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Adipophilin通過(guò)ERK1/2-PPARγ途徑促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積

發(fā)布時(shí)間:2022-10-19 15:57
  目的通過(guò)觀察Ox-LDL孵育RAW264.7細(xì)胞不同時(shí)間后PPARγ和adipophilin表達(dá)和ERK1/2活性及細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積的變化、觀察ERK1/2抑制劑或PPARγ抑制劑/激動(dòng)劑預(yù)處理細(xì)胞后細(xì)胞內(nèi)上述指標(biāo)的變化、觀察穩(wěn)定高表達(dá)adipophilin和沉默adipophilin基因的RAW264.7細(xì)胞株細(xì)胞內(nèi)上述指標(biāo)的變化,探討adipophilin是否通過(guò)ERK1/2-PPARγ信號(hào)途徑促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)蓄積,闡明adipophilin促進(jìn)泡沫細(xì)胞形成的機(jī)制。 方法用50μg/ml Ox-LDL孵育細(xì)胞不同時(shí)間后,分別用半定量RT-PCR和Western印跡檢測(cè)adipophilin、PPARγ的mRNA和蛋白表達(dá)的變化,以Western印跡檢測(cè)ERK1/2及其磷酸化;用ERK1/2抑制劑預(yù)孵育細(xì)胞2 h,再與50μg/ml Ox-LDL共孵育24 h后,檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)上述指標(biāo)的變化;用PPARγ抑制劑或激動(dòng)劑預(yù)孵育細(xì)胞2 h,再與50μg/ml Ox-LDL共孵育24 h后,檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)上述指標(biāo)的變化;構(gòu)建穩(wěn)定高表達(dá)adipophilin和沉默adipophilin的RA... 

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【學(xué)位級(jí)別】:碩士

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