本文關(guān)鍵詞：新型疫苗佐劑甲磺酸去鐵胺及硫氫化鈉佐劑效應(yīng)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：近年來,隨著疫苗研究的不斷深入,特別是分子生物技術(shù)的迅速發(fā)展,重組亞單位疫苗、抗獨(dú)特型抗體疫苗、核酸疫苗以及合成肽疫苗等不斷得到開發(fā)。雖然這些疫苗抗原純度高,相對分子質(zhì)量小,疫苗的不良反應(yīng)低,但是這些抗原的免疫原性普遍較弱,難以有效的誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答,為了提高抗原的免疫原性,必須在這些抗原中添加佐劑以增強(qiáng)它們誘導(dǎo)機(jī)體免疫應(yīng)答的能力。鋁佐劑是目前被批準(zhǔn)用于人類疫苗的主要佐劑。但多年實(shí)踐證明,鋁佐劑對于小分子量抗原增強(qiáng)免疫應(yīng)答的效果不夠理想,可引起局部刺激癥狀和不良反應(yīng),此外鋁鹽還可能會(huì)導(dǎo)致腦病的發(fā)生。因而,研發(fā)出新的、更安全的、有效的疫苗佐劑具有重要意義。 本研究對甲磺酸去鐵胺和硫氫化鈉兩種疫苗佐劑對減毒型甲肝疫苗的體液免疫增強(qiáng)作用進(jìn)行研究。甲磺酸去鐵胺作為臨床上用來治療機(jī)體鐵過載所引起的疾病,具有良好的安全性。硫化氫(H2S)是繼一氧化氮(NO)和一氧化碳(CO)之后,被發(fā)現(xiàn)的第3種氣體信號(hào)分子,在哺乳動(dòng)物體內(nèi)廣泛存在,對心血管系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)等具有重要作用。硫氫化鈉作為硫化氫的供體,在體內(nèi)解離形成硫化氫。而甲磺酸去鐵胺與硫化氫均能在常氧條件下促進(jìn)低氧誘導(dǎo)因子-1(HIF-1)的穩(wěn)定并促進(jìn)其與下游DNA增強(qiáng)子結(jié)合并增強(qiáng)其轉(zhuǎn)錄活性。HIF-1是一種隨著細(xì)胞內(nèi)氧濃度變化而調(diào)節(jié)基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄激活因子,缺氧或低氧時(shí)半衰期顯著延長。研究發(fā)現(xiàn),免疫細(xì)胞常處于病理性或生理性缺氧環(huán)境中,缺氧可以明顯影響免疫細(xì)胞的多種生物學(xué)功能,因而免疫系統(tǒng)的效應(yīng)細(xì)胞需要在能量代謝及功能上適應(yīng)低氧環(huán)境,而HIF-1作為一種轉(zhuǎn)錄因子,在調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞缺氧適應(yīng)性反應(yīng)中起著重要作用。 本研究旨在將甲磺酸去鐵胺和硫氫化鈉兩種物質(zhì)作為新型疫苗佐劑,初步探討這兩種物質(zhì)對甲肝抗原誘導(dǎo)小鼠體液免疫應(yīng)答的影響。實(shí)驗(yàn)中分別用不同劑量的DFO和NaHS與HAV抗原混合均勻后免疫ICR小鼠。實(shí)驗(yàn)分別設(shè)空白對照組、單純HAV抗原對照組、單純鋁佐劑對照組、DFO+鋁佐劑復(fù)合佐劑組、NaHS+鋁佐劑復(fù)合佐劑組以及不同劑量的DFO和NaHS實(shí)驗(yàn)組。經(jīng)間接ELISA法檢測抗-HAVIgG,得到不同時(shí)間點(diǎn)各實(shí)驗(yàn)組小鼠的抗-HAV IgG效價(jià)水平。 本研究初步探索得出DFO和NaHS兩種物質(zhì)均能有效增強(qiáng)HAV抗原的體液免疫應(yīng)答。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,DFO實(shí)驗(yàn)組中,DFO4mg組和DFO8mg組在所測各時(shí)間點(diǎn)的抗-HAV IgG水平顯著高于抗原對照組,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但與鋁佐劑組的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。在NaHS實(shí)驗(yàn)組中,NaHS3umol組和NaHS14umol組在所測各時(shí)間點(diǎn)的抗-HAV IgG水平顯著高于抗原對照組,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但與鋁佐劑組的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。硫氫化鈉與鋁佐劑復(fù)合佐劑組的免疫增強(qiáng)效應(yīng)明顯高于單純抗原對照組,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),并且在16周時(shí)其免疫增強(qiáng)效應(yīng)高于鋁佐劑組,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 在佐劑的安全性實(shí)驗(yàn)中,檢測結(jié)果顯示,各組小鼠均未出現(xiàn)蜷縮、豎毛、搔鼻、流淚、抽搐、痙攣、噴嚏、呼吸困難、水腫及休克等異常反應(yīng)；進(jìn)食、水、糞便和精神等均正常；注射部位無紅腫、結(jié)節(jié)。甲磺酸去鐵胺最高劑量組(DFO8mg組)、NaHS最高劑量組(NaHS14umol組)與生理鹽水對照組的組織切片均未發(fā)現(xiàn)病變。在本實(shí)驗(yàn)設(shè)置的劑量范圍內(nèi),甲磺酸去鐵胺佐劑和NaHS佐劑均未觀察到毒性反應(yīng)。 本實(shí)驗(yàn)中,我們發(fā)現(xiàn)DFO和NaHS兩種物質(zhì)均能有效增強(qiáng)小鼠特異性體液免疫應(yīng)答,同鋁佐劑復(fù)合使用還表現(xiàn)出不同程度的協(xié)同增效作用。這些研究為新型疫苗佐劑研究提供了新方向,今后我們會(huì)對這兩種佐劑在細(xì)胞免疫效應(yīng)方面做進(jìn)一步的研究,以期為這兩種物質(zhì)未來開發(fā)成為新型疫苗佐劑提供完善的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)支持。
【關(guān)鍵詞】：甲磺酸去鐵胺 低氧誘導(dǎo)因子-1 硫氫化鈉 佐劑 甲型肝炎病毒
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R392
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-8
• 前言8-18
• 一、疫苗佐劑概況8-10
• 二、低氧誘導(dǎo)因子-110-14
• 三、甲磺酸去鐵胺14-16
• 四、硫氫化鈉NaHS16-18
• 第一部分 甲磺酸去鐵胺佐劑對HAV抗原誘導(dǎo)小鼠體液免疫應(yīng)答的影響18-28
• 一、材料與方法18-22
• (一) 實(shí)驗(yàn)材料18-19
• (二) 實(shí)驗(yàn)方法19-22
• 二、結(jié)果與分析22-24
• (一) DFO對HAV抗原誘導(dǎo)的小鼠體液免疫應(yīng)答的影響22-23
• (二) DFO安全性實(shí)驗(yàn)23-24
• 三、討論24-27
• 四、小結(jié)27-28
• 第二部分 硫氫化鈉(NaHS)佐劑對HAV抗原誘導(dǎo)小鼠體液免疫應(yīng)答的影響28-47
• 一、材料與方法28-32
• (一) 實(shí)驗(yàn)材料28-29
• (二) 實(shí)驗(yàn)方法29-32
• 二、結(jié)果與分析32-36
• (一) NaHS對HAV抗原誘導(dǎo)的小鼠體液免疫應(yīng)答的影響32-34
• (二) NaHS安全性實(shí)驗(yàn)34-36
• 三、討論36-37
• 四、小結(jié)37-39
• 參考文獻(xiàn)39-47
• 附錄 縮略詞語表47-49
• 致謝49-50
• 個(gè)人簡歷50-51

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：新型疫苗佐劑甲磺酸去鐵胺及硫氫化鈉佐劑效應(yīng)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：369466