22-30
• 2.3.1 蠶蛹蛋白BCA定量，蛋白電泳SDS-PAGE圖22-24
• 2.3.2 激發(fā)后小鼠肛溫對(duì)比24
• 2.3.3 激發(fā)后小鼠過(guò)敏癥狀評(píng)分24-25
• 2.3.4 激發(fā)后各組小鼠過(guò)敏癥狀的照片25-26
• 2.3.5 脾臟細(xì)胞上清液細(xì)胞因子檢測(cè)26-28
• 2.3.6 血清中特異性SIgE水平28
• 2.3.7 血清中特異性IgG2a水平28-29
• 2.3.8 小鼠空腸段組織病理學(xué)分析29-30
• 2.4 討論30-32
• 第3章 蠶蛹粗提浸液致敏 BALB / C 小鼠哮喘模型的建立32-43
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料和試劑32-35
• 3.1.1 試劑及盒抗體32-33
• 3.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器33-34
• 3.1.3 主要試劑配制34-35
• 3.1.4 家蠶蛋白、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物35
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法35-38
• 3.2.1 家蠶粗提液制備35
• 3.2.2 氣道高反應(yīng)性（AHR）的變化檢測(cè)35-36
• 3.2.3 支氣管肺泡灌洗及細(xì)胞計(jì)數(shù)36
• 3.2.4 血清特異性抗體IgE檢測(cè)36
• 3.2.5 脾細(xì)胞因子檢測(cè)36
• 3.2.6 肺組織取材、HE染色36-37
• 3.2.7 ELISA測(cè)定血清中特異性 IgE、細(xì)胞因子水平37-38
• 3.3 結(jié)果38-42
• 3.3.1 蠶蛹粗蛋白定量38
• 3.3.2 氣道高反應(yīng)測(cè)試結(jié)果分析38-39
• 3.3.3 肺泡灌洗液細(xì)胞分析39-40
• 3.3.4 脾細(xì)胞培養(yǎng)液和肺泡灌洗細(xì)胞因子 IL-4、IL-10 和 IFN-γ檢測(cè)40
• 3.3.5 小鼠血清特異性 IgE 水平40-41
• 3.3.6 肺組織病理學(xué)變化41-42
• 3.4 討論42-43
• 第4章 結(jié)論與展望43-44
• 4.1 結(jié)論43
• 4.2 展望43-44
• 致謝44-45
• 參考文獻(xiàn)45-48
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果48-49
• 綜述49-52
• 參考文獻(xiàn)52

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

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  本文關(guān)鍵詞：蠶蛹粗提浸液致敏小鼠過(guò)敏模型建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：372516