尿酸下調(diào)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)為成骨細(xì)胞過(guò)程中11β-HSD1的表達(dá)
發(fā)布時(shí)間:2017-05-17 00:06
本文關(guān)鍵詞:尿酸下調(diào)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)為成骨細(xì)胞過(guò)程中11β-HSD1的表達(dá),,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的探討體外誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hBMSCs)向成骨細(xì)胞分化過(guò)程中,尿酸對(duì)其成骨能力以及對(duì)11β-羥化類(lèi)固醇脫氫酶1(11β-HSD1)表達(dá)及功能的影響。方法全骨髓體外分離培養(yǎng)健康成年人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,用細(xì)胞形態(tài)學(xué)及細(xì)胞表面標(biāo)志物對(duì)其進(jìn)行鑒定,培養(yǎng)hBMSCs至第3代后分別以完全培養(yǎng)基(含體積分?jǐn)?shù)10%FBS、1%雙抗、89%低糖DMEM)為空白對(duì)照組、以成骨培養(yǎng)基(含10-8mol/L地塞米松、50mg/L維生素C、10-2mol/Lβ-甘油磷酸鈉的完全培養(yǎng)基)和尿酸干預(yù)成骨培養(yǎng)基(分別含0.2、0.4、0.8mmol/L尿酸的成骨培養(yǎng)基)為條件對(duì)照組進(jìn)行培養(yǎng)和誘導(dǎo)。培養(yǎng)誘導(dǎo)14d后,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),用堿性磷酸酶染色和茜素紅染色進(jìn)行成骨細(xì)胞鑒定,用11β-HSD1免疫細(xì)胞化學(xué)染色、RT-PCR技術(shù)檢測(cè)各組11β-HSD1 mRNA的表達(dá)。結(jié)果分離培養(yǎng)的細(xì)胞表面標(biāo)志物CD44表達(dá)陽(yáng)性,CD34表達(dá)陰性。成骨培養(yǎng)基和各尿酸干預(yù)成骨培養(yǎng)基誘導(dǎo)的細(xì)胞堿性磷酸酶染色和茜素紅染色均為陽(yáng)性,鈣結(jié)節(jié)數(shù)量隨尿酸濃度增高逐漸增多(P0.05)。免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果顯示各組細(xì)胞胞質(zhì)均可見(jiàn)棕黃色陽(yáng)性染色顆粒.病理圖象分析軟件測(cè)定11β-HSD1含量結(jié)果顯示隨尿酸濃度增高,成骨能力增加,光密度值逐漸減少(P0.05)。RT-PCR結(jié)果顯示各組細(xì)胞均有11β-HSD1 mRNA表達(dá),隨尿酸濃度增高和成骨能力的增加,11β-HSD1 mRNA表達(dá)逐漸減少(P0.05)。結(jié)論尿酸能促進(jìn)hBMSCs向成骨細(xì)胞增生和分化,具有濃度依賴(lài)性和時(shí)間依賴(lài)性,尿酸通過(guò)下調(diào)11β-HSD1 mRNA的表達(dá)促進(jìn)hBMSCs向成骨細(xì)胞分化。
【作者單位】: 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院特需保健科;青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科;
【關(guān)鍵詞】: 尿酸 β-羥化類(lèi)固醇脫氫酶 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 成骨分化
【分類(lèi)號(hào)】:R329
【正文快照】: 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hBMSCs)是一種多潛能干細(xì)胞,具有多方向分化和自我更新能力[1],hBMSCs在體外已成功誘導(dǎo)分化為神經(jīng)細(xì)胞、胰島細(xì)胞、成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞[2-6]。骨質(zhì)疏松癥(osteoporosis,OP)是全身性骨量減少及骨組織顯微結(jié)構(gòu)退化,導(dǎo)致骨脆性增加、骨折危險(xiǎn)性增加的一種骨
【相似文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 殷曉雪,陳仲?gòu)?qiáng),郭昭慶,馬慶軍,黨耕町;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞及其鑒定[J];中國(guó)修復(fù)重建外科雜志;2004年02期
2 代飛,吳軍,許建中,王序全,尹芝華;體外成骨誘導(dǎo)增加人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞刺激PBMCs增殖[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2005年16期
3 黃粵;戴麗冰;鐘曉e
本文編號(hào):372165
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