本文關(guān)鍵詞：幽門螺桿菌的培養(yǎng)方法及其在人工模擬環(huán)境中生存狀況的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：幽門螺桿菌（簡稱Hp）是慢性胃炎的致病菌，與消化性潰瘍和胃癌的發(fā)生密切相關(guān)，然而對于其傳播途徑的研究還不是很清楚。近年來提出受污染的水和食物可能作為載體傳播幽門螺桿菌，但缺乏有力證據(jù)支持，仍不清楚其在環(huán)境中的生存情況。本研究擬用燭缸法培養(yǎng)幽門螺桿菌（NCTC11637），并選出最適培養(yǎng)基；將幽門螺桿菌接種到人工模擬的四種實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中，觀察幽門螺桿菌在不同環(huán)境中的生存狀況。 第一部分：幽門螺桿菌培養(yǎng)方法的建立和培養(yǎng)基的比較 目的：建立幽門螺桿菌的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)方法，并選出該實(shí)驗(yàn)條件下最優(yōu)的培養(yǎng)基。 方法：采用燭缸法對幽門螺桿菌進(jìn)行復(fù)蘇，對菌種進(jìn)行鑒定并保存。將相同菌量的幽門螺桿菌接種到不同培養(yǎng)基上，培養(yǎng)5天后，檢測并計(jì)算細(xì)菌數(shù)量，選出本實(shí)驗(yàn)最優(yōu)的培養(yǎng)基。并將不同稀釋度菌液接種到最優(yōu)培養(yǎng)基上，觀察其培養(yǎng)效果。 結(jié)果：本實(shí)驗(yàn)采用燭缸法成功復(fù)蘇幽門螺桿菌，鑒定為幽門螺桿菌陽性。四種固體培養(yǎng)基上幽門螺桿菌生長情況存在差異，本實(shí)驗(yàn)最優(yōu)的培養(yǎng)基為添加7%新生牛血清的布氏瓊脂，有較好的分離培養(yǎng)效果。 結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)室采用燭缸法成功培養(yǎng)復(fù)蘇幽門螺桿菌；在該條件下最優(yōu)的培養(yǎng)基是添加7%新生牛血清的布氏瓊脂，有較好的培養(yǎng)效果，能夠用于下一步實(shí)驗(yàn)從環(huán)境樣本中分離培養(yǎng)幽門螺桿菌。 第二部分：幽門螺桿菌在人工模擬環(huán)境中生存狀況的研究 目的：研究幽門螺桿菌在不同環(huán)境中的生存狀況。 方法：實(shí)驗(yàn)室模擬純水、牛奶、豬肉末和胡蘿卜四種環(huán)境樣本，將幽門螺桿菌接種到25ml(g)樣本中使菌液濃度約為106cfu/ml(g)。樣品分別放置于室溫和4℃，在不同時點(diǎn)采樣從樣品中分離培養(yǎng)幽門螺桿菌，并染色觀察其生存狀況。 結(jié)果：幽門螺桿菌在四種模擬的環(huán)境中均不能生長繁殖，僅能存活一段時間，一段時間后無法分離。幽門螺桿菌在4℃環(huán)境中的存活時間長于室溫，顯微鏡下觀察細(xì)菌形態(tài)逐漸由桿狀轉(zhuǎn)變成圓球體。比較不同環(huán)境介質(zhì)，幽門螺桿菌在牛奶中的存活時間最長，4℃超過10天，室溫超過6天。在豬肉末中的存活時間，4℃中超過6天，室溫能存活3天以上。幽門螺桿菌在4℃水中存活超過5天，而2天后就不能從室溫的水中分離。在胡蘿卜樣本中的存活時間是四種環(huán)境中最短，4℃和室溫都僅能存活數(shù)小時，一天后均不能從胡蘿卜樣本中分離培養(yǎng)出幽門螺桿菌。 結(jié)論：幽門螺桿菌在環(huán)境中不能生長繁殖，僅能存活一段時間。顯微鏡下觀察幽門螺桿菌逐漸轉(zhuǎn)變成不能培養(yǎng)的圓球體。在環(huán)境溫度和菌液濃度相似的條件下，，幽門螺桿菌在牛奶中生存時間較長，故牛奶可能是幽門螺桿菌傳播的重要媒介，豬肉末、水等其他環(huán)境介質(zhì)在傳播中發(fā)揮的作用也不容忽視。
【關(guān)鍵詞】：幽門螺桿菌 燭缸法 培養(yǎng)基 人工模擬環(huán)境 生存狀態(tài) 傳播
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R378.2
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-12
• 第一部分 幽門螺桿菌實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)方法的建立12-29
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料12-16
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法16-21
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-26
• 4. 討論和小結(jié)26-29
• 第二部分 幽門螺桿菌在人工模擬環(huán)境介質(zhì)中生存狀況的研究29-38
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料29-30
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法30-32
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果32-34
• 4. 討論和小結(jié)34-38
• 總結(jié)38-39
• 參考文獻(xiàn)39-43
• 綜述43-54
• 參考文獻(xiàn)50-54
• 附錄54-55
• 致謝55

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：370870