目的:探索小鼠肺組織內(nèi)造血干細(xì)胞分離、純化與誘導(dǎo)分化為樹突細(xì)胞（dendriric cell,DC）的方法,為小鼠肺組織內(nèi)造血干細(xì)胞的相關(guān)研究提供理論基礎(chǔ)和實驗方法。方法:4只雄性C57小鼠肺組織經(jīng)I型膠原酶、I型DNA酶和淋巴細(xì)胞分離液消化、分離、純化為單個核細(xì)胞,采用流式細(xì)胞儀鑒定和分選Lin^-Sca-1⁺c-Kit⁺細(xì)胞即造血干細(xì)胞（HSC）。向所獲得的HSC加入干細(xì)胞因子（SCF）和白介素（IL）-3促進細(xì)胞增殖。停用SCF和IL-3后,加入粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）和IL-4將HSC誘導(dǎo)分化為DC,加入脂多糖（LPS）促細(xì)胞成熟。倒置顯微鏡下觀察DC形態(tài),流式細(xì)胞術(shù)分析DC細(xì)胞表面分子CD11c、MHC-II、CD80和CD86的表達,酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)（ELISA）檢測IL-12表達水平。結(jié)果:從流式細(xì)胞儀分選鑒定的4只小鼠肺組織單個核細(xì)胞中,共收集HSC2419. 67±247. 59個,純度7. 16%±0. 43%。HSC經(jīng)SCF和IL-3誘導(dǎo)7 d后擴增62. 34±3. 23倍;誘導(dǎo)... 

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【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3711603