目的:摸索抑制神經(jīng)干細(xì)胞（NSCs）中β-catenin表達(dá)的合適條件,為獲得抑制β-catenin表達(dá)的NSCs做準(zhǔn)備。利用抑制β-catenin表達(dá)的NSCs,探索wnt/β-catenin通路在脈沖強(qiáng)磁場(chǎng)促NSCs增殖中的作用。方法:取新生的SD大鼠雙側(cè)側(cè)腦室下的NSCs,然后用無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)14d。利用RNAi原理構(gòu)建β-catenin shRNA慢病毒載體及陰性慢病毒載體,并轉(zhuǎn)染NSCs,確定合適的感染復(fù)數(shù)（MOI）值。將NSCs分為陰性組（陰性病毒轉(zhuǎn)染組）和實(shí)驗(yàn)組（β-catenin shRNA病毒轉(zhuǎn)染組）,并用4T、0.1Hz、8次的脈沖強(qiáng)磁場(chǎng)干預(yù)。在用脈沖強(qiáng)磁場(chǎng)干預(yù)后的1d、7d,采用CCK8法檢測(cè)陰性組和實(shí)驗(yàn)組的NSCs增殖情況。結(jié)果:β-catenin shRNA序列在MOI=10時(shí),對(duì)NSCs中β-catenin的抑制效果最好。陰性病毒組在脈沖強(qiáng)磁場(chǎng)干預(yù)后1d、7d時(shí)NSCs增殖最明顯（P＜0.05）,而實(shí)驗(yàn)組在干預(yù)前后NSCs增殖水平無(wú)明顯變化。結(jié)論:wnt/β-catenin通路在脈沖強(qiáng)磁場(chǎng)促NSCs增殖中起作用。 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 NSCs形態(tài)觀察及免疫組化染色
    2.2 慢病毒轉(zhuǎn)染NSCs并觀察不同MOI值時(shí)RNAi慢病毒對(duì)NSCs中β-catenin mRNA的水平的影響
        2.2.1 Real Time PCR檢測(cè)結(jié)果
        2.2.2 Western Blot檢測(cè)結(jié)果
    2.3 CCK8檢測(cè)脈沖強(qiáng)磁場(chǎng)干預(yù)后的NSCs增殖情況
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]The Effects of High-intensity Pulsed Electromagnetic Field on Proliferation and Differentiation of Neural Stem Cells of Neonatal Rats in vitro[J]. 蒙德鵬,許濤,郭風(fēng)勁,印衛(wèi)鋒,彭濤.  Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2009(06)



本文編號(hào)：3710543